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方法論記事

形状の形態計測解析:ゼブラフィッシュにおける頭蓋顔面形状定量化のための解析ソフトウェアツールボックス

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DOI:

10.3791/70345

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2026年2月27日

 ,  ,  , 
1Department of Biochemistry and Molecular Genetics, Alcohol Research Center, University of Louisville, 2Department of Pediatrics, Section of Developmental Biology, University of Colorado School of Medicine, Anschutz Medical Campus

この記事について

サマリー

本研究は、ゼブラフィッシュ幼生の顔面構造変化を測定するために、無料ソフトウェア(tpsDigs2、MorphoJ、PAST)を用いて頭蓋顔面軟骨の形状を定量化するプロトコルを説明しています。

要約

胎児アルコールスペクトラム障害(FASD)は、出生前のエタノール曝露によって引き起こされるさまざまな身体的、認知的、行動的障害を特徴とし、顔の骨格に影響を与えるものも含まれます。エタノール感受性遺伝子座はFASDの高い変異性に寄与しており、顔の形状解析を複雑にしています。私たちは以前に、ゼブラフィッシュの遺伝子-エタノール相互作用からこれらの顔の形状変化を解析できることを示しました。ゼブラフィッシュは、いくつかの理由からこの変異を分析するのに理想的なモデルです。(i) 遺伝子の70%はヒトとゼブラフィッシュ間の直系同胞である;(ii) 外部受精により、研究者はエタノール処理のタイミングと投与量を制御することが可能です。(iii) 顔の骨格構造は脊椎動物によって保存されている;(iv) 半透明の幼虫は、発生過程における頭蓋顔面骨格構造の変化を直接観察することを可能にします。しかし、頭蓋顔面骨格の形状を分析することは、単純な線形測定では全体的な形状変化を捉えきれないため、完全に評価するのは難しい場合があります。さらに、頭部のサイズの変化はデータの解釈を複雑にすることがあります。これに対処するため、私たちは形態計測法を採用し、フリーウェアソフトウェア、tpsDigs2、MorphoJ、PASTを用いた主成分解析を通じて顔の形状全体を解析しました。このソフトウェアの組み合わせにより、顔の全体的な形態をペアワイズで比較することが可能です。ここでは、これらのプログラムを用いてエタノール処理されたゼブラフィッシュ変異株の顔形の分析とアプローチを概説し、一連の補完的な多変量統計解析を実施します。

概要

胎児アルコールスペクトラム障害(FASD)は、行動的、神経学的、身体的障害を含む幅広い発達障害を特徴とします1,2。これらの身体的欠損には、顎の形成不全3,4,5,6などの頭蓋顔面欠損が含まれます。エタノール曝露のタイミングと用量がFASDの複雑な病因に寄与しますが、遺伝的寄与がFASDの病因に重要な役割を果たします。FASDの病因6,7,8,9,10,11,12。これらの要因の組み合わせにより、人間の集団における顔の欠陥の研究は困難です。出生前のエタノール曝露が発達に与える影響を調査するために、ゼブラフィッシュモデルを用います。ゼブラフィッシュはFASDの強力なモデルとして機能しており、ヒトと70%の遺伝子オルソログを共有し、既知の病原遺伝子の82%を共有しています。遺伝的保存に加え、ゼブラフィッシュは以下の通りです:(i) 高い繁殖率を持ち、同時に複数のゼブラフィッシュ幼虫を生産可能、(ii) 外部受精を受けてエタノール感受性の発生過程を直接研究可能、(iii) 高度に保存された典型的な脊椎動物の頭蓋顔面発生、(iv) 骨格構造の可視化を可能にする半透明の胚・幼生であること.私たちは以前に、多くの異なるゼブラフィッシュ遺伝子の変異が胚をエタノール誘発性の顔面異常に感作させることを示しており、これらの異常は微妙で目で識別しにくいことがあります10,18。さらに、エタノール処理済み野生型幼虫は未処理の野生型幼虫と比べて頭蓋顔面領域にわずかな変化があることも観察しましたが、これらの変化も目で識別するのは困難です。これらの変化は目視では検出されませんが、内臓頭蓋10の2D画像を用いた形態計測解析を用いて、エタノールによる顔の形状変化を示すことができました。

