耳腔電気刺激と日石頂桐煎薬の併用により、ラットの原発性月経障害と気の停滞を緩和します

サマリー

経皮的耳腔電気刺激と孫石丁桐煮込みを組み合わせることで、気の停滞と血停滞を伴う原発性月経困難症のラットモデルにおける子宮病理学的損傷および炎症関連の変化が緩和され、PPAR-γ2およびCOX-2のmRNA発現の変化が伴いました。

要約

気の停滞と血停滞を伴う原発性月経困難症は子宮の炎症や痛みと関連しており、現在の薬物療法は副作用を引き起こす可能性があります。本研究は、経皮的耳介点電気刺激(TEAP)と孫氏頂通煎薬(SDD)の結合治療効果を、気の停滞と血の静止、原発性月経困難のラットモデルで評価しました。36匹のメスのスプラグ–ドーリーラットが、ブランク、モデル、SDD、TEAP、TEAPプラスSDD、イブプロフェン群にランダムに割り当てられました。モデルはエストラジオールベンゾエート感作、塩酸エピネフリン複合ストレス刺激、オキシトシン投与を用いて誘導されました。ラットは定められた耳のポイントで7日間、正常生理食塩水、SDD、イブプロフェン、またはTEAPを投与しました。子宮の形態はヘマトキシリンとエオシン染色で検査されました。子宮内のIL-1β、IL-6、TNF-α、PGF2α、PGE2のレベルをELISAで測定し、子宮内のPPAR-γ2およびCOX-2 mRNA発現はリアルタイムPCRで定量されました。モデルラットでは、子宮上皮変性、好中球浸潤、IL-1β、IL-6、TNF-α、PGF2α、COX-2 mRNA発現の増加、PGE2およびPPAR-γ2 mRNA発現の減少が認められました。TEAPまたはSDD単独でこれらの病理学的および分子的変化が部分的に逆転し、一方でTEAPとSDDを併用した方がより顕著な改善をもたらし、イブプロフェン群で観察された効果と同等の効果を示しました。これらの結果は、TEAPとSDDの組み合わせが、気の停滞および血停滞原発性月経困難(QSBSPD)ラットにおける子宮病理的損傷および炎症関連の変化を緩和し、これらの効果がPPAR-γ2およびCOX-2 mRNA発現の調節と関連していることを示唆しています。

概要

原発性月経困難症(PD)、別名機能性月経痛は、生殖器内に特定可能な器質的病理なしに発生した月経困難症を特徴とします^。重度の月経受圧を経験する女性患者は、日常生活の課題を果たせなくなることが頻繁にあり、生活の質に大きな影響を与え、症状緩和のために薬理学的介入が必要となります^。現存する文献によると、プロスタグランジン(PG)、エストロゲン、プロゲステロン、バソプレシン、オキシトシン(OT)、免疫系、神経内分泌への影響、微量元素カルシ^{ウムレベルの変化}など、さまざまな要因と関連していることが示されています。同時に、腫瘍壊死因子(TNF)やインターロイキン6(IL-6)などの炎症因子もPGsの合成や分泌を誘導します。この過程により子宮筋が過収縮し、その後虚血性痛みと^PD4を引き起こします。現在、現代医学におけるパーキンソン病の管理は主に一般治療、薬物治療、外科的介入に分類されています。薬理学的選択肢としては、イブプロフェンなどの非ステロイド性抗炎症薬(NSAIDs)が頻繁に使用されます。それにもかかわらず、NSAIDsの使用は重大な消化器系の副作用と関連しており、長期または重度の使用は消化性潰瘍や上部消化管出血などの合併症を引き起こす^{可能性があります。}したがって、PD治療のためのより安全で効果的な戦略を特定し、開発することは不可欠かつ必要です。

