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方法論記事

インビボ ドライアイの診断と管理における共焦点顕微鏡: 画像プロトコルと解釈に焦点を当てる

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DOI:

10.3791/69156

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2025年11月11日

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この記事について

サマリー

この記事では、ドライアイの診断と治療における in vivo 共焦点顕微鏡の操作と効果を実証し、将来の研究の基礎を提供するために in vivo 共焦点顕微鏡の応用と結果を調査します。

要約

生体内 共焦点顕微鏡 (IVCM) は、その非侵襲性と高解像度で大きな注目を集めています。角膜、結膜、まぶたの縁、マイボーム腺、ニキビダニなどの寄生虫など、多数のドライアイ疾患(DED)関連の眼表面構造を細胞レベルでin vivo 観察し、客観的に定量化することができます。この機能は、眼科医が DED の特定の病因とサブタイプを特定するのに役立ち、それによって正確な診断、標的治療、予後評価が容易になります。ただし、IVCM の操作と報告のための標準化されたプロトコルは依然として不足しています。この装置を効果的に利用し、高品質のレポートを生成するには、眼科の知識と技術的な操作の両方に習熟することが不可欠です。この記事では、DED 患者の IVCM 検査の手順と微妙な違いについて詳しく説明します。これは、DED に対する最初の JoVE ステップバイステップ IVCM プロトコルです。臨床医の参考資料として機能し、業務の非効率性を回避し、臨床管理を導く高品質の角膜および眼表面画像を一貫して取得できるようにすることを目的としています。

概要

地域の医療資源の制約や患者の経済的負担により、DED の臨床診断は、多くの場合、基本的な側面 (細隙灯顕微鏡下での観察、目の乾燥やかゆみの訴えなど) または単一の指標 (侵襲的な涙液層の破壊時間、涙液分泌検査、またはマニデックスの侵入)。IVCM アプリケーションは広く利用可能ではなく、ましてやプロトコルの標準化もできません。ただし、IVCMを備えた眼科施設の場合、著者は、角膜、結膜、眼瞼縁などの欠落を避けるために、初めての患者に包括的な顕微鏡検査を受けることを推奨しています。あいまいなDEDの場合やニキビ包虫の検出の場合、IVCMは明示的な回答に特に適しています。

ドライアイ疾患 (DED) は、涙液の質または量の異常、および涙液層の安定性の低下によって引き起こされる慢性的な眼表面状態として定義されます。ドライアイワークショップII(DEWS II)では、DEDは、水欠乏性ドライアイ(ADE)、蒸発性ドライアイ(EDE)、混合ドライアイ(MDE)、ドライアイの素因、および前臨床ドライアイ状態の5つのタイプに分類されます1。Ralene et al. 2017 年から 2022 年にかけて発表された文献を含め、さまざまな種類のドライアイにおける IVCM の重要な臨床実践を要約しました2.最近の研究では、炎症が D....

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プロトコル

検査手順は漢口愛爾眼科病院の倫理委員会によって承認されており、すべての患者からインフォームドコンセントが得られています。

注: 患者選択の選択基準には、ドライアイとかゆみを訴える患者、および定期的な眼科検査を求める個人が含まれます。患者選択の除外基準には、角膜穿孔または角膜穿孔が差し迫っている患者、局所眼麻酔薬にアレルギーのある患者、若すぎる患者(例:3歳未満)または高齢すぎて協力できない患者、眼瞼裂の狭い患者まぶたの検鏡を収容できない患者、妊婦、およびその他の理由で協力できない人。簡単なワークフロー図を 図 2 に示します。そして詳細な操作手順は次のとおりです。

1. 事前審査

  1. 材料の準備:IVCMデバイス、角膜コンタクトキャップ、眼科局所麻酔薬、カップリング剤、医療用綿棒、まぶたの検鏡、アルコールボール、アルコールリザーバー、抗炎症点眼薬(図3)。
  2. IVCM装置の主要コンポーネント(ハイデルベルグ網膜断層撮影ロストック角膜モジュール(HRT-RCM))、フォーカシングノブ、モニタリングカメラ、視線誘導灯、あご当て、額当て、左右目を切り替えるボタン、HRT-....

