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方法論記事

外科的子宮損傷とその後の妊娠転帰のマウスモデル

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DOI:

10.3791/67977

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2025年6月27日

 , 
1Department of Physiology and Membrane Biology, University of California, Davis, 2Department of Obstetrics and Gynecology, University of California, Davis

この記事について

サマリー

このプロトコルは、マウスモデルで子宮損傷を誘発する手順を説明し、その後の妊娠中に下流の分析を行います。

要約

帝王切開(帝王切開)やその他の処置(拡張および掻爬術、筋腫切除術など)による子宮損傷は、前置胎盤、癒着胎盤スペクトラム(PAS)、帝王切開瘢痕妊娠、子宮破裂など、その後の妊娠でいくつかの罹患率につながる可能性があります。帝王切開は米国での分娩の約30%を占めており、その割合は上昇すると予測されています。したがって、傷害に関連する妊娠障害が発生するメカニズムをより深く理解し、可能な介入をテストするためのプラットフォームが不可欠です。これらの目的を達成するためには、子宮損傷の動物モデル、特にその後の子宮内転帰に対する損傷の影響に対処するモデルが決定的に必要です。このプロトコルは、実験的マウス (Mus musculus) における機械的に誘発された子宮損傷のモデルに対する新しい外科的処置を説明しています。手術の準備、子宮損傷自体の誘発、および術後の回復手順が実証されています。妊娠していないマウスと妊娠中のマウスの両方の下流解剖に関する追加情報が提供されます。全体として、 インビボ モデルで子宮損傷を誘発するための一連の手順を詳述することにより、このプロトコルは、子宮創傷治癒の分子的および細胞的イベントおよびその後の妊娠への影響を解明するための扱いやすい方法を提示する。

概要

米国での分娩の3分の1は帝王切開(帝王切開)で行われていますが、子宮がどのように治癒し、損傷した子宮がその後の妊娠でどのように合併症を引き起こすかについてはほとんどわかっていません1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12、13.これらの合併症には、子宮破裂、前置胎盤、PAS、帝王切開による妊娠などがあり、これらを合わせると、帝王切開1、2、6、8、12、14、15、16、17を1回以上受けた患者の~2.5%が罹患しています。前置胎盤は、子宮の下部における胎盤の異常な配置によって特徴付けられる4,16。これは、子宮頸部の身体的閉塞と妊娠中の出血リスクの増加を引き起こすだけでなく、PAS 8,12 のより重篤で侵襲的な状態の重要な危険因子でもあります。PASは、胎盤が母体組織、さらには膀胱や直腸まで過度に浸潤することによって定義され、生命を脅かす母体出血を防ぐために帝王切開子宮摘出術が必要になることがよくあります12,17。帝王切開の瘢痕妊娠はまれですが、流産、胎児死亡、早産など、関連する罹患率が高い18,19。以前の帝王切開の病歴に関連する合併症に加えて、子宮摘出術や拡張掻爬術(D&C)などの他の子宮手術も患者の罹患率につながります。例えば、後期自然流産後にD&Cを受けた患者の~30%、および平滑筋腫に対して2回目の子宮鏡下切除を受けた患者の最大46%が、アッシャーマン症候群(AS)に特徴的な子宮内癒着を発症する20,21。ASは女性の~2%に影響を及ぼし、無月経、月経困難症、胚着床不全、再発性流産、早産、および/またはPASを引き起こします21,22。したがって、以前の子宮外傷に関連するかなりの主要な罹患率と死亡率を考えると、実験動物モデルは、子宮創傷が治癒するメカニズムと子宮損傷がその後の妊娠結果にどのように影響するかを解明するだけでなく、新しい診断法と治療法の開発のためのプラットフォームとしても重要です23,24。

