このプロトコルは、最大4匹の動物を対象に多チャンバーベッドを用いて、遺伝子組み換えマウスモデルにおける膵腺癌腫瘍を検出するために最大4隻の動物の並行磁気共鳴画像法(MRI)を行います。この多動物型MRIプロトコルは、腫瘍の検出と測定に迅速かつコスト効率が高く、前臨床試験のための動物選択や腫瘍成長の縦断的モニタリングを促進します。
この記事について
サマリー
要約
MRIのような先進的 なin vivo 画像診断は、前臨床マウスモデルで腫瘍を効果的に検出するための重要な研究ツールです。MRIは腫瘍の位置や大きさに関する詳細な解剖学的情報を提供します。しかし、このイメージング方式は高価かつ時間がかかります。画像画質を損なうことなくこのアクセス障壁を克服するため、多動物MRIプロトコルが導入されました。このプロトコルは4チャンバーベッドインサートを用いて、単一の取得セッションで高解像度の多動物解剖MRIスキャンを取得します。複数のマウスを同時に想像することで、この手術の時間とコストを削減できます。このプロトコルは、遺伝子組み換え Kras駆動 の膵管腺癌マウスモデルにおける腫瘍検出および縦断腫瘍モニタリングの効率を高めるために設計された多動物MRIワークフローを記述しています。この確立された臨床的に重要なKPCモデルは、膵臓発がん、腫瘍進行、治療抵抗性の分子メカニズムに関する貴重な洞察を提供しました。このプロトコルは、KPCモデルにおける標準的な化学療法薬ジェムシタビンの治療効果を検証するために概念実証として適用されます。このMRIガイド付き前臨床試験デザインの今後の応用について簡単に論じ、組み合わせ療法の治療効果を評価する。
概要
膵管腺腺癌(PDAC)は依然として最も致死性の高い悪性腫瘍の一つです。近年生存率はわずかに改善されたものの、5年生存率は依然としてわずか13%です。多くの場合、PDACは進行段階で発見され、局所浸潤や遠隔転移を伴うことが多く、治療が複雑になります。この疾患は生物学的に多様で、非常に浸潤性の腫瘍細胞、密な脱模形成間質、血管形成の不振を特徴とします。この複雑な腫瘍微小環境は、病気の進行に影響を与える細胞的および非細胞的要素を完全に特徴づける努力を妨げ続けています。これに対処するために、ヒトの疾患進行や脱形成を密接に模倣した効果的な前臨床モデルが必要です。
さまざまなマウスモデルを用いてがん進行の生物学的研究や新規治療薬の有効性評価が可能です5,6。KRas駆動の遺伝子組み換えマウスモデル(GEMM)は、ヒトPDACの多くの病態生理的および分子的特徴を再現する膵腫瘍を自発的に発生させます。特に、Kras駆動でp53削除されたKPCモデル(LSL-KrasG12D; p53lox/+;Pdx1-Cre)は、よく特徴づけられたPDAC GEMM 7,8,9です。腫瘍画像診断は前臨床研究の重要な要素です。腫瘍の検出と腫瘍の大きさの測定により、前臨床試験のための動物選定、腫瘍の成長と病変の縦断的モニタリング、治療反応の評価が可能になります。
超音波画像(US)、生物発光(BLI)、コンピュータ断層撮影(CT)、蛍光画像(FLI)、陽電子放出断層撮影(PET)、磁気共鳴画像法(MRI)などの高度な生体内イメージング手法は、KPCモデルおよび類似のPDACモデル12,13,14,15,16で腫瘍画像法に使用できます。.しかし、KPCモデルでの腫瘍画像診断は難易度が高く、それぞれ独自の強みと限界があります。生物発光(BLI)や超音波イメージング(米国)などの光学イメージング技術は非侵襲的でコスト効率が良いです。しかし、特に内臓における空間分解能の限界は、腫瘍体積12、15、17、18との相関が悪いことがある。生物発光にはルシフェラーゼ信号を発現する遺伝子組み換え細胞が必要であり、これは基質の供給、血流、組織の酸素供給にも依存します。コンピュータトモグラフは、造影剤なしでは運動アーティファクトが最小限で高速な画像化を提供しますが、軟部組織のコントラストは劣ります。ヨウ素化造影剤はマウスに毒性を引き起こす可能性があります。蛍光イメージングには造影剤や蛍光プローブが必要であり、腹部臓器からの自己蛍光は感度を低下させます。