この面は複雑な3D構造であり、従来の線形測定では測定が困難です。これらの単一の線形測度は、測定された各構造と他の測定構造への相対的な位置や、それらが顔の他の測定構造に与える影響を考慮していません。形態計測解析は、測定されたすべての構造の相対位置を考慮し、全体の大きさ差まで制御するランドマークを用いた形状配置を用いてこれらの欠点を補う。このアプローチにより、より正確で解像度が高く、可視化が容易なデータが得られ、従来の線形測定では観測できない結果が得られる場合があります。さらに、形態計量的アプローチは多変量統計手法を用いてグループ間およびグループ内の直接比較を行うことができます。ここでは、フリーウェアの形態計測ソフトウェアtpsUtil、tpsDigs221、MorphoJ20、古生物学統計(PAST)22と、未処理かつエタノール処理された野生型および幼生ヘテロ接合体の内臓頭蓋骨の2D画像を組み合わせて、骨形態形成タンパク質(Bmp)遺伝子bmp7aの利用について説明します.これらのプログラムは主に古生物学や生態学に焦点を当てた分野で利用されてきましたが、組み合わせて使うことで顔の形状を徹底的に分析することができます。最終的に、このプロトコルでは、ゼブラフィッシュモデルにおける頭蓋顔面軟骨の形状変化を定量化するために、これらの無料で利用可能なソフトウェアアプリケーションをどのように活用するかを示します。

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プロトコル

この手技に用いられたすべてのゼブラフィッシュ幼虫は、ルイビル大学が承認したIACUCの確立プロトコルに従って飼育・繁殖されました。

注:本研究ではゼブラフィッシュ系 bmp7aty68a24 および野生型兄弟(いずれもAB系)を用い、成魚は28.5°Cに維持し、14/10時間の明暗サイクルで維持しました。望ましい実験結果に応じた適切な線を使いましょう。逆浸透圧で滅菌された水を使いましょう。生物学的変数としての性別は研究対象の発生段階には当てはまらず、ゼブラフィッシュでは受精(dpf)25後、すべての解析の結果、性別が初めて検出されます。

1. エタノール処理

  1. ヘテロ接合体交配から卵を採取し、胚を形態学的に段階的に段階付けします。
  2. 胚を100個ずつのサンプルグループに分け、28.5°Cで望む発生時点に育てます。胚培地(EM)10,18。
  3. 受精(hpf)から6時間後に、EMを新鮮なEMまたは1%エタノール(v/v)を含むEMに切り替えます。24 hpfで、エタノールを含むEMを3回新たに交換して洗い流します。

2. 顔の染色と画像診断

  1. ゼブラフィッシュの幼虫を5dpfで固定し、Alcian Blueで染色し、前述の軟骨(図1)を表示します。
  2. 前述の幼虫をマウントした内臓頭蓋の腹側図明視野画像を撮影します。
  3. 簡単に、魚を腹部を上に、アルシアンブルー染色の50%グリセロール溶液にマウントします。
    注:複合顕微鏡の設定は異なる場合があります。希望する画像構造に適した設定を使いましょう。本研究では、解析されたすべての画像を生成するためにオリンパスBX53複合顕微鏡が使用されました。画像は10倍倍で撮影されました。

3. 遺伝子型分け

  1. 前述のアルシアンブルー軟骨染色後に5匹のdpf幼虫の尾を除去します。
  2. 幼虫の頭と尾を分けてください。ヘッドは後で撮るために50%グリセロールの貯蔵庫に保管してください。
  3. 溶解液は5μLのプロテイナーゼK(10 mg/mL)を用いてgDNAを抽出します。
  4. 各サンプルに対して、目的の遺伝子を標的としたプライマーを用いてGPPを含む領域を増幅し、gDNAに対してPCRを行います。
  5. 制限性エンドヌクレアーゼベースのDNA消化を用いてPCR産物を消化し、SNPに基づいて変異体と野生型対立遺伝子を区別し、SNPを特定します。サンプルを遺伝子型ごとに分けてグループに分け、画像を画像で分析します。
    注:本研究では、SNPを bmp7a で増幅し、BslI(NEB)を用いて遺伝子型を解析しました。