したがって、いくつかの研究は子宮損傷のマウスモデルを開発しました。しかし、初期の研究では、子宮損傷がその後の妊娠に及ぼす影響を調べていなかったか25、または卵巣摘出マウスの子宮内膜受容性窓外への胚着床を調査するために子宮管腔表面の損傷を限定していた26。これらの知識のギャップに対処するために、このプロトコルに記載されているモデルは、他の最近の研究とともに、マウス27,28に子宮損傷を導入するための新しい外科的方法論を提示します。このプロトコルは、その幅広いアクセシビリティ、遺伝的扱いやすさ、短い妊娠期間、出生から思春期までの迅速な時間、大きな同腹児サイズ、および費用対効果のために、モデル生物として一般的な実験用マウスを使用します。さらに、マウスの2つの子宮角の解剖学的特徴により、各実験動物に無傷の角による内部制御が可能になり、瘢痕で直接局所的な欠陥を分離する能力が可能になります。子宮環境全体にわたる全体的な欠陥。この議定書に記載されているアプローチは、単純な背側開腹術を伴い、その後、単一の子宮角の子宮内膜層と子宮筋層の両方を通して切開を作成するためにバリド針を使用します。この方法論は、帝王切開や筋腫切除術で見られる損傷を最もよく模倣していますが、AS29,30 に先行する D&C などの非切開性損傷を調査するために簡単に変更できます。傷害後、動物は回復することを許可され、その後の子宮内転帰27,28に対する傷害の影響を調べるために、時限妊娠のためにスタッドオスと交配されます。

全体的な戦略は他の最近の研究と似ていますが、このプロトコルには明確な利点を提供する側面があります。例えば、LiらとBurkeらの両者は、ここで述べたように背側ではなく腹部から子宮にアクセスした31,32。背部アプローチは、実行が簡単で、動物の術後の迅速な回復に役立ちます。Burkeらの研究における妊娠していないマウスについては、曲がった針または掻爬器を使用して子宮内膜を掻き取り、したがってD&Cをより忠実に模倣したが、これは、C切開および筋腫切除術をより厳密にモデル化するこのプロトコルの全層切開損傷とは対照的に、D&Csをより忠実に模倣した32。周産期マウスでは、Burkeらは、ここで述べるように、胚が着床する抗メソメトリアル表面とは対照的に、メソメトリアルに切開を導入した。Li et al.31が使用したハサミとは対照的に、バリ付き針を使用することにより、このアプローチは、D&C、帝王切開、筋腫の両方をモデル化するために、全層から子宮内膜限定の損傷により簡単に変更できる。LiらとBurkeらはどちらも子宮創を縫合糸で閉じたが、これは帝王切開中の出来事により忠実であるが、治癒過程に追加の変動性をもたらし、異物の影響の可能性ももたらす31,32,33,34,35,36。ラットにおける同様の研究では、腹部経路を用いて、妊娠していない動物38,39および妊娠した37動物の両方で縫合糸37,38,39を用いて閉鎖される全層切開37,38または切除39の子宮創傷を生成している。したがって、ここで提示されたプロトコルは、最小限の外科的経験を必要とし、全層子宮損傷に続く胚着床および胎盤関連イベントに対処し、子宮内膜27,28へのD&C様損傷を含むさまざまな問題に容易に適応できる、容易で再現性のあるアプローチに関心のある研究者に特に適しています。

このプロトコルのステップ 1 では、術前の手順の概要を説明します。ステップ2では、子宮角の損傷を誘発するための外科的処置について説明します。最後に、ステップ3では、子宮手術がその後の妊娠に及ぼす影響を調査するために、妊娠中の母親の解剖について詳しく説明します。全体として、この研究は、子宮の創傷治癒と関連する妊娠転帰のユニークなげっ歯類の手術モデルを提示しています。

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プロトコル

このプロトコルで示されているすべての手順は、カリフォルニア大学デービス校の動物管理および使用委員会(IACUC)によって承認されています(IACUCプロトコル#23985)。このプロトコルに記載されている手順は、通常、7〜10週齢で体重19〜25gのC3H女性に対して行われますが、このプロトコルは、研究者の質問に応じて、すべての系統、年齢、および体重の女性マウスに適しています。手術前に動物を観察し、怪我や苦痛の兆候がない健康な動物のみが研究に使用されることを確認します。試薬や使用した機器の詳細は、 資料表に記載されています。