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結果

すべてのIVCM顕微鏡画像は、384ピクセル×384ピクセルの解像度、400μm×400μmの観察野で取得されました。適切に「ゼロ」にした場合、この検査では画像フレームに3つの可能な結果のみが表示されます:i)画像がまったくない(実験の失敗):中央の光学ゾーンは標的組織と接触しませんでした。ii) 部分的な画像のみ (図 7) またはその他の異常な状況 (図 8) (実験の失敗): 中央の光学ゾーンが標的組織との接触が不完全または緩い。iii)鮮明で完全な画像(実験の成功):中央の光学ゾーンは、標的組織との完全な接触を達成しました(図9 〜 図17)。したがって、課題は、成功した画像と失敗した画像を区別することではなく、操作要件に従って、デバイスの中央光学ゾーンとターゲット組織の間の適切な位置合わせと接触を確保することにあります(

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ディスカッション

「in vivo 共焦点顕微鏡」と「ドライアイ疾患」(2025 年 6 月取得)というキーワードを使用した PubMed 文献検索では、300 件>出版物が得られました。特に、2021年以降、年間論文の出版率は年間約40件で安定しています。眼表面疾患における IVCM の広範な応用により、過去 2,000 年間 (2004 年から 2024 年) にわたって 2,000 件>研究が生み出されました。臨床的には、IVCM は眼表面の病状の細胞レベルの評価に革命をもたらしました。この技術により、無症候性疾患の症状の検出が可能になり、早期診断と精密な介入が容易になり、上記の後者の 2 種類の DED と正確に一致します。さらに、IVCM に基づく治療プロトコルにより、客観的な改善に応じて証拠に基づいた投薬の漸減または中止が可能になり、それによって治療負担とそれに伴う社会経済的影響が軽減されます。たとえば、マイボーム腺の開口部と腺房の閉塞に対するマイボーム腺の詰まり解消治療(図14 および

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開示事項

著者は利益相反を宣言しません。

謝辞

著者らは、いくつかの写真を手伝ってくれた漢口アイア眼科病院の Lina Jin 氏と武漢アジア心臓病院眼科の Min Chen 氏、および手術手順に取り組んでいるすべての参加者とスタッフに感謝します。この研究は、武漢市衛生健康委員会(WX23A20)の科学研究プロジェクトからの助成金によって支援されました。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
吸収性コットンボール建奇、中国http://www.hnjianqi.comアルコールボールを作るために、小さい
アルコール系ジェル中国、上海、李康31107904ハンド消毒液のすすぎフリージェル、500ml
カーボマー点眼薬ヴィディジック、ドイツ8187195結合剤用の滅菌眼用ゲル、10g
角膜接触キャップ(トモキャップ)ドイツ、ハイデルベルク18829光学媒体と角膜の無菌接触
まぶたスペキュラムアシコン、中国6102A目を開かせてくれて
ハイデルベルク・アイ・エクスプローラーソフトウェアドイツ、ハイデルベルクバージョン 1.5.2.0IVCMデバイスに付属するソフトウェア
IVCM装置ドイツ、ハイデルベルクHRT-?,08398試験の主な装備
医療用綿棒エサウンド・メッド、中国www.e-soundmed.com患者の目の洗浄と開け方の補助には10cm
75%の医療用アルコール中国、恵昌www.huichang888.cnアルコールボールを作るには75%以上;5% 500ml
0.4% オキシブプロカイン塩酸塩点眼薬三天、日本http://www.santen.co.jp眼科外麻酔薬 0.4%(0.5ml:2mg)
トブラマイシン点眼薬トブレックス、ベルギー8453824抗炎症点眼薬 0.3%(5ml:15mg)

参考文献

  1. Craig, J. P., et al. TFOS DEWS II definition and classification report. Ocul Surf. 15 (3), 276-283 (2017).
  2. Ralene, S., Kenneth, Y., Yu-Chi, L., Louis, T. In vivo confocal microscopy in different types of dry eye and meibomian gland dysfunction. J Clin Med.

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