4. 形状解析に用いられるソフトウェア

  1. アルシアン染色幼虫の形態計測解析にはtpsUtilおよびtpsDig221、MorphoJ20 (https://sbmorphometrics.org)を使用し、すべての統計解析にはMorphoJおよび古生物学統計ソフトウェアパッケージ(PAST)22 (https://www.nhm.uio.no/english/research/resources/past/)を用いてください。
    注:tpsUtilソフトウェアは「Utility programs」リンク、tpsDig2ソフトウェアは「データ取得」リンク、MorphoJは https://sbmorphometrics.org の「Comprehensive programs」リンクで見つけることができます。各ソフトウェアのトラブルシューティングは、オンライン上でも、複数のプラットフォームでも、ソフトウェア内で簡単に見つけることができます。主成分解析(PCA)、標準変量解析(CVA)、プロクルステスANOVA、顔の変動のワイヤーフレームグラフはMorphoJを用いて生成され、PASTを用いて多変量の正規性検定および多変量分散解析(MANOVA)を実施しました。

5. 分析対象のすべてのサンプルに対して顔骨格を一貫して画像化すること

  1. 顔の骨格画像は同じ顕微鏡設定で撮影し、.tifファイルとして保存してください。
    注意:顕微鏡の設定は、顕微鏡のセットアップや機能、そして画像化するサンプルや組織によって異なります。鍵は一貫した顕微鏡のセットアップとサンプル準備です。
  2. 実験全体を明確に識別できるフォルダにファイルを保存してください。

6. tpsソフトウェアによる画像準備

  1. メモ帳を開き、「 名前を付けて保存」を選択してください。ここから、下部のすべての ファイル をクリックしてください。ファイルを「experiment-name.tps」として保存し、解析するすべての画像が入ったフォルダに保存してください。

7. tpsソフトウェアへの画像入力

  1. tpsUtilソフトウェアを開いてください。次に 、Operation を下に引き、 画像タブからBuild tpsファイル を選択します。
  2. このタブから 入力 をクリックし、画像を含むファイルを開きます。ファイルの最初の画像をクリックして「 開く」を選択してください。
  3. 出力タブを選択し、その後tpsのメモ帳ファイルを選んで保存します。ファイルを置き換えるよう促されたら、「はい」を選びます。
  4. 次に、「 セットアップ」 タブをクリックして 作成してください。画像が追加されているかどうかファイルに行ってください。

8. 画像にランドマークを追加する

  1. tpsDigs2を開き、次のタブを順番に開いてください: 入力ソース、ファイル、そして保存した tpsメモ帳ファイル。
  2. 次に、画像ツールのオプションをクリックして可視化します。 ここでは、基準長を100μmに設定してください。スケールセットを押してください。
    注意:画像上のスケールに対してスケールしないでください。
  3. スケールを設定する際は OK を押してパラメータを設定し、画像ツールを終了します。
  4. この時点で、エイムシンボルをクリックして、適切な形態解析のために各画像にランドマークを追加します。
  5. 各画像でランドマークを同じ順序で配置してください。ランドマークは軟骨要素間の以下の継ぎ目に配置されました( 図1E、E'参照)。
    1. メッケル軟骨間の正中関節(ランドマーク#1、 図1E、E')。
    2. メッケル軟骨と口蓋四分軟骨の間の両側関節(ランドマーク#2、 図1E、E')。
    3. セラトヒアル軟骨間の正中関節(ランドマーク#3、 図1E、E')。
    4. 口蓋四分体とセラトヒアル軟骨の間の両側関節(ランドマーク#4、 図1E、E')。
    5. 下顎軟骨の遠位端(ランドマーク#5、 図1E、E')。
  6. 画像にランドマークを配置した後、ドロップダウンメニューの ファイル をクリックしてください。この経路に従って データを保存 し、その後 上書きします。
  7. tpsDigs2を終了します。