1.手術領域の準備

  1. 手術の日の前に、すべての手術器具(細い鉗子(#5または#55)、ニードルホルダー、湾曲した虹彩はさみ、およびスキンクリップアプリケーター(クリップ付き))を滅菌ポーチとオートクレーブに入れます。
  2. 注射麻酔薬を使用する場合は、0.9%塩化ナトリウム生理食塩水で10 mg / mLケタミンと1 mg / mLキシラジンの作業希釈液を準備します。.
    注:あるいは、ノーズコーン を介して 送達されるイソフルランは、麻酔40の許容可能な形態です。
  3. 手術の直前に、白衣、外科用ヘアキャップ、外科用フェイスマスク、手袋などの個人用保護具(PPE)を着用してください。
  4. 術前領域を準備します。
    注:これは、ペーパータオルで裏打ちされた1つの吸収性ベンチパッドと、手術前に麻酔を受けた後に動物が休むことができるケージで構成されている場合があります。動物用ケージにペーパータオルを敷き、術前のベンチパッドの隣に置きます。
  5. 手術用に指定された動物の体重を、はかりの上にある風袋引きされたプラスチック製のビーカーまたは同様の容器に入れます(図1A)。体重を記録して、麻酔薬、鎮痛薬、生理食塩水の適切な量を計算します。
  6. 次の手順 で 動物に注射麻酔を投与します。
    1. インスリン注射器に適切な量のケタミン/キシラジンの使用希釈液(ステップ1.1を参照)を充填し、100 mg / kgのケタミンと10 mg / kgのキシラジンの用量を達成します(図1B)。.
      注:たとえば、体重が22 gの動物には、0.22 mLの10 mg / mLケタミンと1 mg / mLのキシラジン麻酔薬溶液が必要です。.
    2. 動物をしっかりと擦り傷、仰臥位41 に反転させた後、適切な用量のケタミン/キシラジンを腹腔内(I.P.)に注射します(図1C)。
      注意: 必要に応じてスカッフガードを使用できます。
  7. 動物を約3分間監視します。この期間中に動きが観察された場合は、さらに0.02 mLのケタミン/キシラジン溶液I.P.41 を注入します。.
  8. 麻酔が送達されてから~10分後に前足のつま先をつまむことにより、適切な鎮静を確認します40,42。
    注:動物は通常、10〜15分以内に麻酔の手術面を達成します。C3Hマウスは通常、C57BL/6またはBALB/c動物よりも~20%多くの麻酔薬を必要とします(例:20gの動物に対して0.24mLのケタミン/キシラジン溶液)。投与量は、個々の菌株に基づいて経験的に決定する必要がある場合があります。
  9. 運動の停止後、皮下(SC)に0.5 mg / kg徐放性ブプレノルフィンを動物に41 注射します(図1D)。
    注:徐放性ブプレノルフィンの少量で粘性の性質を考えると、もう一方の手で皮膚をテントで覆いながら肩甲骨の近くに注射することをお勧めします。.
  10. 動物の目を保護するために、滅菌綿棒を使用して眼科用軟膏を塗布します(図2A)。
  11. 麻酔をかけた動物を、ペーパータオルで裏打ちされた術前の吸収パッドの上に置きます。
  12. ファートリマーを使用して、背中の下部から中央の切開部位を慎重に剃ります(図2B)。ペーパータオルを使用して余分な毛を取り除き、次に糸くずローラーを使用します(図2C)1.12
    注:脱毛クリームは、完全な毛皮除去のために滅菌綿棒を使用して適用することができます。
  13. 次の方法で、アルコール調製パッドとポビドンヨードスワブスティックを使用して切開部位を消毒します。
    1. 目的の切開部位の中心から始めて、アルコール調製パッドで円を描くように外側に拭きます(図2D)。
    2. 次に、同様の方法でポビドンヨードスワブスティックで切開部位を拭きます(図2E)。
    3. 新鮮なアルコール調製パッドとポビドンヨードスワブスティックを交互に使用して、合計3ラウンドします。
  14. 次のように手術領域を準備します( 図3Aを参照)。
    1. 2番目の吸収パッドをイルミネーターの下に置き、続いて吸収パッドの上に滅菌外科用ドレープを置きます。.
    2. 手袋とイルミネーターを70%エタノールで滅菌します。
    3. 手術用ドレープの端に滅菌手術器具を置き、動物を手術領域の中央に置きます。
  15. 無菌のドレープ(例:Glad Press 'n Seal)を動物にかぶせ、鼻だけを露出させて、無菌フィールドを作成します(図3B)。
    注:使用中、清潔な手術器具は、手術領域内の滅菌ドレープなどの滅菌表面に置くことができます。
  16. その部位に切開を生成する準備として、剃った領域の上に小さな正方形を切り取ります(図3C、D)。切開部位の特定の位置については、ステップ2.1(以下)の注を参照してください。

