このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。

方法論記事

ウマの血液から多血小板血漿を得るための簡単な二重遠心分離チューブ法

2.4K 回視聴

⸱

DOI:

10.3791/67985

⸱

2025年8月15日

 ,  , 
1Grupo de Investigación Terapia Regenerativa, Departamento de Salud Animal, Universidad de Caldas, 2Grupo de Investigación Patología Clínica Veterinaria, Departamento de Salud Animal, Universidad de Caldas, 3Grupo de Investigación DICOVI, Departamento de Diseño, Universidad de Caldas

この記事について

サマリー

多血小板血漿 (PRP) は、ウマの筋骨格系疾患の治療に使用されます。さまざまな技術により、血小板と白血球の濃度が異なる PRP が得られます。この記事では、馬の血液からPRPを得る方法について説明します。

要約

多血小板血漿 (PRP) は、変形性関節症、腱障害、デスモパチーなどの馬の慢性筋骨格系疾患の日常的な治療として広く利用されています。この有効性は、内因性または外因性に活性化されるかどうかにかかわらず、このオルソバイオリック剤の活性化時に放出される高濃度の成長因子と抗炎症サイトカインに起因します。人気が高まっているにもかかわらず、馬に PRP を取得するための技術を示す説明ビデオが著しく不足しています。

この研究では、馬で PRP を得るための二重遠心チューブ法を調べます。6頭の馬の全血をクエン酸ナトリウムチューブに採取し、120 × g で5分間、240 × g で5分間の2回遠心分離しました。PRPの平均血小板濃度は、103 μL×360.95 ± 56.31血小板(PLT)であり、平均白血球濃度は103 μL×1.53細胞で3.05±でした。PRPの血小板数は全血の2.41倍高かったのに対し、PRPの白血球濃度は0.44倍低かった。PRP中のPLTの収集効率は17%で、PRP中の白血球の収集効率は3.1%でした。PRP中のトランスフォーミング成長因子ベータ1および血小板由来成長因子BBの平均濃度は、それぞれ2601.82(95%信頼区間(CI):2358.88-2844.76)pg / mLおよび1208.05(95%CI:1051.09-1365.02)pg / mLでした。これらの結果は、PRP が馬の開業医による使用に適したシンプルで費用対効果の高い方法を通じて効率的かつ再現性よく得られることを示しています。

概要

多血小板血漿 (PRP) は、腱障害、デスモパチー、変形性関節症、蹄葉炎などの慢性ウマ筋骨格系疾患の治療に一般的に使用されるオルソバイオロジクス製品です 1,2,3。また、手足の傷や眼表面疾患の治療にも効果的です 4,5。その使用の理論的根拠は、主に血小板によって放出される高濃度の成長因子(GF)に基づいています6。白血球は、調節性サイトカインと抗炎症性サイトカインを放出することによっても寄与します7。形質転換成長因子ベータ 1 (TGF-β1) や血小板由来成長因子 BB (PDGF-BB) などの GF は、強力な同化作用、増殖作用、血管新生作用、および抗炎症作用を発揮します8。外因性または内因性の活性化により、PRPは多血小板ゲルに重合し、細胞輸送、アンカリング、および分化を促進します6,9。このように、PRPは、GFやサイトカイン10の容器としてだけでなく、複雑な生きた足場として機能します。

いくつかのシステムは、人間と馬の両方に使用されるPRP製品を分類しています6、11、12。最も単純で最も一般的なシステムの1つは、白血球濃度に基づいてこれらの血液成分を分類します11,12。この分類によれば、白血球濃度が低いか無視できる程度で、血小板濃度が低いから中程度のPRP製品は、馬の全血中のレベルと比較して、純粋なPRP(P-PRP)6,11,12と呼ばれます。対照的に、白血球濃度が検出可能から高濃度で、血小板濃度が中程度から高いPRP産物は、多白血球および多血小板血漿(L-PRP)6,11,12と呼ばれます。

