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方法論記事

閉経後骨粗鬆症のラットモデルにおけるブプレウルスの骨保護的役割

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DOI:

10.3791/68675

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2025年8月22日

この記事について

サマリー

本研究では、閉経後骨粗鬆症の卵巣摘出ラットモデルを用いて、ブプル(柴胡)経口液が炎症誘発性因子を抑制し、抗炎症因子を増強することで骨の微細構造を改善することを実証しました。これは、その抗炎症メカニズムがエストロゲン欠乏症誘発性骨粗鬆症を部分的に軽減することを示唆しています。

要約

このプロトコルは、卵巣摘出 (OVX) ラットの閉経後骨粗鬆症に対するチャイフー投与の効果を調査することを目的としています。8週齢の雌スプレイグ・ドーリーラットは、閉経後骨粗鬆症モデルを確立するために背側アプローチを使用して両側卵巣摘出術を受けた。異なる用量の柴胡経口液剤を経口強制経口投与を12週間連続して投与し、続いて骨の微細構造を評価し、炎症性サイトカインレベルを測定しました。中用量および高用量のChai hu治療は、OVXラットの骨量減少を部分的に阻害し、炎症誘発性サイトカイン発現を低下させ、抗炎症性サイトカインレベルをアップレギュレートしました。骨破壊の重症度は低用量から高用量に有意に減少し、骨の微細構造再建において用量に関連した改善が観察されました。Chai hu は、エストロゲン欠乏症による骨量減少と微細構造の悪化を軽減し、それによってこの OVX モデルにおける OP の進行を抑制しました。これは、関与する経路の抗炎症効果に起因している可能性があります。

概要

骨粗鬆症 (OP) は、骨量の減少、骨強度の低下、および骨の微細構造の破壊を特徴とする一般的な代謝性骨疾患です1。OP は原発性または続発性のいずれかとして現れる可能性があり、原発性 OP は閉経後 OP (PMOP)、老人性 OP、および特発性 OP (青年によく発生します) に分類されます。その中で、I 型 PMOP は主に PM 女性に発生し、エストロゲン2 の循環レベルの低下により閉経後の骨密度が著しく低下します。これは全身性代謝性骨疾患であり、破骨細胞活性の増加と激しい分化をもたらします3。さらに、骨吸収の強度はその形成よりもはるかに大きいため、骨量が減少し、骨の脆弱性と骨折のリスクが増加します4。

現在の研究では、変形性関節症や歯周炎などの多くの慢性炎症性疾患が重大な骨量減少と関連していることが判明しており、炎症が OP5 と密接に関連している可能性があることが示唆されています。PMの女性は年齢を重ねると、内分泌の変化に加え、生理機能や免疫機能が低下し、慢性炎症状態が長期間放置されます。これらの炎症促進因子や T 細胞由来のサイトカインの多くは、骨量減少に重要な....

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プロトコル

動物を含むすべての実験手順は、実験動物のケアと使用に関するNIHガイド(第8版)に従って実施され、Youjiang Medical University for Nationalitiesの動物倫理委員会によって特別に承認されました(承認番号2024071001)。

1. ネットワーク薬理学の分析

注:サイバー薬理学は、システム生物学、計算生物学、薬理学を組み合わせたアプローチであり、生体分子ネットワークを解析することで薬物の作用機序と薬物間相互作用を理解することを目的としています25。

  1. Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform (TCMSP: http://ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php) などのツールを使用して、経口バイオアベイラビリティ (OB) と薬剤類似性 (DL) が良好な活性化合物をスクリーニングします。OBを≥30%、DLを≥0.1826に設定します。Chai hu を検索して [Herb Details ....

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結果

GO機能とKEGG経路濃縮分析

バイオインフォマティクスにおけるGOおよびKEGG濃縮分析を利用して、PMOPに対するChai Huの潜在的な作用機序を予測しました。疾患に対する柴胡の有効成分と交差する標的遺伝子のGO濃縮解析では、2138の有意なエントリが得られ、各グループで上位10の有意な結果がリストされています (図2D)。生物学的プロセス (図2A)に関しては、交差する遺伝子は主にリポ多糖類と活性酸素種へのフィードバックに関与していました。細胞成分セクション (図2B)では、交差する遺伝子は、主に細胞の分泌顆粒の内腔とコラーゲン含有細胞外マトリックスに関与していま.......

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ディスカッション

PMOP は、PM の女性によく発生する骨代謝の全身性障害であり、エストロゲンの不足によって引き起こされ、骨芽細胞と破骨細胞のバランスが崩れ、破骨細胞の骨吸収が促進され、骨芽細胞の骨産生が減少します31。体内の炎症因子のレベルも破骨細胞と骨芽細胞の分化に影響を与え、炎症誘発性因子の過剰発現が破骨細胞の分化に寄与することを示す研究が増えています32。同様に、抗炎症因子の過剰発現は破骨細胞の発現を阻害します33。これは、抗炎症主導のレジメンを使用して PMOP を治療することが実現可能である可能性があることを示しています。

漢方薬の柴胡は、炎症の治療、風邪やインフルエンザの予防、体内のホルモン分泌の調節、肝臓の保護のために臨床現場で広く使用されています34.ハーブ処方のチャイフーは、他の薬と組み合わせてPMOPの治療のために容易に.......

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開示事項

著者らは、利益相反はないと宣言している。

謝辞

この研究は、百色市科学研究および技術開発プログラムと、2025 年広西チワン族自治区大学若年および中年教師科学研究基礎能力向上プロジェクト (プロジェクト番号: 2025KY0549) の支援を受けました。著者らは、原稿の編集をしてくれたインペリアル・カレッジ・ロンドンのデヴ・スーラナ博士とYMUNに感謝します。ZYとLYRは、この作業に等しく貢献しました。

....

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
0.9%塩化ナトリウム注射 華仁製薬電話番号 h1712059
1×PBS サーモフィッシャー10010023
75%アルコール 南京試薬C069156931
95%エタノール 南京試薬C0691520075
無水エタノールマックリンE809056
Bupleurum chinense 河南百泉薬局株式会社Z41021539
脱灰液 ソーラービオE1171
エリスロマイシン軟膏 広州白雲山製薬グループ株式会社株式会社白雲山河吉公製薬工場H44023088
イソプロピルアルコール 済南金日和化学有限公司23727-29-9
ペニシリンVカリウムカプセル四川製薬H20103156
ポリホルムアルデヒド(CH2O)nビヨタイムP0099
ポビドンヨード消毒剤 広東恒建製薬有限公司H44023924
リアルタイム蛍光PCRキットYeasen Biotechnology11201ES03
RNA抽出キットモナドバイオテックMI20201S
RNA逆転写キットYuGongバイオテックEG15123S
ペントバルビタールナトリウム 上海吉祥バイオテクノロジー株式会社JX082085
トリゾール サーモフィッシャー〒15596026CN

参考文献

  1. An, H., et al. Hyperoside alleviates postmenopausal osteoporosis via regulating mir-19a-5p/il-17a axis. Am J Reprod Immunol. 90 (1), e13709(2023).
  2. Wang, S., et al. Alginate oli....

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再版と許可

タグ

卵巣摘出ラット骨微細構造柴胡治療骨量減少抑制炎症性サイトカイン抗炎症経路エストロゲン欠乏骨破壊用量反応