2. 子宮損傷の外科的導入

注:このセクションでは、妊娠していない雌マウスの単一の子宮角に損傷を導入するための手術と手順について説明します。まず、背側開腹術を行い、子宮角の上部を露出させます。次に、バリ付きの25 G針を子宮内腔に挿入して子宮内膜を損傷し、必要に応じて子宮筋層を切断します。これにより、損傷した子宮角に縦方向の傷ができ、子宮がどのように治癒するか、損傷がその後の妊娠にどのように影響するかなどの疑問に対処するためのさらなる実験が可能になります。手術を行う前に、動物が適切に鎮静されていることが重要です。ステップ1で説明したように、いくつかのパラメータは、動物が適切に麻酔されていることを示します。これらには、運動の停止、呼吸数の減少、および前肢反射の欠如が含まれます。さらに、軽い接触による後肢反射は存在しないはずであるが、十分な圧力がかかると、適切な麻酔にもかかわらずこの反射が残ることがある40,42。

  1. 細い鉗子(#5または#55)で皮膚を保持しながら、ハサミ(直線または湾曲した虹彩はさみ)を使用してマウス背側の皮膚に2〜3mmの切開部を切開します。
    注:尾の付け根と首の間の距離を~1/3、正中線から~0.5cm切ります。 図 4A を参照してください。
  2. 筋膜の2〜3 mmの切開部を切開し、すぐに卵巣脂肪パッドを覆います(図4B)。
  3. 一対の鉗子で卵巣脂肪パッドをそっとつかみ、筋膜と皮膚の切開部から抽出します(図4C)。
    注:卵巣と子宮を体腔から取り除くことができるように、脂肪パッドの一部を切断する必要がある場合があります。女性の生殖管自体のどの部分も傷つけないようにするだけでなく、脾臓や脂肪パッドの近くの大きな血管も傷つけないでください。
  4. 子宮の上部3分の1を露出させた後、次の手順を実行します(図4D)。
    1. 子宮卵管結紮を鉗子で優しく固定します(図5A、B)。
    2. バリ付きの針の鋭い端を使用して、子宮の上部に小さな穴を開けます(図5A、B)。
    3. 針を慎重に挿入し、子宮角の抗中間心表面をこすり始めます(図5C)。
    4. 子宮内膜層と子宮筋層の両方の完全な穿孔が達成されるまで、掻き取りを続けます(図5D)。
      注:鉗子や針の挿入による過度の圧力は、子宮卵管結紮術で子宮を引き裂く可能性があり、その結果、子宮角が卵管と卵巣から分離します。子宮卵管結紮に損傷を与えることなく、バリ付き針で子宮内に侵入穴を作ることが難しい場合は、バリなしの25Gまたは27Gの針を代わりに使用できます。次いで、バリ付き針をこの穴に挿入して、上記のように切開部を生成することができる。ここで説明するアプローチでは、子宮角に全層切開を導入します。ただし、子宮の損傷がそれほど広範でない場合は、穴を開けた25G針を使用して、子宮内膜などの子宮の最も内側の層のみをこすり落とすことができます。さらに、この手順では、追加の変数として異物反応を導入するのを避けるために、子宮を閉じるために縫合糸を使用しません。ただし、子宮縫合はこの手順の許容可能な代替手段です。
  5. 鉗子を使用して、負傷した子宮角を体腔にそっと戻します(図6A、B)。
  6. 縫合糸43は、筋膜をサイズ4-0縫合糸で閉じ、余分な糸を取り除きます(図6C-E)。
    注:通常、筋膜の切開を閉じるには、単一の縫合糸で十分です。
  7. スキンクリップアプリケーターを使用して、クリップで皮膚切開を閉じます(図6F)。
    注意: 切開を閉じるには、1〜2つのクリップが必要です。
  8. 鎮痛剤として 10 mg/kg のカルプロフェンを41 個皮下に注射し、術後の支持療法のために 0.5 mL の生理食塩水 (0.9% NaCl) を注射します。 図 7A を参照してください。
  9. 耳パンチまたは番号付きの金属製の耳タグを使用して、動物44を識別します。
  10. 術後の回復のために動物を加熱ケージに入れます(図7B)。
    注:動物が頭を持ち上げることができたら、寝具のある通常のハウジングケージに戻します。以下のステップ2.12を参照してください。
  11. 同じ手術ツールを使用して追加の手術を行う場合は、次の手順を実行します。
    1. まず、70%エタノールとペーパータオルで清掃します。
    2. 次に、ツールを乾燥ガラスビーズ滅菌器に30秒間入れて再滅菌します。
    3. ツールを室温まで冷ましてから、さらに使用してください。
  12. 移動の再開後、ケタミン/キシラジンを使用した場合は手術からの回復後~1〜2時間後、またはイソフルランによる麻酔後~5分後に動物を動物施設に収容します。
  13. 痛みや苦痛の兆候がないか動物を毎日監視し、手術後最大3日間、必要に応じて10 mg / kgのカルプロフェンを毎日注射します。.
    注:しかめっ面スケール45 と体調スコア46 は、動物の健康状態の標準的な獣医評価です。

