ここでは、ゼブラフィッシュの再循環飼育のための新しく、建設が容易で低コストなプロトコルを紹介します。
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ここでは、ゼブラフィッシュの再循環飼育のための新しく、建設が容易で低コストなプロトコルを紹介します。
ゼブラフィッシュは、飼育や維持が安価と考えられているため、 生体内 での研究に人気のあるモデル生物です。しかし、商業用住宅システムは小規模な研究グループにとってはコストがかかりにくいことが多いです。複数のカスタムビルドのゼブラフィッシュ飼育システムが存在しますが、水質の不安定さ、水循環速度の悪さ、そして壊れやすい水槽の問題を抱えています。これらの設計上の問題は、これらのシステムの長期研究プログラムの実現可能性を低下させます。この記事では、新しくて手頃な価格で製作が簡単なカスタムメイドの循環ゼブラフィッシュ用ハウジングラックを紹介します。このシステムは、以前に発表した飼育用タンク設計と組み合わせることで、ゼブラフィッシュのどの段階でも飼育が可能です。複数のフィルターと滅菌レベルがあり、安定した水質条件を確立することで、ゼブラフィッシュの研究や教育のための長期利用が可能となっています。以下に説明するシステムは、私たちの研究所で9年間ゼブラフィッシュの収容に使用されており、複数世代にわたる飼育魚と数百件の実験を代表しています。
ゼブラフィッシュは生物学研究でよく使われるモデル生物です。多くの環境条件に耐性があり、繁殖も容易で、多くの子孫を産みます。これらは人間の健康、炎症、遺伝学、毒性学1,2,3,4,5,6,7など、幅広い生物学的研究の優れたモデルとなっています。また、比較的メンテナンスの必要性が低く、コスト効率の良い選択肢も提供しています。しかし、ゼブラフィッシュの飼育システムは特に経験の浅い人にとっては難しいかもしれません。循環率、水質、そしてゼブラフィッシュの複数の発達段階での飼育の課題など、多くの要素を考慮する必要があります。
商業用ゼブラフィッシュの飼育システムは高額なことが多く、小規模な研究所や資金が限られている研究室にとって大きな障壁となることがあります。これらのシステムは、特に自動給餌器や自動清掃などの追加機能が加わると数万ドルの費用がかかることもありますが、予算を重視する研究室や教室でゼブラフィッシュを活用したい人には不要です。この種の施設では、ゼブラフィッシュの住宅システムを建設する方がはるかに合理的です。他にもカスタム建設計画に関する記事が掲載されていますが、それぞれに欠点があります。キムらは、簡単に構築できる80タンクシステムを作る方法を示しました。出版時点では約500ドルの建設費でしたが、現在でははるかに高額になるでしょう。ペイジらは前述の方法を改良する計画を作成しましたが、建設費用は1500ドルでした。さらに、150匹の魚のコロニーの維持費は3か月ごとに1000ドルと見積もられています。
本記事では、循環するゼブラフィッシュのハウジングおよびろ過システムを構築する方法を確立しました。これは、以前に発表されたハウジングタンク設計10と組み合わせることで、市販システムよりも大幅に安価です。さらに、いくつかの一般的なツールで簡単に作ることができます。30個の個別タンク(~70%容量)を使用した場合、このシステムは比較的静かで、約60 dBAの音を発生させ、通常の会話やテレビの11に相当します。いくつかの簡単な改造やタンク数を減らして運用することで、このシステムは教室の場で直接使用でき、生徒の邪魔にならないようにできると考えています。循環システムの全体的な設計は以下の通りです。加熱・調整された水はサンプベイスンから主水供給ラインを通ってポンプで送られ、ハウジングラックの中央を通って上へと送られます。メイン給水管のボールバルブはバッフルに水を供給し、バッフルは各レベルの各タンクに流量調整可能な方法で水を供給します。主給水管内の圧力の過剰な蓄積を防ぐため、システムは調整可能なボールバルブ付きの圧力放出ラインを利用して余分な水をサンプに戻します。バッフルからタンクに入る水はタンク内で循環し、「オーバーフロー」は各階層のハウジングラック中央を通るやや斜めのトラフによって取り込まれます。水槽からの水は垂直のリターンパイプに流れ込み、サンプ盆地に戻され、多段キャニスターフィルターで洗浄され、UVライトで滅菌されます。