P-PRP 生成物は通常、クエン酸ナトリウムやクエン酸、リン酸塩、ブドウ糖などの抗凝固剤を含むチューブに馬から全血を採取するチューブ間遠心分離によって得られます13。血液を2回遠心分離して、血小板を他の成分から分離します14。対照的に、L-PRP製品は主にヒト血液用に設計された半自動キットを使用して調製され、その一部は馬での使用が検証されています6,15。これらの半自動キットは一般に特殊な遠心分離機を必要とし、コストが高く16、無菌処理に関する潜在的な懸念があり、臨床現場での実用化を複雑にする可能性があります17。さらに、これらのキットは過剰な白血球または赤血球の望ましくない濃度をもたらす可能性があり、特定の臨床状況では有害になる可能性があります18。たとえば、白血球数の上昇は過度の炎症を引き起こす可能性があり、赤血球の過剰は治癒過程を妨げたり、組織の炎症や拒絶反応などの合併症を引き起こしたりする可能性があります15;しかしながら、馬のL-PRPを製造するために一般的に使用される方法は、特殊な装置を必要としない重力プロセスを含む19。

これらの制限を考慮すると、PRP 調製のためのよりシンプルで費用対効果の高い代替品が非常に望ましいです。さまざまな in vitro 研究、筋骨格系疾患の実験モデル、およびウマでの観察により、P-PRP 製品と L-PRP 製品の両方が処理された細胞および組織に有益な効果があることが示されています 1,2,20。これらの製品は治癒を促進し、炎症を軽減し、組織の再生を促進します6.ただし、馬の治療に P-PRP または L-PRP を使用するかどうかの決定は、技術的および経済的要因によって影響を受ける可能性があります。

著者らによると、ウマの血液からPRP製品を得るための広く検証された段階的な手順を説明し、完全に実証した研究は発表されていません。この記事では、馬から全血を安全に採取し、実験的および臨床的使用に適した PRP 製品を製造するために必要な手順の概要を説明します。また、血小板と白血球の定量化、およびその治療効果に不可欠な TGF-β1 と PDGF-BB の濃度の測定によるこのオルソバイオロジクスの検証も含まれます。この研究は、プロセスを標準化し、製品の有効性を実証することで、馬の開業医が自信を持って正確に PRP を調製するための信頼性が高くアクセスしやすい方法を提供することを目指しています。

ウマのPRPを製造するための二重遠心分離法は、2006年にArgüellesら14 によって最初に説明されましたが、プロトコルがビデオで完全に提示されたのはこれが初めてです。このビデオは、筋骨格系疾患を持つ馬に、より高度で高価な PRP キットを使用できない技術的な制限や予算の制約に直面している馬の開業医にとって、実用的なリソースとして機能することを目的としています。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

プロトコル

この研究は、コロンビアのマニサレスにあるカルダス大学獣医教育病院で、馬における PRP の調製と使用に関する内部プロトコルに従って実施されました。この研究は、当施設で臨床的に治療された足の不自由な馬からデータが得られたため、内部動物管理委員会の承認を必要としませんでした。このプロトコルの開発には、平均年齢 7.4 歳 (± 2.6) 歳のコロンビア産クレオール馬 6 頭、牝馬 3 頭、去勢馬 3 頭のデータが使用されました。馬の飼い主は研究の性質について知らされ、インフォームドコンセントフォームに署名しました。研究に含まれるすべての馬は、治療中の筋骨格系の問題を除いて、臨床的に健康でした。基礎血小板数が100×103/mLの全血を超える動物のみが含まれました。血小板濃度が低い馬は血小板減少症と見なされる可能性があることに注意することが重要です14。さらに、これらの動物は、正常な血球数、肝臓と腎臓の臨床生化学パラメータ、およびウマ種の正常範囲内の尿分析値を示しました。