3. 子宮損傷の影響を評価するための妊娠中マウスの交配と解剖

注:特定の研究課題に応じて、子宮損傷後にさまざまなエンドポイント分析が行われる場合があります。例えば、妊娠していない動物は、創傷治癒の動力学を調べるために、損傷後の異なる時点で解剖されてもよい27。さらに、負傷した動物は、その後の妊娠に対する損傷の影響を調べるために、自然交配または胚移植 によって 含浸させてもよい27。このステップでは、損傷した子宮環境における胚および胎盤の発達の評価について説明します。特に、このステップでは、妊娠12.5日目(E12.5、膣栓の朝をE0.5と定義、膣栓の特定については以下のステップ3.2で詳細)の動物を時限交配および解剖するように設定することについて詳しく説明します。全体として、ステップ3は、特定の一連の実験的問題を検討するために損傷後に実施できる下流分析の例を提供します。

  1. 術後の回復後、負傷した雌を11週齢以上の雄と共収容することにより、時限交配47 を行う。
    注:損傷後の回復期間は、特定の研究課題によって決定されます。このプロトコルを使用した研究では、通常、時間指定の交配を開始する前に、30日間の回復(5〜105日間のテスト済み)が可能です。トリオまたはハーレム交配は、住宅のコストを削減し、この実験的アプローチの効率を高めます。ただし、このような交配構成には施設の承認が必要であり、妊娠中の解剖のみを目的としていることに注意してください。トリオまたはハーレムの交配からの生児出産は、動物にストレスを引き起こし、一般的には推奨または許可されていません。
  2. 毎朝、栓が特定されるまで膣栓のチェックを行い( 図8参照)、その時点で雌をスタッドの雄とは別に収容することができます。
    注:プラグは、膣管内の白い塊(図8A)または膣領域全体の膨らみとして現れます。プラグの兆候が外部に見えない場合は、プローブシーカーをゆっくりと膣管に挿入できます(図8C、D)。プローブシーカーの曲がりまで先端が完全に挿入される前の抵抗は、プラグの指標です。プラグチェックは、一日のうちにプラグが抜け落ちるため、午前~7時または早朝に実行する必要があります。膣栓のチェックの詳細については、Behringer et al.48を参照してください。.妊娠の追加でより信頼性の高い確認のために、高周波超音波49,50を使用することができます。超音波が利用できない場合、または望ましくない場合、体重増加はE7.7551までに合理的な精度で妊娠を予測することが実証されています。
  3. 動物を(制度的に承認されたプロトコルに従って)希望の在胎週数で犠牲にします。動物の安楽死の実施方法と解剖の在胎週数の選択方法の詳細については、以下の注を参照してください。
    注意: プラグの日付はE0.5に指定されています。犠牲時の在胎週数は、対処されている実験的な問題に基づいて選択してください。例えば、E4.5-E5.5は、着床周囲生物学の研究に適しています。E11.5-E14.5は、融合した胎盤の存在を含む、妊娠中期の胎盤欠損を調査するために推奨されます。動物の安楽死に関する制度的ガイドラインに従ってください。許容される手順は、8 分間の CO2 潜伏期間、その後の 2 分間の待機および観察期間、そして最後に、子宮頸部脱臼 による 安楽死の二次確認です。
  4. 安楽死後、次のように解剖の準備をします( 図9Aを参照)。
    1. 動物を解剖面に仰臥位に置きます。.
