トルコ・オルドゥのアレルギー症状を持つ個人の家庭用ほこりサンプルにおける家のほこりダニの有病率と種分布

サマリー

この横断的な家庭調査は、トルコのオルドゥ州で臨床的に選定された住宅におけるハウスダストダニの存在と種分布を調査しました。160世帯から粉塵サンプルを採取し、環境ダニの発生率を微視鏡で特定しました。

要約

この環境横断面研究は、トルコ・オルドゥ州でアレルギー症状を訴える個人の家庭用粉塵サンプルにおける家のほこりダニの有病率と種分布を調査しました。外来診療中に喘息やその他のアレルギー症状を訴えた160世帯から粉塵サンプルが採取されました。アレルギー状態は参加者の自己申告に基づいており、臨床的に確認されたものではありませんでした。寝室や居住空間など家庭内のさまざまな場所から、携帯型掃除機を使ってサンプルを採取し、乳酸沈殿法に従って顕微鏡的に検査しました。標準的な形態キーを用いて陽性サンプルの種同定が行われました。ハウスダニは105世帯(65.6%)で検出され、年間を通じて検出されました。最も頻繁に同定された種は、 Dermatophagoides pteronyssinus、 Dermatophagoides farinae、 Dermatophagoides spp.、Cheyletus属、 Chortoglyphus arcuatus、 Acarus siro、 Glycyphagus domesticus、 Oribatida 属、 Euroglyphus mayneiでした。統計解析では、ダニの存在とほとんどの人口統計学的、環境的、または住宅関連の変数との間に有意な関連は示されませんでした。しかし、年齢はダニ陽性性に関連する要因として特定されました。これらの発見は、この湿潤な黒海地域の家庭でハウスダニが非常に多く存在していることを示し、アトピー性疾患を持つ人々にとってその潜在的な関連性を浮き彫りにしています。患者さんやその家族に家庭内のダニ対策に関する実践的な情報を提供することで、室内環境の質や症状管理の向上につながります。

概要

ホエダニは人間の集落でよく見られる節足動物です。その微小な大きさのため、しばしば目立たず、生活空間に残っています。これらの生物は主に脱落した人間や動物の皮膚粒子を食べます。菌類の胞子やさまざまな有機粒子も彼らの食物源の一部です。ダニの生活環や個体数密度は、温度、相対湿度、食物の入手可能性などの環境要因に依存します。適切な微気候条件の屋内環境はダニの増殖を促進します ^1,2,3。

環境曝露における家のほこりダニの重要性は20世紀初頭に初めて認識されました。これらの微生物と室内環境との関係は、製粉所で働く個人の呼吸器に関する訴えと関連して確立^{されました。}Cookeが家のほこり中のアレルギー成分に注目した後、Voorhorstら(1967⁾⁴はダニが家の粉塵の主な生物学的発生源であることを示し、これは屋内環境曝露研究における重要な節目とされています。

動物由来のアレルゲンでは、呼吸器用アレルゲンが19種類、食物用アレルゲンが28種類、毒アレルゲンが3種類同定されており、文献で報告されるアレルゲンの数^{は時間とともに}増加していることが指摘されています5。 ダニ由来の抗原は、ベッド、キルト、枕、寝具、布張り家具、カーペット、綿、ウール、羽毛、その他の繊維製品などの家庭用品に蓄積することがあります。これらの抗原は、これらの材料や機械的な動きによって環境に放出され、空気中に広がることがあります。一部のグループII抗原は5μm未満の粒子サイズを持ち、呼吸可能分画⁶に存在する可能性があると報告されています。

Liら(2009^)は、一定数のダニが1日にかなりの量の抗原を産生できると報告しました。特に幼少期の環境曝露が高いことが感作の発達に重要である可能性が強調されています。これは個人や環境要因によって異なる場合があります ^8,9,10。 しかし、これらの関係の多くは環境曝露レベルに基づいて評価されており、臨床結果に関する因果推論は慎重に行うべきであることが指摘されています。

アレルギー疾患の有病率は年間約1%増加していると報告されています。この増加は^{診断方法の}進歩よりも環境要因の変化に関連している可能性が示唆されています。地球規模の気候変動、大気汚染、花粉曝露の増加、極端な気象現象の増加などの要因が環境アレルゲン曝露の要因として示唆されています¹²。 喘息は世界的に最も一般的な慢性疾患の一つと報告されており、有病率^{は地域によって}1%から18%の間で変動します。