9. MorphoJを用いたProcrustes ANOVAによる形状解析

  1. MorphoJソフトウェアを開きます。
  2. 予備情報欄でデータセットを作成し、名前を付けます。「 新しいデータセットを作成 」を選択し、データセットに名前を付けます。次に、tpsをクリックして、ステップ8.4で追加された新しいデータポイントが記載されたメモ帳を選択します。データセットを作成します。
  3. 画像はProcrustesフィットで統計的に閲覧できる状態です。タブリーディング プロジェクトツリー を選択し、データセットをクリックしてください。この経路で以下のボタンを選択してください: 予備、新しいプロクルステスフィット、主軸による整列、そして プロクルステスフィットを実行。
  4. 選択 予備行 列で共分散行列を生成する ;ソフトウェアはプロクルステスの座標と表示します。指示があれば関数を実行します。
  5. 予備項目でワイヤー フレームを作成または編集 を選択し、画像上のポイントをリンクしてください。次に リンクポイント を選択し、 画像を受け入れ るか 作成 します。分類器を編集してください。
  6. MorphoJを開いたままスプレッドシートを開く。必要な情報をすべて追加してください。例えば:遺伝子型、処理、遺伝子型、処理、実験など。スプレッドシートをCSVファイルとして保存してください。
  7. MorphoJで「 ファイル 」をクリックし、 分類変数をインポート してCSVファイルを選択します。ファイルを開いた後、プロジェクトツリーに戻り、データセットをクリックします。
  8. データセットを開いたら、 予備 情報をクリックして 分類器を編集してください。これにより、すべての画像が確実に追加されます。
  9. 次に、 プロジェクトツリー、Covmatrix、そして上部の Variation をクリックします。
  10. PCスコアを見るには 「主成分分析 」を選択してください。 PCスコア をクリックすると生成されたグラフが表示されます。
  11. グラフに色を追加するには、右クリックして 信頼度省略 を押して、目的の分類器を追加します。 色のデータポイント を押して色を追加し、 OK を押してこれらの変更を受け入れます。
    注意:PCスコアタブを閉じてステップ9.10の指示に従って再開したら、色は更新されるはずです。
  12. ワイヤーフレームの色を変更するには、 Preliminariesへ行ってください。画面下部にある形状グラフの 「オプションセット 」をクリックしてください。ワイ ヤフレームグラフ を選択して、ターゲット形状、開始形状、数値の色を変更します。
  13. 変 異を選択し、次に プロクルステスANOVAを選択してください。
  14. プロクルステスのANOVA結果をステップ9.7のスプレッドシートファイルにエクスポートします。

10. データセットの標準的変量解析

  1. MorphoJで元のデータセットまたはプロジェクトを選択します。正準変量解析(CVA)を開始するには、「 比較 」を選択し、その後「 正準変量解析」を選択してください。分類変数を選択し、 Genotype & Treatment を選択し、関数を実行します。
  2. CVAをエクスポートするには、 結果 タブをクリックし、現在開いている結果ページを右クリックしてください。 「ファイルにエクスポート」 を選択し、情報を保存してください。
  3. プロジェクト ツリー をクリックして CVAを選択し、その後 スコアを選択します。ページ左上で「 ファイル」を選択します。 ファイル タブが開いたら、「 データセットエクスポート 」を選択し、データタイプと 「Genotype & Treatment」を選択します。CVAスコアは.txtファイルとして保存してください。
  4. PASTソフトウェア用にファイルを準備するには、保存したCVAスコアをNotepadまたは同等のソフトウェアで開いてください。PASTソフトウェアと混同しないように、左上の ID を Label に変更してください。編集したCVAスコアまたは同等のものを保存してください。

11. 過去のソフトウェアにおけるマノバ

  1. PASTでCVAスコアをインポートするには、 ファイルを選択し、Notepadや同等のものから保存したCVAスコアにアクセスするために 開 いてください。 テキストファイルのインポート ウィンドウが開いたら、 名前を選択し、行と列は データ 、区切りは タブ を選択します。 インポートを選択します。
  2. 「表示」タブで「列属性」を選択してください。Typeボタンの横でドロップダウンメニューを開き、分類変数が入っているはずの最初の列「Group」を選択します。
  3. PCデータやCVデータを強調してください。正規性検定を実行するには 「多変量検定」「多 変量正則 性」を選択します。このテストはPCとCVで別々に実施してください。
  4. 左上、 型の上のグレーの空セルをクリックすると、データセット全体を選択します。多 変量、検定、 MANOVA を選択してMANOVAを処理します。MANOVAの結果をステップ9.7のスプレッドシートファイルにエクスポートします。
    注意: 要約 結果と ペアワイズ の結果の両方はソフトウェアによって提供されます。エクスポートするか保存するか両方。

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結果

ゼブラフィッシュのエタノール誘発的な顔形変化を特定するために、私たちは無料で利用可能なソフトウェアアプリケーションを組み合わせて顔骨格の形態学的データを生成・定量化しました。bmp7aヘテロ接合体成体保因魚の胚を生成し、6〜24 hpfのエタノール処理を行いました。これらの交配から得られた幼虫は5 dpfに固定され、顔面軟骨はアルシアンブルーで染色されました。各遺伝子型および処理群の幼虫ごとに内臓頭蓋の画像が撮影されました(図1A-D)。内臓頭蓋骨の軟骨は代表的な画像でラベル付けされています(図1E)。tpsDigs2を使って各画像にランドマークを配置し保存しました(代表画像、図1E')。この「ランドマークラベル付き」画像のデータセットはMorphoJにインポートされました。形状の変動に基づいて個体の分布を可...

