ウサギの腰椎椎間板変性症モデリングのための経腹膜後腹膜アクセスと経皮的穿刺の比較

Summary

このプロトコルでは、ウサギ椎間板変性症 (IVDD) モデルにおける経皮的および経後腹膜穿刺を比較しました。どちらの方法もIVDDを誘発しました。しかし、経後腹膜アプローチでは、より広範な変化と死亡率の低下がもたらされました。

Abstract

この研究では、ウサギで椎間板変性症 (IVDD) を誘発する 2 つの方法の有効性を比較します: 線維輪の経皮的および経後腹膜穿刺。15匹の健康なオスのニュージーランドシロウサギを、偽穿刺、経皮的穿刺、経後腹膜穿刺の3つのグループにランダムに割り付けました。死亡率、形態学的および組織学的評価、放射線画像、バイオマーカー分析を含む包括的な評価が行われ、2つの方法が正確かつ詳細に比較されました。この結果は、両方の穿刺技術がウサギモデルでIVDDを成功裏に誘導したことを示しています。しかし、経後腹膜アプローチでは、経皮的方法と比較して有意に低い死亡率を維持しながら、椎間板の変性変化がより顕著になりました。これらの知見は、IVDDモデリングにおける経後腹膜アプローチの利点を強調しています。この研究は、IVDDモデルの確立に関する貴重な洞察を提供し、腰痛の効果的な治療戦略に関する将来の研究の基礎を築き、最終的に患者の転帰を改善します。

Introduction

過去数十年にわたって、腰痛 (LBP) は、生活の質に影響を与える最も重要な筋骨格系障害として浮上してきました¹.LBPはますます重要な公衆衛生上の懸念事項となっており、労働力の損失や追加の医療費により、社会に大きな経済的負担を強いています^2,3。米国だけでも、LBPに関連する直接的および間接的なコストは、医療費、収入損失、労働損失など、年間1,000億ドルを超えています⁴。LBPは、椎間板変性症(IVDD)5,6,7,8によって引き起こされることが多い。LBPの罹患率が高く、経済的影響が大きいことを考えると、IVDDを正確にモデル化することは、治療戦略を探求するために非常に重要です。

IVDDの病態生理学を理解し、治療戦略を評価するために、さまざまな前臨床 in vivo 動物モデルが開発され、利用されている

Protocol

動物実験手順は、国立衛生研究所が発行した「実験動物の世話と使用に関するガイド」を厳格に遵守し、成都中国伝統医学大学の実験動物倫理委員会によって承認されました(倫理承認番号:2021-23)。生後4か月の健康な清潔なグレードのニュージーランドシロウサギ(2.25 kg±0.25 kg)15匹(オス7匹、メス8匹)を使用しました。動物は、室温が23°C±3°C、湿度が約60%±10%の環境で1週間の適応期間を過ごし、水と餌を自由に摂取することができました。実験に先立ち、15匹のウサギを偽グループ(グループA)、経皮的線維輪穿刺グループ(グループB)、経後腹膜腔輪線維症穿刺グループ(グループC)の3つのグループのいずれかにランダムに割り当て、各グループに5匹のウサギを配置しました。本試験で使用した試薬および装置の詳細は、 材料表に記載されています。

1. 経皮的線維輪穿刺 による ウサギIVDDモデルの確立

注: ウサギ IVDD モデルは、経皮的線維輪穿刺法を使用して確立されました。この手順は、Luo TD et ^al.14 によって記述された穿刺モデリング法に従い、X 線ガイドの下で実施されました (

Results

外科的処置は合併症なく行われました。グループB(経皮的穿刺グループ)のウサギ1匹が手術後に死亡しました。他のすべての動物は、術後に正常な摂食と活動パターンを再開し、実験期間中は生存しました。手術部位では長期にわたる出血や感染は観察されませんでした。

死亡率と全身状態の評価
死亡率は、グループA、グループCともに0%であったのに対し、グループBは20%であった(表1)。グループAのウサギは、通常の一般的な状態を示しました。モデリングする前は、グループBのウサギは偽グループのウサギと同様の条件を示しました。しかし、モデリング後2日目に、グループBのウサギは、活力の低下、活動の低下、ケージの隅で身を寄せ合うことを好むこと、食物摂取量の大幅な減少、水分摂取量が比較的変化しないこと、毛皮が鈍いこと、糞便量の増加、便が緩いことを示しました。時間が経つにつれて、グループBのウサギ1匹が死亡しましたが、残りのウサギは徐々に食物摂取量をモデリング前のレベルに戻しました。しかし、その活力、活動性、毛皮の状態、便の粘稠度は、モデリ.......

Discussion

この研究の結果は、ウサギモデルにおける椎間板変性症(IVDD)の誘導に経皮的および経後腹膜穿刺アプローチの両方が有効であることを示しています。特に、全身状態、死亡率、病理組織学的評価、TUNELアッセイ、および血清TGF-βレベルの包括的な評価に基づいて、経後腹膜穿刺モデルは、死亡率を低く保ちながら、椎間板のより広範な変性変化をもたらしました。

外科的損傷は、IVDDモデルを確立するために最も一般的に使用される方法です。Lipson and Muir(1981)が外科的メス弁輪切開^術16を使用してウサギのIVDDモデルを成功裏に開発して以来、針穿刺12,14,17、輪線維切開¹⁸、全椎間板切除術、部分的および全核切開

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.3 T 獣医学 Maenetic Resonance lmaging(MRI)	NINGBO CHUANSHANJIA	CSJ-MR
アルコール 医療	LIRCON	20230107
ベンジルペニシリン カリウム	江西 Keda 動物 医薬品	140051251
止血鉗子	SHINVA	20211239
注射器	CONPUVON	20153151307
ナイフ刃Hons	Medincal	20210615
Medical吸収性コットンボール	Cofoe	20210006
Medical縫合針	Shanghai Xiaoyi Medical Devices
髄質穿刺針	揚州江州医療機器	20190902	腰椎椎間板
生理生理食塩水	NeilMed を
ポビドンヨウ素溶液	四川IJIS Medical Technology
20221209 準ミクロ天びん	エクスプローラー
ラビット解剖手術台	Zhenhua Biomedical	ZH-BXT-3Z
Shaver	AUX
統計分析 softeare	IBM	SPSS
滅菌ガーゼ	Cofoe	20202140675
手術用手袋	DR.LERSH	20172140028
サージカルナイフ	Hons Medinca	20210019
外科用ピンセット	SHINVA	20210233
USB-Cデータ伝送ライン	KINI
白色光写真顕微鏡	ニコン	エクリプス CI-L