1. 馬の制限と皮膚消毒

  1. 馬と獣医師の両方の安全のために、動物の行動に応じて、馬(Eqqus caballus)を臨床検査シュートまたは手綱でしっかりと拘束します(図1A)。次に、首の片側の半ばの3分の1、頸静脈の上に電気シェーバーで5cm×5cmの髪の毛をクリップします。
    注: 一部の飼い主は、馬を切り取らないことを好みます。ある研究によると、P-PRP21 の細菌汚染を防ぐために静脈穿刺部位でのヘアクリッピングは必要ありません。したがって、この手順は獣医師の裁量に委ねられています。
  2. 非滅菌ガーゼと手袋を使用して、頸静脈のクリップされた領域に少なくとも10 cm、約3分間予備的な非滅菌皮膚準備を行います。消毒フォームに浸したガーゼを数枚円形に塗布します(図1B)。
  3. 滅菌手袋と消毒剤に浸したガーゼの両方を使用して、静脈穿刺部位を無菌的に準備します。首の部分の皮膚を円を描くように約5分間こすります。95%エチルアルコールに浸した滅菌ガーゼでその部分を清掃します。

2.無菌採血

  1. 95%エチルアルコールに浸したガーゼで事前に洗浄した16本の4.5 mLクエン酸ナトリウムチューブを、清潔なプラスチックラックに入れます。真空管のゴムキャップに95%エチルアルコールを含浸させ、特にニードルカップリングのくぼみに含浸させます。
    注:一般に、2.5 mLのPRPを得るには、8本の4.5 mLクエン酸ナトリウムチューブが必要です。特定の症例で使用されるチューブの数は、治療する軟部組織または特定の関節によって異なります。
  2. 消毒された頸静脈部位にバタフライニードルを滅菌的に挿入し(図2A)、4.5 mLのクエン酸ナトリウムチューブをホルダーに取り付けます(図2B)。チューブを軽く振って、プラスチック製のラックに入れます。
    注:4.5 mLのクエン酸ナトリウムチューブは、自動ヘモグラムおよびハードスピン遠心分離後の血漿の調製に使用されます。次に、この血漿を、PRPとの成長因子およびサイトカイン濃縮比較のネガティブコントロールとして使用します。