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ディスカッション

FASDは、顎の低形成などの頭蓋顔面障害を含む幅広い発達障害を特徴とします。ゼブラフィッシュは、人間に遺伝的に保存されていること、高い繁殖率、半透明の幼生、外部受精によりFASDの強力なモデルです。ゼブラフィッシュは数十年にわたり頭蓋顔面骨格の形成とエタノールが発生に与える影響を研究するために用いられてきました。6,12,13,15,18,28,29。より最近の研究では、エタノールが顔の発達に与える影響が探求されています。この研究の鍵は顔の形状の適切な分析です。本論文では、FASDにおける顎の形状の有意な形態変...

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開示事項

著者たちは何も明かすことはありません。

謝辞

本記事で紹介された研究は、国立衛生研究所/国立アルコール乱用研究所(NIH/NIAAA)からのC.B.L.への助成金R01AA031043支援を受けています。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
tpsUtil, tpsDig2, MorphoJhttps://sbmorphometrics.orgフリーウェアソフトウェア - ダウンロードには管理者権限が必要な場合があります
過去https://www.nhm.uio.no/english/research/resources/past/フリーウェアソフトウェア - ダウンロードには管理者権限が必要な場合があります
複合ブライトフィールド顕微鏡オリンポスBX53

参考文献

  1. May, P. A., Baete, A., Russo, J., et al. Prevalence and characteristics of fetal alcohol spectrum disorders. Pediatrics. 134 (5), 855-866 (2014).
  2. May, P. A., Gossage, J. P., Kalberg, W. O., et al. Prevalence and epidemiologic characteristics of FASD from various research methods with an emphasis on recent in-school studies. Dev Disabil Res Rev. 15 (3), 176-192 (2009).
  3. Klingenberg, C. P., Wetherill, L., Rogers, J., et al. Prenatal alcohol exposure alters the patterns of facial asymmetry. Alcohol. 44 (7-8), 649-657 (2010).
  4. Smeriglio, P., Zalc, A. Cranial neural crest cells contribution to craniofacial bone development and regeneration. Curr Osteoporos Rep. 21 (5), 624-631 (2023).
  5. Smith, S. M., Garic, A., Flentke, G. R., Berres, M. E. Neural crest development in fetal alcohol syndrome. Birth Defects Res C Embryo Today. 102 (3), 210-220 (2014).
  6. Vo, H. D. L., Lovely, C. B. Ethanol induces craniofacial defects in Bmp mutants independent of nkx2.3 by elevating cranial neural crest cell apoptosis. Biomedicines. 13 (3), (2025).
  7. Brooks, E. R., Islam, M. T., Anderson, K. V., Zallen, J. A. Sonic hedgehog signaling directs patterned cell remodeling during cranial neural tube closure. Elife. 9, e60234(2020).
  8. Eberhart, J. K., Parnell, S. E. The genetics of fetal alcohol spectrum disorders. Alcohol Clin Exp Res. 40 (6), 1154-1165 (2016).
  9. Fish, E. W., Murdaugh, L. B., Sulik, K. K., Williams, K. P., Parnell, S. E. Genetic vulnerabilities to prenatal alcohol exposure: Limb defects in sonic hedgehog and GLI2 heterozygous mice. Birth Defects Res. 109 (11), 860-865 (2017).
  10. Klem, J. R., Schwantes-An, T. H., Abreu, M., et al. Mutations in the bone morphogenetic protein signaling pathway sensitize zebrafish and humans to ethanol-induced jaw malformations. Dis Model Mech. 18 (4), dmm052223(2025).
  11. Swartz, M. E., Lovely, C. B., McCarthy, N., Kuka, T., Eberhart, J. K. Novel ethanol-sensitive mutants identified in an F3 forward genetic screen. Alcohol Clin Exp Res. 44 (1), 56-65 (2020).
  12. Swartz, M. E., Wells, M. B., Griffin, M., et al. A screen of zebrafish mutants identifies ethanol-sensitive genetic loci. Alcohol Clin Exp Res. 38 (3), 694-703 (2014).
  13. Fernandes, Y., Lovely, C. B. Zebrafish models of fetal alcohol spectrum disorders. Genesis. 59 (11), e23460(2021).
  14. Howe, K., Clark, M. D., Torroja, C. F., et al. The zebrafish reference genome sequence and its relationship to the human genome. Nature. 496 (7446), 498-503 (2013).