他の画像診断法に伴う制約のため、磁気共鳴画像法(MRI)は一般的に深部腫瘍の評価において最も信頼性の高い技術とされ、軟部組織の造影や内部解剖学的構造に対する分子感度が優れています(13,14,15,19).しかし、標準的な前臨床MRIプロトコルは高い運用コストと長期間の取得時間を伴い、多くの研究機関にとって障壁となることがあります。多動物MRIは、スキャン前の動物準備時間(麻酔)、スキャン時間、スキャン後の動物回収時間を短縮することで、このアクセス障壁を克服できます。このプロトコルは、PDAC腫瘍画像診断の技術的実現可能性(図1、図2、図3、図4)および画像結果を用いてジェムシタビンを用いた化学療法治療のために動物を募集することを示しています(図5)。PDAC腫瘍は、標準治療(SOC)化学療法薬に対する耐性に寄与する複数の内在機構を示します。例えば、ジェムシタビン、ジェムシタビン/ナブ-パクリタキセル、またはFOLFIRINOX 2,3,4などです。本プロトコルは、新しい治療薬とSOC化学療法を評価する適切かつ堅牢なプラットフォームを提供し、患者に治療反応を高める可能性のある有望な組み合わせを見つけるための20,21,22,23,24,25,26,27を見つけることができます。
プロトコル
記載されたすべての実験は、ミシガン州立大学の動物管理・利用委員会が承認したプロトコルに従って実施されました。生きた動物を対象としたすべての処置は、動物の福祉と人道的な扱いを確保するための定められたガイドラインに準拠しています。このプロトコルは、PDACのKPCマウスモデルの利用と処理について説明します:LSL-k-Ras G12D(Krastm4Tyj);p53lox/lox(Trp53tm1Brn);Pdx1-Cre (Pdx1-cre6Tuv)9.
1. 前像動物製剤
- 使用前にKPCマウスの適切な遺伝子型確認を必ず行ってください。実験用マウスを動物施設から画像診断施設へ輸送します。
- 予温された密閉誘導チャンバーで最大4匹のマウスを麻酔し、1.5〜2%のイソフルランと0.8〜2 L/minの酸素を投与します。麻酔を確かめるには、有害な刺激(足の指をつねる)を適用してください。
- 角膜乾燥を防ぐため、両目に眼科潤滑剤を塗布してください。
2. 多動物MRIベッドのセットアップ
- 3Dプリントされたベッドインサートの下部(左右)に、2匹の麻酔マウスを腹部位置に置きます。このベッドはベンダー提供の標準的な単一ラットPET/MRIスキャンホルダーに取り付けられています。動物の背骨や手足がまっすぐな姿勢を保ちましょう。
注:ベッドインサートの印刷には3Dプリンターを使用しました(補足ファイル1 および 補足ファイル2)。 - ベンダーベッドの空気入力をチューブ(内径1/16インチ、外径1/8インチ)とルアーフィッティング(例:7本×1/16インチオス、2×1/16インチメスコネクタ、2本のメスメスコネクタ、2本のTソケット対ソケットコネクタ)を使ってノーズコーンに接続します。
- 麻酔を維持するためにマウスの頭部を鼻のコーンに固定します(イソフルラン1.5〜2%、酸素0.8〜2 L/min)。底面を3Dプリントのベッドインサートの上部で覆います(図2B)。
- 残りの2匹の麻酔マウスを3Dプリントベッドインサートの上部(左右)の腹側位置に置きます。
- 麻酔を維持するためにマウスの頭部を鼻のコーンに固定します(イソフルラン1.5〜2%、酸素0.8〜2 L/min)。
- 呼吸モニタリングパッドを左上のマウスにテープで固定します。呼吸を測定するために、心拍の信号が出ない呼吸を測定するために、モニターパッドを胸の高さではなく腹部の高さに設置してください。
- イソフルランのレベルを、スキャン中は呼吸率30〜40bpm、通常1.5〜2%に保つように設定してください。呼吸痕跡が見えなかったり振幅が低すぎる場合は、パッドがテープでしっかり固定されているか、チューブ内のすべての接続がしっかりしていることを確認してください。