3. 多血小板血漿調達

  1. 全血を含む4.5 mLのクエン酸ナトリウムチューブをベンチ遠心分離機で90°の角度で4箇所のスイングアウトローターに入れます。チューブを室温で120 × g で5分間遠心分離します。遠心分離後、クエン酸血液を含む4.5 mLチューブとさらに2本の10 mLプレーンチューブをラックに配置し、クラスII層流フード内のオペレーターの利き手ではない側にラックを置き、無菌の不浸透性ドレープの上に置きます。
    注: ある研究では、クラス II 層流フードは、PRP 調達中の細菌汚染を防ぐために必須ではないことが示唆されています21。代わりに、PRPは気流やほこりのないクリーンルームで調製できます。このシナリオでは、血液チューブラックを無菌の不浸透性のドレープで覆われたテーブルに置くことができます。
  2. 最初の遠心分離:フェイスマスクと滅菌手袋を着用し、層流フードの内側の利き手側に滅菌針(21 G 5/8")と組み合わせた10 mL滅菌ルアーシリンジを置きます。
    注:この瞬間から、利き手は手袋をはめた手は常に無菌のままですが、クエン酸ナトリウムチューブのゴムキャップは、手袋をはめていない利き手を使用して取り外す必要があります。
  3. バフィーコートの上3 mmの各遠心分離されたクエン酸血液チューブに滅菌針を挿入し(図3A)、体液の乱流と血液吸引を避けて、血漿画分の50%を穏やかに吸引します。4本の4.5 mLチューブから10 mLの血漿を吸引したら、5〜10 mLの滅菌プレーンチューブに分配します(図3B)。
    注意: 利き手ではない手でこれらのチューブのゴム製キャップを取り外し、ドレープの無菌部位に置くか、細菌汚染を避けるために保持します。
  4. 2回目の遠心分離:ゴム栓でチューブを再び閉じ、ベンチトップ遠心分離機で4箇所のスイングアウトローターで90°の角度で平衡状態に置き、これらのチューブを室温で240 × g で5分間回転させます。
    注:相対遠心力(RCFまたは g)の選択は、ウマの血液からPRPを得るためのこの方法を最初に説明した独創的な研究14 に基づいています。さらに、この方法は、他の著者によって再現性について評価されています22。
  5. チューブをラックに置き、クラスII層流フード内の非利き手側、以前に敷設した無菌の不浸透性ドレープの上に配置します。
  6. 利き手ではない手を使用してゴムキャップを取り外し、滅菌利き手を使用して、10 mL滅菌ルアーシリンジに取り付けられた18 G、90 mm脊髄針を使用して、血漿の最初の75%をゆっくりと吸引します(図3C)。この注射器は血小板が少ない血漿 (PPP) が含まれているため、廃棄するか、他の実験的または臨床用途のために予約してください。次に、以前に使用した滅菌脊髄針を5または10 mLの滅菌ルアーシリンジに取り付けて、5〜10 mLの滅菌プレーンチューブから残りの血漿(25%)を吸引します。この画分はP-PRPとして知られています(図3D)。
    注:特定の臨床および実験条件下では、0.5〜1 mLのPRPのアリコートを自動ヘモグラムに使用し、続いて酵素結合免疫吸着アッセイによる成長因子(TGF-β1 およびPDGF-BB)分析を行います。これらのメディエーターの測定は、カルシウム塩またはトロンビン23 によるP−PRPの活性化の3時間後、または温度変化または非イオン性界面活性剤24の添加による細胞損傷の誘導後に実施してもよい。
  7. PRPを含む滅菌ルアーシリンジを、オルソバイオロジカル製品の細菌汚染を防ぐために、滅菌針またはキャップを取り付けた小さな不浸透性の滅菌ドレープで包みます(図4A)。
    注:治療される馬の解剖学的構造は、このプロトコルのセクション1に記載されているように、無菌注射用に準備する必要があります。不快感を最小限に抑え、馬と獣医師の両方の安全を確保するために、馬は適切に拘束され、鎮静される必要があります。PRP 製品は滅菌手袋と針を使用して取り扱う必要があり、開業医の好みに基づいて活性化される場合と活性化されない場合があります (図 4B)。

4. 統計分析

  1. 全血およびPRPの血小板数と白血球数に関するデータを収集します。コルモゴロフ・スミルノフ検定を使用して、データの正規性を評価します。データが正規分布(P > 0.05)の場合、 t検定を使用してセルデータを比較および分析します。血小板と白血球の濃度データが正規分布していない場合 (P < 0.05)、ウィルコクソン テストを使用してデータを比較および分析します。
  2. 次の式に従って、P-PRP中の血小板および白血球効率濃度を決定します25:
    血小板採取効率 = figure-protocol-1 × 100
    白血球収集効率 = figure-protocol-2 × 100
  3. 血漿(陰性対照)PRP上清(グルコン酸カルシウムによる活性化3時間後)、および非イオン性界面活性剤溶液の添加によって得られたPRPライセート中のTGF-β1 およびPDGF-BB濃度からデータを収集します。
  4. 一般化線形混合モデルを使用して、血漿、PRP上清、およびPRPライセート間の成長因子濃度を比較します。統計的に有意な差がある場合は、Tukeyの事後検定を適用します。
  5. すべての検定で統計的に有意な p < 0.05 の値を検討します。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

結果

平均血小板数 (血小板 × 103/μL) は、全血よりも PRP の方が有意に高かった (p < 0.001)。対照的に、PRPの平均白血球濃度(白血球×103 / μL)は、全血の白血よりも有意に低かった(p < 0.001)(表1)。具体的には、PRP の血小板数は全血の 2.41 倍高く、PRP の白血球濃度は 0.44 倍低かった。PRP中のPLTの収集効率は17%で、PRP中の白血球収集効率は3.1%でした。