  15. Lovely, C. B. Animal models of gene-alcohol interactions. Birth Defects Res. 112 (4), 367-379 (2020).
  16. Lovely, C. B., Fernandes, Y., Eberhart, J. K. Fishing for fetal alcohol spectrum disorders: Zebrafish as a model for ethanol teratogenesis. Zebrafish. 13 (5), 391-398 (2016).
  17. Marrs, J. A., Sarmah, S. The genius of the zebrafish model: Insights on development and disease. Biomedicines. 9 (5), 577(2021).
  18. Gray, R., Lloyd, A., Lovely, C. B. Interactions between the bone morphogenetic protein and the planar cell polarity pathways lead to distinctive ethanol-induced facial defects. Alcohol Clin Exp Res (Hoboken). 49 (11), 2502-2519 (2025).
  19. Mutsvangwa, T., Douglas, T. S. Morphometric analysis of facial landmark data to characterize the facial phenotype associated with fetal alcohol syndrome. J Anat. 210 (2), 209-220 (2007).
  20. Klingenberg, C. P. MorphoJ: An integrated software package for geometric morphometrics. Mol Ecol Resour. 11 (2), 353-357 (2011).
  21. Rohlf, F. The Tps series of software. Hystrix. 26, 1-4 (2015).
  22. Hammer, O., Harper, D., Ryan, P. PAST: Paleontological statistics software package for education and data analysis. Palaeontol Electron. 4, 1-9 (2001).
  23. Westerfield, M. The Zebrafish Book. A Guide for the Laboratory Use of Zebrafish (Danio rerio). , 5th edition, University of Oregon Press. Eugene. (2007).
  24. Dick, A., Hild, M., Bauer, H., et al. Essential role of Bmp7 (snailhouse) and its prodomain in dorsoventral patterning of the zebrafish embryo. Development. 127 (2), 343-354 (2000).
  25. Aharon, D., Marlow, F. L. Sexual determination in zebrafish. Cell Mol Life Sci. 79 (1), 8(2021).
  26. Walker, M. B., Kimmel, C. B. A two-color acid-free cartilage and bone stain for zebrafish larvae. Biotech Histochem. 82 (1), 23-28 (2007).
  27. McGurk, P. D., Lovely, C. B., Eberhart, J. K. Analyzing craniofacial morphogenesis in zebrafish using 4D confocal microscopy. J Vis Exp. (83), e51190(2014).
  28. Lovely, C. B. Quantification of ethanol levels in zebrafish embryos using head space gas chromatography. J Vis Exp. (156), e60766(2020).
  29. Klem, J. R., Gray, R., Lovely, C. B. The zebrafish Tol2 system: A modular and flexible gateway-based transgenesis approach. J Vis Exp. (189), e64679(2022).
  30. Suttie, M., Foroud, T., Wetherill, L., et al. Facial dysmorphism across the fetal alcohol spectrum. Pediatrics. 131 (3), e779-e788 (2013).
  31. Lovely, C. B., Swartz, M. E., McCarthy, N., Norrie, J. L., Eberhart, J. K. Bmp signaling mediates endoderm pouch morphogenesis by regulating Fgf signaling in zebrafish. Development. 143 (11), 2000-2011 (2016).
  32. Sheehan-Rooney, K., Swartz, M. E., Lovely, C. B., Dixon, M. J., Eberhart, J. K. Bmp and Shh signaling mediate the expression of satb2 in the pharyngeal arches. PLoS One. 8 (3), e59533(2013).
  33. Dong, X. R., Wan, S. M., Zhou, J. J., et al. Functional differentiation of BMP7 genes in zebrafish: bmp7a for dorsal-ventral pattern and bmp7b for melanin synthesis and eye development. Front Cell Dev Biol. 10, 838721(2022).
  34. McCarthy, N., Wetherill, L., Lovely, C. B., Swartz, M. E., Foroud, T. M., Eberhart, J. K. Pdgfra protects against ethanol-induced craniofacial defects in a zebrafish model of FASD. Development. 140 (15), 3254-3265 (2013).

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