- ベッドを覆い、多動物MRIチャンバーを完成させます(図2B)。
注:ベンダー提供の単一ラットPET/MRIベッドには、動物の体温(~35〜37°C)を維持するための循環温かい空気が備わっています。3Dプリントインサートで最大4匹のマウスを同時にスキャンできます。温水温度や空気の取り込み量や排気量の正確な設定は、各施設のセットアップ、例えば制御室からMRIまでの距離によって異なります。これらは各施設で、温度を監視し、各研究ごとに標準化する一連のパイロットスキャンを用いて設定できます。
3. プレスキャンセットアップとイメージングキャリブレーション
- マウスがMRIコイルの縦方向に位置していることを確認し、赤いレーザーをマルチチャンバーベッドの中心に合わせてから、ベッドホルダーをボア内に送り込みます。
- マウスIDとスキャン日付を使って、以下のフォーマットでスキャンにラベルを割り当てます:ストレイン、マウスID、スキャン日。
- T1加重FLASHスキャンを1軸方向スライス、2基冠スライス、2基状スライスを組み合わせて4チャンバーベッド内のマウスを可視化し、以下の設定で撮影領域を定義します: TR/TE 50/2.4 ms、平均2回、反転角20°、分解能0.313 mm、スライス厚さ1 mm、スキャン時間13秒。
- マウスの体全体が視界内にあり、マウスがまっすぐであることを確認しましょう。もしそうでなければ、マウスの位置調整を繰り返したり、マウスベッドをボアの中に入れたり外したりしてください。
注:これらのパラメータは使用されたMRIシステムの仕様に基づいています。これらのパラメータは、実験要件やMRIシステムの機能に応じて画像取得を最適化するために必要に応じて調整可能です。
4. 多動物磁気共鳴画像法
- T2加重高速スピンエコーシーケンスを以下のパラメータで設定します: 繰り返し時間(TR):3,200 ms、エコー時間:46 ms、平均数:10、面内分解能:300 x 300 μm、コロナスライス数:14、イントラスライスギャップ:0.3 - 0.7 mm、脂肪抑制:有効、希少因子:8、スライスパッケージ:2、総画像取得時間:14分。
- ローカライザー画像の黄色と緑のボックスの中央(並進)とエッジ(回転)をクリックして、上部と下部の動物群の膵臓領域や他の腹部臓器のカバーを最適化するためにスライスパッケージの位置を調整してください。
- スキャンを進める前に、4匹のマウスが複数動物のベッドセットアップで正しく整列していることを確認してください。
- 画像診断の過程で呼吸を監視し、必要に応じてイソフルラン濃度を調整してください。
- MRIスキャンが終わったら、画像の品質が十分かどうかを確認しましょう。スキャン中にマウスが動いた場合、ぼやけた現象として見えるモーションアーティファクトを探してください。腹部が完全にカバーされているか確認してください。必要に応じてマウスの位置を変えてスキャンをやり直してください。
5. ネズミの回復
- スキャンが完了し確認されたら、MRIシステムからベッドを取り外します。
- マルチチャンバーベッドの上部を開けてください。左上のマウスから呼吸モニターを取り外し、3Dプリントインサートの上下の動物をリカバリーケージに移します。
- 動物を37°Cの温熱パッドの上に置いたリカバリーケージに入れて、麻酔後の回復を行います。
- マウスをケージに戻す前に、麻酔からの完全な回復を確保するために呼吸数と動きを監視してください。回復の兆候としては、正常な呼吸や歩行などの動きが挙げられます。
6. 磁気共鳴画像のファイル処理と解析
- MRIソフトウェアからDICOM画像を画像解析プログラムにエクスポートし、4匹のマウスが使った画像から1枚のマウスごとに1枚の画像をトリミングします。