TGF-β1 濃度は、血漿、PRP上清、およびPRPライセートの間で有意に異なり(p < 0.001)、PRPライセートの濃度が最も高く、次にPRP上清、および血漿が続きました(図5A)。一方、PDGF-BB濃度は、血漿と比較してPRP上清およびPRPライセートで有意に(p < 0.001)高かった(図5B)。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

ディスカッション

慢性筋骨格系疾患の治療のための人間および獣医学におけるPRPの使用は増加しています1,8,26,27。しかし、実験および臨床現場でのPRPアプリケーションに対する主な批判は、これらの血液成分を調製するために使用される技術とプロトコルに関する基本的なデータが欠如していることです28。さらに、最終的なPRP産物28,29の細胞組成、特に血小板および白血球の濃度、および成長因子含有量に関する情報が不十分である。

これに関連して、in vitro30

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

開示事項

著者には開示すべき利益相反はありません。

謝辞

この記事を公開するための財政的支援をしてくれたコロンビアのマニサレスにあるカルダス大学のVicerrectoría de Investigaciones y Postgradosに感謝します。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
10 mLの普通静脈採血管 BD Vacutainer、フランクリンレイクス、ニュージャージー州、米国品番 366430これはあくまで一例であり、他のブランドのチューブも使用できます。
4.5 mLクエン酸ナトリウムチューブ(105 M / 3.2%) BD Vacutainer、フランクリンレイクス、ニュージャージー州、米国107451これはあくまで一例であり、他のブランドのチューブも使用できます。
ベンチ遠心分離機Rotofix 32A、Hettich GmbH、トゥットリンゲン、ドイツ他のベンチ遠心分離機も使用できます。
バタフライニードル(21 G&0.75インチ)、12インチ。チューブとあらかじめ取り付けられたホルダー Safety-Lok 採血セット、BD バキューテイナー、フランクリン レイクス、ニュージャージー州、米国参考367296これはほんの一例であり、他のブランドのバタフライニードルを使用できます。
2.3-4% のクロルヘキシジンフォーム溶液;これらの製品のブランド名または商品名は、国によって異なる場合があります。
クラスII層流フードサーモフィッシャーサイエンティフィック、米国マサチューセッツ州ウォルサム他のクラスII層流フードも使用可能
ELISAリーダーサーモフィッシャーサイエンティフィック、米国マサチューセッツ州ウォルサム
エチルアルコール95%これらの製品のブランド名または商品名は、国によって異なる場合があります。
ヒトPDGF-BB DuoSet ELISAR&D Systems, Inc、マッキンリープレイス、ミネソタ州、米国ダイ220
ヒトTGF-β1 DouSet ELISAR&D Systems, Inc、マッキンリープレイス、ミネソタ州、米国ダイ240
4-10% のポビドンヨウ素フォーム溶液;これらの製品のブランド名または商品名は、国によって異なる場合があります。
SPSS 25.0 ソフトウェアIBM Corp、SPSS、NY、USA
さまざまな容量の滅菌ルアーシリンジ Discardit Syringe、BD Vacutainer、フランクリンレイクス、ニュージャージー州、米国これは一例にすぎず、他のブランドの注射器を使用できます。
滅菌脊髄針(18 G&x;90 mm) BD Quincke Spinel Needle、フランクリンレイクス、ニュージャージー州、米国これはほんの一例であり、他のブランドの脊髄針を使用できます。