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ここに記載されたプロトコルは、ノーザンミシガン大学およびシェナンドー大学の施設動物ケア・利用委員会によって既に承認されています。
注記:システムの水回収部分のPVCパイプを切断するには、ノコギリが必要です。このプロトコルでは回転工具が使われましたが、タンクリターンパイプ以外のほとんどの切断には他の種類のノコギリで十分です。給水管用の透明なビニール管を切る際には、ユーティリティナイフが使われました。ホースクランプを締めるにはドライバーが必要です。PVCタンクのリターンをPVCリターンホルダーに取り付けるには、3/16インチ(0.47cm)ビット(やや大きめまたは小さいビットも使えます)を使ったドリルが必要です。怪我を避けるためには、電動工具を使う際は注意が必要です。以下のプロトコルは、既に発表されたタンク設計10と組み合わせるハウジングラックの製造について説明しています。代替タンクを使用する場合は、タンクの仕様に合わせて水の供給や水のリターン指示を変更する必要があります。
1. ハウジングラックの組み立て(図1A)
2. タンクリターンシステムの支持ブラケット(図1A)
3. 給水システムの組み立て(図1B-D)
注意:水回収管は個々のタンクから水を受け取り、垂直のリターンパイプに運びます。垂直リターンパイプからサンプへ水を運び、そこでろ過されて最終的にシステムに再循環されます。
4. サンプ盆地の組み立て
注:サンプ盆地は導電率、pH、硝酸塩・亜硝酸塩濃度、温度の変動を水の備蓄として制限します(図1A)。サンプ盆地では複数のろ過段階も行われます。
5. 主水供給ラインの組み立て(図1A、F)
注意:接着剤が不足しているため、メインの供給ラインは迅速に建設・分解して清掃が可能です。漏れを防ぐために、すべてのビニールチューブにはホースクランプを取り付けることができます。これらはシステムを初めて起動し、漏れの有無を評価した後に追加できます。
6. 圧力解放ラインの組み立て(図1A、左パネル)
7. タンク給水ラインの組み立て(図1E)
注意:タンクの給水ラインは、メインの給水ラインから個々のタンクへ水を運びます。
8. システムの運用準備
注:その後の措置は、システム内に飼育される魚の健康と生存を確保するために取らなければなりません。このプロセスは、魚をシステムに加える少なくとも1週間前に行われなければなりません。
9. 定期メンテナンス
10. 一般的なトラブルシューティング
11. 追加の考慮事項
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ここで示すプロトコルは、3層構造の循環型ゼブラフィッシュ飼育システムを作成します(図1)。以前に発表されたモジュール式ゼブラフィッシュ水槽設計10と組み合わせると、30〜36個の個別水槽を容易に収容でき、各大型水槽は成魚10匹/リットル未満の密度で約40匹の魚を収容可能です。全体の飼育システムは、小さな総広さ(~5フィート×7フィート)(~1.52m×2.13m)で、成魚1,200匹以上のゼブラフィッシュを収容できます。複数のろ過段階と調整可能なタンク流量により、幼虫は受精後7日以内にシステムに投入され、独立した幼虫育成システムを必要としません。これを実現するには、幼虫を放流し、餌を与えるべきで、詳細に説明されています。1.システムがシステムの水を再循環させる際に、ユーザーは各タンクへの出入り流量を調整することで有害廃棄物の蓄積を最小限に抑えることができます。既存のタンク設計(大型タンク36基)での容量では、システムにはサンプ盆地の水を...