ハウダニの分布や発生率は、気候特性、飼育構造、サンプリング方法、サンプリング頻度などの要因によって影響を受ける可能性があり、文献^7,14で強調されています。しかし、大規模なサンプルサイズと単一のサンプリング方法による研究は限られており、特に黒海地域のような湿潤気候地域では顕著です。この状況は、環境曝露の文脈で地域レベルでのハウスダストダニの存在と分布を評価する必要があります。

この横断的かつ記述的な研究の目的は、オルドゥ州の住宅から採取された家粉サンプルにおけるハウスダストの有病率と種分布を明らかにし、夏季の年間平均気温が14.4°C、相対湿度が60%〜90%の範囲にあることから、ダニの存在に影響を与える環境的および人口動態的要因を評価することです。本研究は、オルドゥ州の湿潤かつ温暖な気候が家ダニの存在に適した微気候条件を作り出し、ダニの発生率は室内環境要因によって異なる可能性があると仮説を立てています。

プロトコル

本研究はオルドゥ大学臨床研究倫理委員会により承認されました(承認番号:2017年9月11日–138)。この調査は、ヘルシンキ宣言を含む関連する機関および国家の倫理ガイドラインに従って実施されました。研究に参加した全参加者から書面によるインフォームドコンセントが取得されました。取得した同意書は、自宅訪問や住宅のほこりサンプル採取を明確に含んでいます。

1. 研究デザイン

これはトルコのオルドゥ県で行われたハウスダストダニの有病率を横断的かつ記述的に研究したものです。家庭内のほこりサンプルは、ダニの蓄積が一般的に予想される特定の屋内表面から採取されました。寝室やリビングルームにあるマットレス、寝具(枕やキルト)、カーペット、布張り家具からサンプリングが行われました。携帯用掃除機でほこりを回収し、同じ家庭内の異なる場所からのサンプルをまとめて複合的な家庭用粉塵サンプルを形成しました。

2. 研究対象集団および臨床コホートの定義

調査対象は、喘息やアレルギー症状のためにオルドゥ大学医学部教育研究病院の耳鼻咽喉科および内科外来クリニックを受診した個人で構成されています。参加者の参加基準は、18歳以上であること、自宅環境からの粉塵サンプル採取に同意していること、質問票への回答に同意していることでした。訪問に同意しなかった、書面による同意を提供しなかった、または十分な家庭内ほこりサンプルが得られなかった者は研究から除外されました。臨床診断は患者の自己申告と外来受診の理由に基づいて評価されました。臨床検証や診断検査は行われませんでした。各患者は世帯とマッチングされ、世帯レベルで分析が行われました。オルドゥ州はトルコの東黒海地域に位置し、湿潤で温暖な気候で、年間を通じて高い湿度が特徴です。この条件は、ハウスダストダニの生存と増殖を促進する可能性があります。

3. サンプリングユニットおよびサンプリング方法

本研究の主な標本単位は世帯でした。各家庭内の異なる屋内場所から複数の亜粉ストサンプルが採取され、特に寝室やリビングエリアに重点を置きました。これらのサブサンプルは別々に収集されましたが、総合的な室内ダニ曝露を示すために、単一の複合家庭用粉塵サンプルとして実験室で統合・分析されました。ダニの密度を推定するために、各複合家庭サンプルから約1gの粉塵を乳酸沈殿法で処理しました。この粉塵サンプルから作成された微小スライドで観察されたすべてのダニがカウントされました。検出されたダニの総数は、家のほこり1グラムあたりのダニ数で表されました。

各世帯は一度だけサンプリングされ、繰り返しのサンプリングは行われていません。家庭用ほこりサンプルは、各サンプリングエリアに割り当てられた使い捨てのダストバッグと、吸引力1200Wの携帯型掃除機で採取されました。サンプリングは約2分/m^² の標準化された速度で行われ、すべての世帯で一貫性と再現性を確保しました。

4. 検査手順とダニの識別

サンプルが実験室に持ち込まれると、粗い粒子を除去するためにふるいにかけられました。試料は乳酸沈殿法で検査されました。乳酸沈殿法は有機物を溶解して粉塵サンプルを清算し、ダニの分離と可視化を容易にし、信頼性の高い顕微鏡的検出と形態学的同定を可能にしました。試験管内の90%乳酸5mLに1グラムのハウスダストを加えました。チューブは優しく混ぜられ、1時間培養されました。培養後、液体の表面と底部から採取したサンプルはスライドとカバースリップの間に取り付けられ、100×、200×、400×倍率¹⁵で光学顕微鏡で検査されました。その後、ダニが検出された塵サンプルから種の同定が行われました。