    2. 必要な解剖ツール(鉗子、はさみ)と、1×PBSで満たされたシャーレを入手します。
    3. 解剖部位に毛皮の緩いストランドが付着するのを防ぐために、解剖する前にまず腹部の毛皮を70%エタノール、水、または1×PBSで濡らします。
  5. 腹部の皮膚を鉗子で保持し、胸郭の底に達するまで腹部の長さに沿ってV字型に切開することにより、下腹部を切開します(「V」のストロークごとに~2cmの切開)。図 9B-D を参照してください。
  6. 下にある腹筋壁にV字型の切開(「V」の文字のストロークごとに~2cmの切開)を作成し、鉗子で保持し、腹腔が見えるまでV字型に切り込みます。 図 9E、F を参照してください。
  7. 腸やその他の腹部の内容物をそっと脇に動かして子宮を露出させます。胚を含む子宮を腹腔から引き出して視界に入れます。 図 9G を参照してください。
  8. 子宮と囲まれた胚を腹腔から取り出します。子宮を1×PBSであらかじめ充填したシャーレに入れます。 図 9H を参照してください。
    注意: 鉗子を使用して、最初に卵巣脂肪パッドをつかみます。次に、はさみを使用して、最初に卵巣脂肪を切断し、次に中心動脈、膣、他の子宮角に沿った中心動脈、最後に2番目の卵巣脂肪パッドを切断することにより、子宮を体腔の残りの部分から分離します。顕微鏡検査や組織学などの所望の下流分析のために、必要に応じてさらなる解剖を行うことができる。データの例については、 図 10 を参照してください。

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結果

麻酔薬としてケタミン/キシラジンを使用して手術を行った後、動物は通常、~1時間以内で部分的に可動し、~4~6時間以内に完全に可動します。イソフルラン麻酔からの回復は、通常、数分以内に行われます。創傷の裂開や痛みなど、発生する可能性のある合併症は、通常、手術後1〜3日以内に明らかになります。皮膚の切開が治癒し、スキンクリップを取り外す準備が整うまで、痛みや合併症を監視するために、毎日の福祉チェックを実施します。

動物は、子宮の創傷治癒を評価するために、手術後のさまざまな時点で犠牲にされる場合があります。たとえば、 図 10A は損傷後 3 日で損傷した子宮を示し、 図 10B は損傷後 1 か月の損傷した子宮を示しており、この時点で肉眼的な瘢痕化の兆候が最小限に抑えられています。必要に応じて、追加のパラメータをテストできます。これらには、手術中または手術後の薬物治療、追加の損傷、または動物のさまざまな年齢での手術が含まれます。子宮損傷が胚の着床と発生にどのように影響...

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ディスカッション

帝王切開は、米国での分娩の~33%、ブラジルやエジプトなどの国では分娩の最大55〜65%を占めています12,52、しかし、損傷後に子宮がどのように治癒するか、またはこれらの損傷がその後の妊娠にどのように影響するかについてはほとんどわかっていません。以前の帝王切開は、付着胎盤スペクトラム(PAS)や前置胎盤などの妊娠障害の主要な危険因子ですが、これらが発生するメカニズムは不明です3,6,14,17。帝王切開の受診率が上昇する中、疾患のメカニズムを理解し、新たな診断法や治療法を開発するためのプラットフォームを確立することが急務となっています。しかし、子宮損傷の動物モデルは限られたままです25,31,32。...