- ソフトウェアで「 ビュー 」モジュールの上位の動物画像を開きます。自動ウィンドウやレベル設定で十分ですが、必要に応じて 一般的な画像表示コントロール タブでマウスが見えるように調整してください。 VOI タブでは、キューブ解析オブジェクトを使って右上マウスの周りに大きなボックスを手動で描きます。マス キングと輪郭操作 タブからそのボックスの周囲の画像をトリミングします。新しいファイルを保存する際は、DICOMメタデータとファイル名を正しいマウスIDに編集してください。次に、同じ画像を使って左上のマウスで同じことを繰り返し、下のマウスセットの画像を開き、ROIのトリミングと保存を繰り返します。
注:VOIは必ずしも正確である必要はありません。 - DICOMファイルに保存された画像を解析するためにMRIビューアソフトウェアを使いましょう。
- 背側から腹側、または腹側から背側への画像診断を解析します。脾臓と胃の位置を特定し、膵臓や膵臓腫瘍の特定に適した文脈を確立します。
- 腫瘍境界に線を引いて「関心領域(ROI)」を定義し、半自動セグメンテーションで腫瘍体積を計算します。液体嚢胞やその他の過染色性所見に注目してください(図3 および 図4)。
注意:DICOMファイルの解析にはMRIビューアーを使用するべきです。
7. ジェムシタビン治療
- 腫瘍が形成され検出されるまで、KPC動物のMRIスキャンを週に一度実施してください(体積≥20 mm3)。スキャン前に、マウスが健康状態(過度の体重減少や苦痛、呼吸困難、息切れの兆候がない)を確認しましょう。
- 腫瘍の基準を満たしたら治療計画を立ててください。
注:治療群では、ジェムシタビンを腹腔内注射(ip.)で週2回100 mg/kg投与しました。
注意:ジェムシタビンは細胞毒性化学療法薬です。手袋や白衣などの適切な個人用防護具(PPE)を着用して取り扱ってください。汚染された注射器や物質は、機関の有害廃棄物プロトコルに従って処分してください。 - ジェムシタビンに対する腫瘍反応を観察するために、週に一度MRIスキャン(セクション1から6の後に)を実施してください。
- 腫瘍がMRI解析( セクション6) の体積測定や他の症状に基づく安楽死基準を満たした場合、動物を犠牲にします。
- MRIスキャンで治療済みマウスを検査する際は、化学療法薬が排泄物を通じて移動するのを防ぐ保護バリアを設置してください。ジェムシタビンの使用中および使用後は、良好な個人衛生習慣を守ってください。使用済みの空の注射器は化学療法用のシャープス容器に捨ててください。
- 作業完了後は、すべての麻酔機器、MRIベッド、作業面に70%エタノールを散布してください。化学的に汚染された保護バリアや画像診断で使用した手袋をビニール袋に入れ、袋を結んで繊維の樽に入れて焼却します。
- 化学療法剤への曝露を最小限に抑えるため、次の治療前に画像検査を予約しましょう。
注:腫瘍の成長速度や治療計画によっては、MRI検査の頻度を隔週に検討する場合があります。腫瘍動態学による治療反応は縦方向画像診断で評価できます(図5)。
結果
KPC動物は生後12週を過ぎて膵臓腫瘍を発症します。多チャンバーMRIベッドを用いて、生後10週からKPCマウスの腫瘍スクリーニングを開始しました。これにより、ジェムシタビン治療による前臨床試験のために、約200 mm3の腫瘍を持つ動物を募集することが可能となりました。腫瘍動態や腫瘍表現の差異が観察されました。ほとんどのKPC腫瘍は単一または優勢な焦点を持つ堅実な成長パターンを示し(図4A)、これにより治療のための動物募集や腫瘍体積評価が容易になりました。しかし、膵臓全体に複数の小さな固形腫瘍が広がっている動物も観察されました(図4A)。一部のPDAC症例では、腫瘍内液体充填の嚢胞性病変、腫瘍周囲の非腫瘍性嚢胞病変、胆嚢および/または膵臓の管閉塞による液体貯留を伴うこともあります。(図4A)
募集後、動物は無作為に2つの実験群に割り当てられました。1つは治療を受けていない対照群、もう1つは週2回、100 mg/kgの腹膜内(ip.)投与を受けた治療群です。合計23頭の適格動物のうち、対照群には雌4頭と雄7頭、治療群には雌6頭と雄6頭が割り当てられました。週1回のMRIスキャンは多動物ベッドシステムを用いて実施され(図5A)、これにより対照群と治療群の両方で腫瘍成長動態の変化を継続的にモニタリングできました(図5B)。