ダニが検出されたサンプルは「ダニ陽性」と定義されました。生息地のいかなる発達段階(幼虫、幼虫、成虫)に少なくとも1匹のダニが存在すれば、その住居はダニ陽性とみなされます。陽性サンプルの種同定のために、立体顕微鏡で見えるダニを、上清液からろ過した後、細かい先端のインスリン注射器針で採取し、ホイヤーの培地に埋め込んだ。調製された標本は光学顕微鏡で形態学的同定のために検査されました。統計解析は統計解析ソフトウェア^{16、17、18、19、20}を用いて実施されました。標本は発生段階や診断的特徴の利用可能性に応じて、種、属、またはそれ以上の分類学レベルに分類されました。 Dermatophagoides 属には幼虫、プロトニンフ、デュトニンフの各段階が含まれ、種レベルでは確実に同定できていません。オリバティダは目レベルで特定されたダニを表します。未同定の幼虫や幼虫は未成熟の標本を指し、未同定の成虫標本は形態的特徴が不十分または損傷しているため分類できない成虫標本を指します。この総数は陽性サンプル全体で検出されたすべてのダニ個体の累積数を表しています。

5. 調査適用と変数定義

人口統計的特徴、住宅構造、環境要因、アレルギー苦情に関する質問を含む調査が参加者に実施されました。データは参加者の発言に基づいて評価され、臨床的に検証されたものではありません。

6. 統計分析

カテゴリ変数間の関連はカイ二乗検定で検証され、人口統計的および生命的特徴に応じたダニ密度の変化はMann-Whitney UまたはKruskal-Wallis検定で検証されました。従属変数(ダニ陽性)と独立変数の関連を調べるために、二値ロジスティック回帰を用いました。95%信頼区間(CI)を用いたオッズ比(OR)が計算されました。

結果

種の分布
分類群は形態学的同定が可能だった種や属レベルで報告されます。より高い分類レベルでのみ同定された標本は明確に示されています。この研究では、160世帯の粉塵サンプルが調査されました。ダニは105世帯で検出され、55世帯は陰性と評価されました。ダニ密度値は、1gの家粉塵から得られた顕微鏡的処理で観察されたダニの総数に基づいて算出されました。

検出された分類群ごとのサンプル分布は表1に示されており、各世帯におけるダニ種および上位分類群の存在をまとめています。同定は形態的特徴に応じて種、属、またはそれ以上の分類学レベルで行われました。オリバティダ属は目レベルで特定されたダニを表します。幼虫は種レベルで同定できなかった未成熟の発達段階を指し、未同定は形態的特徴が不十分または損傷のために分類学的に分類できない標本を含みます。105世帯から合計814個のダニ標本が回収されました(表2)。最も頻繁に検出された種はD. pteronyssinusで、...

ディスカッション

表6はトルコの各国・地域におけるイエコダニの有病率、サンプリング設計、サンプルサイズ、気候特性を比較しています。研究を進めると、ダニの発生率は一般的に暑く湿度の高い地域で高く、特に、同じ住宅から定期的にサンプルを採取した研究では陽性率が100%に達しました。対照的に、単一サンプリング法と大きなサンプルサイズを用いた研究では有病率が低かった。これらの発見は、気候要因に加え、サンプリング頻度、方法、サンプルサイズもハウスダストダニの陽性率を決定する上で決定的であることを示しています 21,22,23,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
ポータブル掃除機(1200W)	アーセリック	S 7564	家庭用集塵に使用
使い捨ての真空ホコリ袋	アーセリック	S 7564との互換性	各世帯の使い捨て
ふるい(細かいメッシュ)	アイソラボ	092.01.001	粗粒子の除去
試験管(15 mL)	アイソラボ	077.01.015	乳酸沈殿について
乳酸(90%)	メルク	100135	粉砕
光顕微鏡	オリンポス	CX43	&100、 と200、および400倍
立体顕微鏡	オリンポス	SZ61	目に見えるダニのコレクション
顕微鏡スライド	アイソラボ	064.01.001	試料の調製
カバースリップ	アイソラボ	064.02.001	試料の調製
ホイヤーSミディアム	シグマ・オルドリッチ	H3147	ダニ用のマウント培地
シリンジの先端(PP)	エッペンドルフ	30000813	ダニの移動
ろ過紙	ワットマン	グレード1	上清液のろ過
RPMI-1640 ミディアム	ギブコ	11875-093	寄生虫の増殖
統計解析ソフトウェア	IBM	SPSS v22.0	データ分析