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開示事項

著者は、宣言する利益相反を持っていません。

謝辞

カリフォルニア大学デービス校のTeaching and Research Animal Care Services(TRACS)の継続的な飼育、手続き、および物流のサポートに感謝します。カリフォルニア大学デービス校心臓血管研究所(CVRI)の動物モデルコアとコアディレクターのYi-Je (Jay) Chen博士、D.V.M.、Ph.D.の技術指導とサポート、および撮影のための手術室の使用に感謝します。この研究にご協力いただいたZhang研究室の皆様に感謝いたします。 図5A は BioRender.com(https://BioRender.com/ig9sfon)を使用して作成されました。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
注射用 0.9% NaCl、滅菌フレゼニウス・カビ63323-186-10
25 G x 5/8インチBDプレシジョングライド&トレード;針BDの305122
70%エタノールフィッシャーサイエンティフィックBP82031GAL
吸収性4-0ビクリル縫合糸エチコンJ214
動物ケージVWRの10712-110 および 10715-323研究者の動物施設が提供するケージは許容されます
動物の耳パンチフィッシャーサイエンティフィック13-812-201
AutoClip巻閉鎖システムファインサイエンスツール12020-00
U-100インスリンシリンジフィッシャーサイエンティフィック14-826-79BDブランド
ベタジン綿棒メドラインMDS093901
ブプレノルフィン徐放性、1.3 mg/ml (Ethiqa XR)フィデリス・ファーマシューティカルズ099114代替徐放性ブプレノルフィンまたはブプレノルフィンHClは許容されます
カルプロフェン (RIMADYL) 50 mg/ml ゾエティスリム-00284R1
湾曲した虹彩はさみ世界の精密機器501759G
ドライガラスビーズ手術器具滅菌器VWRインターナショナル75999-324
乾式ガラスビーズ詰め替えVWRインターナショナル75999-332
通常8〜12週齢の雌マウス、例えば、C3H株チャールズ川025
細いはさみ - 湾曲した10.5cmファインサイエンスツール14370-23
毛皮トリマーフィッシャーサイエンティフィック50-195-4544
うれしいプレス 'n シールフィッシャーサイエンティフィックNC1089054
手袋、ニトリルフィッシャーサイエンティフィック19-130-1597C
H2O, 滅菌蒸留ファインサイエンスツール15230170
手術用イルミネーターアムスコープHL150-AY
ケタミン、100 mg/mL (ゼタミン)デクラ501072
白衣ユーリンS-15376W-50型
光学顕微鏡フィッシャーサイエンティフィックS13039
糸くずローラーフィッシャーサイエンティフィック17-018-329
Nair脱毛クリームターゲット049-06-3304
ニードルホルダーファインサイエンスツール12500-12
ペーパータオルスコット1804
ペトリ皿フィッシャーサイエンティフィック08-757-100
リン酸緩衝生理食塩水(PBS)サーモフィッシャーサイエンティフィック10010023
プラスチック製ビーカーサーモフィッシャーサイエンティフィック12010250
ベントエンド付きプローブシーカーフィッシャーサイエンティフィック08-995
フィッシャーブランド&トレード;インスタントシーリング滅菌ポーチ 9 cm (W) x 13.3 cm (H)フィッシャーサイエンティフィック181250
フィッシャーブランド&トレード;インスタントシーリング滅菌ポーチ 9 cm (W) x 23 cm (H)フィッシャーサイエンティフィック181251
鉗子、ファイン、#5ファインサイエンスツール11254-20
鉗子、ファイン、#55 ファインサイエンスツール11295-51
規模フィッシャーサイエンティフィックS93805
はさみ, 外科用ファインサイエンスツール14060-09
スプレーボトルフィッシャーサイエンティフィックS413505P
滅菌アルコール調製パッドフィッシャーサイエンティフィック22-363-750
滅菌眼科動物用軟膏プルーベPH-プラルベ-獣医
眼軟膏塗布用滅菌綿棒フィッシャーサイエンティフィック18-366-472
滅菌パウチフィッシャーサイエンティフィック19-910-673
手術用ドレープフィッシャーサイエンティフィック50-209-1792
手術用ヘアキャップユーリンS-10480BLU型
サージカルマスクフィッシャーサイエンティフィック18-048-010
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