処理された画像データによると、ジェムシタビン治療済みKPCモデルの腫瘍は未治療対照群に比べて成長パターンが遅いことが示されており(図5C)、未治療群は治療コホートの全生存率に統計的に有意な増加(Logランク検定、p = 0.04)増加と関連しています(図5D).未治療のKPCの中央値生存期間は20週でしたが、治療群は中央値生存期間が23週間以上延長されました(図5D)。
図1:多動物磁気共鳴画像法のワークフロー、画像処理および解析。 多動物MRIプロトコルの主要なステップは、前スキャン準備から画像誘導前臨床試験まで強調されています。最大4頭の動物が誘導チャンバーで麻酔(プレスキャン準備)され、多動物ベッド(多動物MRIベッドセットアップ)への配置準備が行われます。動物の2×2構成(上区画に2人、下部区画に2人)でのプレスキャン画像に続き、磁気共鳴スキャン(MRイメージング)が行われます。各動物の画像データは個別のファイルとして保存され、独立して分析されます(画像解析)。画像検出や腫瘍の大きさは、前臨床試験の動物選定や治療反応のモニタリング(前臨床試験)に使用されます。 この図の拡大版はこちらをクリックしてご覧ください。
図2:多動物MRIのセットアップからスキャンまでの主要ステップ。(A) カスタム多動物MRIベッドシステムの上部パネル 。専用の3Dプリントベッドインサートは、統合された麻酔ポートを備えています。標準的な単一ラットPET/MRIベッドホルダーに収まります。下部パネルでは、これらの3Dプリントインサートがベッドを2つのチャンバーに分割し、最大4匹の動物を同時に撮影できます。動物1と2は上部インサートの上に、動物3と4は下部インサートの上に配置されています。STLビューアの3Dプリンターインサートの横面および前面修正面が示されています。 (B) マウスを多室MRIベッドに順次配置(上から下へ)。上の画像は、3Dプリントインサートの下部(左と右)に腹部に置かれた2匹の動物で、これはベンダー提供のPET/MRIベッドの内側にあります。中央の画像では、残りの2匹のマウスが3Dプリントインサートの上部(左右)の腹側位置に配置されています。上部インサートの左側に位置するマウスには呼吸モニターが取り付けられています。下の画像:カバーを上に置いた4匹の動物の完成した組み立て。すべての動物は鼻のコーンに頭部を固定し、麻酔を維持します(イソフルラン1.5〜2%、酸素0.8〜2 L/min)。4匹すべての動物をMRIベッドホルダーに最終配置し、麻酔投与、温水器、バイタルモニタリングシステムを備え、MRIスキャンと全動物のデータ取得を一度のセッションで行います。 この図の拡大版はこちらをクリックしてご覧ください。
図3:多動物MRIスキャンによるデータ収集と処理。(A) 4匹すべての初期MRIスキャンの代表的な図(内側平面)。 (B) マルチチャンバーベッド内の4匹のマウスのMRIスキャン(背側面):3Dプリントインサートの下部(3, 4)に2匹、上部(1, 2)に2匹のマウスを配置します。 (C) 各マウススキャンの最終高解像度MRIファイル。 この図の拡大版はこちらをクリックしてください。
図4:PDAC腫瘍の多様な症状:統合MRIおよび組織学解析。(A) PDAC腫瘍の解剖学的変異を示す代表的なMRI画像(背側面):正常膵臓、液体充填嚢胞病変を伴う多発性腫瘍、固形腫瘍塊。解剖学的臓器は色分けされています:胃(黄色)、脾臓(緑色)、腫瘍(紫)、管閉塞による液体の蓄積(青色)。白いスケールバー=1cm。 (B) H&E染色腫瘍の組織学的切片と、コンピュータ支援による訓練済み分類器オーバーレイに基づく細胞クラスを標示し、MRI所見と一致する腫瘍の組織病理学的特徴を強調。腫瘍が存在する場合、すべてのサンプルで腫瘍(T)領域は黒で囲まれています。細胞クラスは色で示されており、正常膵臓組織(灰色)、腫瘍(赤)、免疫細胞(黄色)です。黒のスケールバー=0.5cm。 この図の拡大版はこちらをクリックしてください。