参考文献

  1. Pérez Fraile, A., González-Cubero, E., Martínez-Flórez, S., Olivera, E. R., Villar-Suárez, V. Regenerative medicine applied to musculoskeletal diseases in equines: a systematic review. Vet Sci. 10 (12), 666(2023).
  2. Boone, L., Peroni, J. Introduction to equine biologic and regenerative therapies. Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 419-427 (2023).
  3. Carmona, J. U., Gómez, W. A., López, C. Could platelet-rich plasma be a clinical treatment for horses with laminitis. J Equine Vet Sci. 61, 46-57 (2018).
  4. Gilger, B. C. Use of biologics and stem cells in equine ophthalmology. Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 541-552 (2023).
  5. Pereira, R., et al. Evaluation of three methods of platelet-rich plasma for treatment of equine distal limb skin wounds. J Equine Vet Sci. 72, 1-7 (2019).
  6. Camargo Garbin, L., Lopez, C., Carmona, J. U. A critical overview of the use of platelet-rich plasma in equine medicine over the last decade. Front Vet Sci. 8, 641818(2021).
  7. Jiménez-Aristizabal, R. F., et al. Long-term cytokine and growth factor release from equine platelet-rich fibrin clots obtained with two different centrifugation protocols. Cytokine. 97, 149-155 (2017).
  8. McCarrel, T. M. Equine platelet-rich plasma. Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 429-442 (2023).
  9. Garbin, L. C., Olver, C. S. Platelet-rich products and their application to osteoarthritis. J Equine Vet Sci. 86, 102820(2020).
  10. Anitua, E., et al. Advances in platelet rich plasma-derived extracellular vesicles for regenerative medicine: a systematic-narrative review. Int J Mol Sci. 24 (17), 13043(2023).
  11. Dohan Ehrenfest, D. M., Rasmusson, L., Albrektsson, T. Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends Biotechnol. 27 (3), 158-167 (2009).
  12. Dohan Ehrenfest, D. M., et al. Classification of platelet concentrates (platelet-rich plasma-PRP, platelet-rich fibrin-PRF) for topical and infiltrative use in orthopedic and sports medicine: current consensus, clinical implications and perspectives. Muscles Ligaments Tendons J. 4 (1), 3-9 (2014).
  13. Giraldo, C. E., Álvarez, M. E., Carmona, J. U. Effects of sodium citrate and acid citrate dextrose solutions on cell counts and growth factor release from equine pure-platelet rich plasma and pure-platelet rich gel. BMC Vet Res. 11, 60(2015).
  14. Argüelles, D., et al. Evaluation of single and double centrifugation tube methods for concentrating equine platelets. Res Vet Sci. 81 (2), 237-245 (2006).
  15. Carmona, J. U., López, C., Sandoval, J. A. Review of the currently available systems to obtain platelet related products to treat equine musculoskeletal injuries. Recent Patents on Regenerative Medicine. 3 (2), 148-159 (2013).
  16. Jildeh, T. R., Su, C. A., Vopat, M. L., Brown, J. R., Huard, J. A review of commercially available point-of-care devices to concentrate platelet-rich plasma. Cureus. 14 (8), e28498(2022).
  17. Arita, A., Tobita, M. Adverse events related to platelet-rich plasma therapy and future issues to be resolved. Regen Ther. 26, 496-501 (2024).
  18. Sutter, W. W., Kaneps, A. J., Bertone, A. L. Comparison of hematologic values and transforming growth factor-beta and insulin-like growth factor concentrations in platelet concentrates obtained by use of buffy coat and apheresis methods from equine blood. Am J Vet Res. 65 (7), 924-930 (2004).
  19. Mirza, M. H., et al. Gait changes vary among horses with naturally occurring osteoarthritis following intra-articular administration of autologous platelet-rich plasma. Front Vet Sci. 3, 29(2016).
  20. Peng, C., Yang, L., Labens, R., Gao, Y., Zhu, Y., Li, J. A systematic review and meta-analysis of the efficacy of platelet-rich plasma products for treatment of equine joint disease. Equine Vet J. 56 (5), 858-869 (2024).