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ここで説明する循環住宅システムは、合計で1500ドル未満で建設可能です。主要な部品交換が不要であれば年間費用はわずか75ドルと見積もられており、すべての部品は地元およびオンラインの小売店で入手可能です。このプロジェクトの建設を完了するのに特別な工具や技術は不要であり、ほとんどの人が組み立てやすいため、ここで説明した正確な金属スタンドを使用しない場合は材料の長さを変更する必要があります。また、システムの組み立てには有害な化学物質や接着剤は一切使用されず、メンテナンスや製作が簡単になっています。このシステムは1時間で解体、清掃、再構築が可能です。さらに、分解や再組み立てが容易なため、システム全体を別の空間へ移動させたり、実験室のニーズに合わせてタンク棚のレベルを減らしたり多いように改造したりすることも可能です。また、システムの耐久性も非常に堅牢であることがわかりました。このシステムを9年間運用して、メインポンプを1回、キャニスターフィルターを1回交換し、潜水式ヒーターを5台交換しました。
飼育システムは、幼魚ゼブラフィ...
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著者たちは何も明かすことはありません。
著者たちは過去9年間にわたり、住宅制度の維持と改善に尽力してくださった多くの学生の皆様に感謝申し上げます。
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0.17" 内径 クリアビニールチューブ 20 ft | Lowes | 814315 | |
| 1-1/2" PVCパイプキャップ x3 | Lowes | 23899 | |
| 2" PVCパイプキャップ x1 | Lowes | 23900 | |
| 3/4" 内径 クリアビニールチューブ 5 ft | Lowes | 879267 | |
| 3/4" から 1/2" ねじ付きエルボと 1/2" アダプター | Lowes | 23931 | |
| 3/4" x 3/4" x 1/2" Tx4 | Lowes | 3311539 | |
| 3/8" ホースバーブ ナイロン T カプラー x3 | Lowes | 877110 | |
| 3/8" 内径 クリアビニールチューブ 5 ft | Lowes | 879263 | |
| 40 ガロン サンプ盆地 | Tractor Supply | 2229846 | |
| 5/8" 内径 クリアビニールチューブ 10 ft | Lowes | 814320 | |
| AAwipes 8-in-1 水族館テストキット | Amazon | B0D2RG3LXR | |
| Attmu 50個再利用可能な固定ストラップ | Attmu | 8350503624091 | |
| Bacto-sure 高密度フォームフィルター (2パック) | Pets Warehouse | 8729780257055 | |
| Cascade CCF3UL キャニスターフィルター、100ガロン、265sph | Aquatic Warehouse | 30172015946 | Amazonで購入 |
| Charlotte パイプ 10 ft PVCパイプ 1-1/2" 直径 x2 | Lowes | 23830 | |
| Charlotte パイプ 2インチ x 2インチ PVC DWV サニタリー T | Lowes | 23395 | |
| Charlotte パイプ 5 ft PVCパイプ 1-1/4" 直径 | Lowes | 23982 | |
| Charlotte パイプ 5 ft PVCパイプ 2" 直径 | Lowes | 23832 | |
| Charlotte パイプ 5 ft PVCパイプ 3/4" 直径 | Lowes | 23990 | |
| Honeforest TDSメーター | Walmart | B073713G5F | |
| 工業用強度ラック 48 x 24 x 72 | Lowes | 23395 | |
| Ispinner 28個 ウォームギアホースクランプ | Home Depot | 313206783 | |
| JoyTube プラスチックホースバーブレデューサーパイプ継手 5/8" から 3/8" 3個パック | Amazon | B08DNJY57G | |
| LASCO 2インチ x 2インチ x 2インチ 直径エルボ PVC継手 | Lowes | 23910 | |
| ポンプ 水中型 (2100 GPH) | Amazon | B004DFMZME | |
| Qmseller ステンレス水族館バルブ x6 | Amazon | B07PDSVH3N | |
| 水中型水族館ヒーター | Amazon | B0DLG8VSL8 | |
| Tetra whisper 使いやすい水族館用エアポンプ | Amazon | B0009YF4FI | |
| UVライト 滅菌 Coralife ターボツイスト UV滅菌器、6x | Coralife | 96316156005 | Amazonで購入 |
| Uxcell 5/8" ダブルメスバーブバルブ水族館水流制御用ドリップ灌漑バーブレッドバルブ - 3個 x2 | Harfington | 1003460 | Amazonで購入 |
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