図5:ゲムシタビン治療中の動物募集および腫瘍成長モニタリングのための多動物MRIアプリケーション。(A) 実験デザインのタイムライン:14+週齢の動物をMRIスキャンで腫瘍200 mm3≥検出後に募集しました。治療群のマウスは、安楽死基準に達するまでジェムシタビン(100 mg/kg、IP、b.i.w.)を投与されました。実験全体を通じて、腫瘍の成長速度学を監視するために全動物のMRIスキャンが実施されました。(B) 未治療群から治療群の動物1匹の腫瘍進行を示す代表的なMRI画像(背側面)。実験0日目から最終日までの腫瘍進行を示す(生存評価項目)。白スケールバー=1cm(C,D)。未治療・治療群の対照群における腫瘍成長動態(C, n = 4 [2 F, 2 M])および総生存率(D, n = 11 [4 F, 7 M] vs. 12 [6 F, 6 M])を示すグラフ。カプラン・マイヤー生存曲線の統計的有意性は、Log-rank(Mantel-Cox)検定(* p < 0.05)によって決定されました。この図の拡大版はこちらをクリックしてご覧ください。
補足ファイル1:標準的な単一ラットPET/MRIベッドホルダーに収まる、麻酔ポート内蔵の下部インサートの3Dプリント用STLファイル。このファイルをダウンロードするにはこちらをクリックしてください。
補足ファイル2:標準的な単一ラットPET/MRIベッドホルダーに収まる、上部挿入部分の3Dプリント用STLファイル。このファイルをダウンロードするにはこちらをクリックしてください。
ディスカッション
このプロトコルは、ベンダー提供の標準的な単一ラットPET/MRIベッドを利用し、カスタムメイドの3Dプリントインサートを改造し、最大4匹のマウスを同時にスキャンすることを可能にします (図1)。この多動物構成により、高価なMRIスキャン時間だけでなく、全体の手術時間も大幅に短縮されます。これにより、4匹の動物を1回のセッションで並行して準備(麻酔、ベッドでの位置調整、ベッドへの搬入)、スキャン、回収が可能で、4回のセッションに分けて準備、スキャン、回収にかかる時間がかかります。また、各動物に制御された麻酔投与のための個別の鼻錐、1匹の専用バイタルモニタリング、そしてすべてのスキャンマウスの体温維持を統合した加熱機能も含まれます (図2)。3Dプリントインサートは動物の一貫したアライメントを提供し、セグメントの一貫性を向上させます。リアルタイム呼吸モニタリングにより、スキャン中の麻酔の継続的な評価と調整が可能となり、動作アーティファクトを最小限に抑えます。
このプロトコルは、化学療法薬ジェムシタビンを投与したKPCモデル(図5A-C)における膵腫瘍の進行を検出し、縦断的にモニタリングするために用いられ、概念実証の前臨床試験として機能しました。ジェムシタビンは単独または併用で、局所または転移性膵臓がん患者に対する第一選択または第二選択の治療薬です 28,29,30。ジェムシタビン処理動物でのこれらの結果は、生存効果を示した以前の報告と一致しています。31。さらに重要なのは、このプロトコルがKPCモデルや類似のPDACモデルにおける新治療薬とSOC化学療法の併用療法を研究するための適切かつ堅牢なプラットフォームを提供することです。これらの併用治療法は、小分子阻害剤、免疫療法、siRNA、マイクロRNA活性調節因子、その他の治療用オリゴヌクレオチドで、主要な分子標的20,21,23,24,25,26,27に対して行われます.これらの併用療法には、遺伝子組み換え標的が含まれ、SOC化学療法や他の治療法との相互作用を早期段階で理解することがあります(9,20,32)。
このプロトコルの焦点は膵臓や他の腹腔臓器の画像診断ですが、この多動物プロトコルと記載されたMRIシーケンスは、乳がんや膠芽腫、腎臓および肝臓に関わる他の疾患のマウスモデルの解剖学的特徴づけにも応用可能です。多動物MRIスキャンを記述する他のプロトコルも認識しています18,34。例えば、Dazaiらは最大7匹のマウスの神経解剖学的MRIスキャンを記述しました。この仕組みは7匹の動物の脳画像撮影を可能にしますが、各マウスの麻酔や温度の個別制御は可能ではありません。彼らのハウジングチャンバーは、約32g未満のマウス用に設計されています。対照的に、マルチチャンバーベッドはより幅広いマウスサイズに対応しています。目的のある器官、スキャン時間、解像度によっては、Dazaiらのプロトコルはここで述べたプロトコルよりもいくつかの利点がある場合があります。