  21. Alvarez, M. E., Giraldo, C. E., Carmona, J. U. Monitoring bacterial contamination in equine platelet concentrates obtained by the tube method in a clean laboratory environment under three different technical conditions. Equine Vet J. 42 (1), 63-67 (2010).
  22. Pereira, R. C. dF., et al. Avaliação de sete protocolos para obtenção de plasma rico em plaquetas na espécie equina. Ciência Rural. (6), (2013).
  23. Giraldo, C. E., Álvarez, M. E., Carmona, J. U. Influence of calcium salts and bovine thrombin on growth factor release from equine platelet-rich gel supernatants. Vet Comp Orthop Traumatol. 30 (1), 1-7 (2017).
  24. Carmona, J. U., López, C., Ceballos-Márquez, A. Temporal release and denature of several mediators in pure platelet-rich plasma and temperature-induced platelet lysates derived from a similar bovine platelet concentrate. Vet Med Int. 2022, 2609508(2022).
  25. Weibrich, G., Kleis, W. K., Hitzler, W. E., Hafner, G. Comparison of the platelet concentrate collection system with the plasma-rich-in-growth-factors kit to produce platelet-rich plasma: a technical report. Int J Oral Maxillofac Implants. 20 (1), 118-123 (2005).
  26. Cecerska-Heryć, E., Goszka, M., Serwin, N., et al. Applications of the regenerative capacity of platelets in modern medicine. Cytokine Growth Factor Rev. 64, 84-94 (2022).
  27. Bahadir, B., Sarikaya, B. Platelet-rich plasma in the management of rotator cuff tendinopathy. Jt Dis Relat Surg. 35 (2), 462-467 (2024).
  28. Harrison, P., Alsousou, J. Studies on platelet rich plasma - new editorial policy for "platelets". Platelets. 31 (3), 281-282 (2020).
  29. Chahla, J., et al. A call for standardization in platelet-rich plasma preparation protocols and composition reporting: a systematic review of the clinical orthopaedic literature. J Bone Joint Surg Am. 99 (20), 1769-1779 (2017).
  30. Ríos, D. L., López, C., Álvarez, M. E., Samudio, I. J., Carmona, J. U. Effects over time of two platelet gel supernatants on growth factor, cytokine and hyaluronan concentrations in normal synovial membrane explants challenged with lipopolysaccharide. BMC Musculoskelet Disord. 16, 153(2015).
  31. Carmona, J. U., et al. In vitro effects of platelet-rich gel supernatants on histology and chondrocyte apoptosis scores, hyaluronan release and gene expression of equine cartilage explants challenged with lipopolysaccharide. BMC Vet Res. 12 (1), 135(2016).
  32. Castillo-Franz, C., López, C., Carmona, J. U. Evaluation of the catabolic and anabolic gene expression effects and histology changes induced by platelet-rich gel supernatants in equine suspensory ligament explants challenged with lipopolysaccharide. MLTJ-Muscles Ligaments and Tendons. 11 (1), 1-14 (2021).
  33. Argüelles, D., Carmona, J. U., Climent, F., Muñoz, E., Prades, M. Autologous platelet concentrates as a treatment for musculoskeletal lesions in five horses. Vet Rec. 162 (7), 208-211 (2008).
  34. Carmona, J. U., Argüelles, D., Climent, F., Prades, M. Autologous platelet concentrates as a treatment of horses with osteoarthritis: a preliminary pilot clinical study. J Equine Vet Sci. 27 (4), 167-170 (2007).
  35. Dejnek, M., et al. Content of blood cell components, inflammatory cytokines and growth factors in autologous platelet-rich plasma obtained by various methods. World J Orthop. 13 (6), 587-602 (2022).
  36. Giraldo, C. E., et al. Effects of the breed, sex and age on cellular content and growth factor release from equine pure-platelet rich plasma and pure-platelet rich gel. BMC Vet Res. 9, 29(2013).
  37. Zimmermann, R., et al. Sample preparation technique and white cell content influence the detectable levels of growth factors in platelet concentrates. Vox Sang. 85 (4), 283-289 (2003).

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

再版と許可

タグ

PRP
ウマの血液から多血小板血漿を得るための簡単な二重遠心分離チューブ法
お問い合わせ
図書館に推薦する

プライバシー

利用規約

ポリシー

著作権 © 2026 MyJoVE Corporation. 無断転載を禁じます。