開示事項
著者には開示すべき利益相反はありません。
謝辞
この研究は、国立がん研究所のR01 CA258314助成金およびMSUの学際研究のためのテトラッド・イニシアティブ助成金2024年版のLFSへの部分支援を受けています。MSU精密ヘルスプログラム組織解析コア、MSU定量健康科学・工学/精密ヘルスプログラム先進分子イメージング施設、MSUキャンパス動物資源、MSU獣医診断研究所、MSU定量バイオエレメント分析・マッピング(QBEAM)センターの技術支援に感謝いたします。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 3Dプリンター | ストラタシス | J750 | 多動物MRIベッドインサート用 |
| ジェムシタビンHCl | ApexBio | A1402-500 | ip injections |
| ホロス | ホロス | https://horosproject.org/ | MRI解析のために |
| イソフルラン | コヴェトルス | 11695067772 | マウス麻酔用 |
| イソフルラン・ヴェポライザー | SOMNIサイエンティフィック | VS6002 | マウス麻酔用 |
| ロードーズU-100インスリン注射器 | BD | 14-826-79 | ip injections |
| ルアーロックチューブカップリング、ナイロンストレートプラグ、1/16インチチューブ内径x7用のバーブド | マクマスター | 51525K521 | 多動物MRIベッド組立用 |
| ルアーロックチューブカップリング、プラグ、1/16インチバードチューブ内径×2 | マクマスター | 7466N11 | 多動物MRIベッド組立用 |
| オス対オスルアーコネクター X2 | サイ | MML | 多動物MRIベッド組立用 |
| MR互換小動物モニタリングおよびゲートシステム | SAII | モデル1030 | MRI中の動物モニタリング |
| MRIベッドアダプター | ブルーカー | T150743 | ベンダー提供のMRIベッドコンポーネント |
| MRIコイル、内径72mmです | ブルーカー | T20209V3 | ベンダー提供のMRIコイル |
| マルチモーダリティクレードルミディアムラット | ブルーカー | T151629 | ベンダー提供のMRIベッド |
| 眼科潤滑剤 | コヴェトルス | 75848 | 麻酔時の使用 |
| ParaVision 360ソフトウェア | ブルーカー | https://www.bruker.com/en/products-and-solutions/preclinical-imaging/paravision-360.html | MRI解析のために |
| PMOD 4.2 | ブルーカー | https://www.bruker.com/en/products-and-solutions/preclinical-imaging/pmod.html | MRI解析のために |
| 前臨床MRIシステム | ブルーカー | バイオスペック 70/30 | MRIのために |
| ストラタシス Vero クリア樹脂 | ストラタシス | RGD810 | 多動物用MRIベッド製作用 |
| ティーソケットからソケットへのコネクター、ルアーロックチューブ×2 | マクマスター | 51525K443 | 多動物MRIのベッド |
| チューブ(内径1/16インチ、外径1/8インチ) | ブルーカー | T12330 | 多動物MRIベッド組立用 |
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