増え続ける証拠は、原発性月経困難症が伝統中国医学における過剰なパターンとしばしば関連していることを示しており、その中には気の停滞や血液停滞が臨床的によく観察されていることが示唆されています⁶。このパターンでは、気の動きや血行の障害が子宮の停滞、過度の子宮収縮、痛みに寄与していると考えられています。そのため、気を調節し、血行を活性化し、経絡を温め、痛みを和らげる治療法が一般的に用いられます。耳のポイント療法は、伝統中国医学における重要な非薬物的介入です。使用が簡単で、神経内分泌および内因性鎮痛経路を調節することで痛みの緩和に用いられ^{てきました7。}福州中医病院婦人科が開発した臨床経験に基づく処方である孫石滴湯(SDD)は、気の停滞と血停滞を特徴とする月経困難症に用いられています。この処方は、気と血の調節、血行促進、経絡の温め、月経痛の緩和という治療原理に基づいています。SDDには石小山が含まれており、これは花 粉タファエ (蒲黄)と糞(ウリンジ)、根根(シャンフ)、没薬(モーヤオ)、 ラムルスシナモミ (桂芝)、ラディックス・エト・リゾマ・クレマティディス・チネンシス(威霊仙)、ハーバ・サリバエ・チネンシス(石建川)、根(ヤンフソ)、ラディックス・アンジェリカエ・シネンシス(ダン貴)、アルテミシアエ・アノマラエ(リウジヌ)、フ ルクタス・フォニクリ (シャオホイシャン)しかし、特に経皮的耳頭点電気刺激と組み合わせたSDDの実験的有効性は、気の停滞および血停滞の原発性月経困難の対照動物モデルでは体系的に評価されていません。

ペルオキシソーム増殖活性受容体(PPARs)は、核ホルモン受容体ファミリーに属し、多くの細胞内代謝過程の調節に不可欠なリガンド活性受容体です。PPARにはPPAR-α、PPAR-β/δ、PPAR-γ⁸という3つの明確なサブタイプがあります。最近の研究では、PPAR-γ2は多様な組織で発現し、炎症過程と有意な関連を示すことが示されています⁹。報告によると、PPAR-γは不活化核因子κB、活性化タンパク質-1、転写シグナル伝達経路のシグナル伝達因子および活性化因子を通じてIL-6、シクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)、エンドセリン-1、一酸化窒素シンターゼ、マトリックスメタロプロテイナーゼ-9、ゼラチナーゼ、接着分子の発現を抑制し、炎症反応を抑制します¹⁰。さらに、Huangら¹¹ はCOX-2およびPPAR-γ2が気の停滞および血液静滞(QSBS)障害の病態生理に関与する重要な標的として機能する可能性を示している。

したがって、本研究では経皮的耳点電気刺激(TEAP)、SDDの治療効果と、気の停滞と血の静止による一次性月経性月経のラットモデルでの複合応用を調査しました。子宮組織病理学、炎症メディエータープロファイリング、プロスタグランジン測定、PPAR-γ2/COX-2関連mRNA解析を統合することで、本研究は内外の伝統医学療法を組み合わせて、月経障害に関連する子宮炎症に対する保護強化の可能性を評価することを目指しました。本研究の新規性は、TEAPを臨床経験に基づくSDD式と組み合わせた実験的評価と、制御された気の停滞および血停滞原発性月経困難(QSBSPD)モデルでの評価と、PPAR-γ2/COX-2炎症調節軸との潜在的関連の探求にあります。

プロトコル

倫理的声明

すべての動物処置は福建アンブリー・バイオテクノロジー実験動物倫理委員会承認番号(IACUC FJABR2024031202)によって審査・承認されました。すべての動物実験は、承認された施設動物ケアおよび利用プロトコルに従って実施してください。

SDDとイブプロフェンの調製

SDDは、石小三(9g)、香福(9g)、魔瑶(6g)、桂芝(9g)、魏玲仙(12g)、石建川(20g)、燕虎索(12g)、当桂(9g)、柳金ヌ(15g)、小慧翔(5g)で構成されています。石小山は、浦皇(4.5g)と武陵枝(4.5g)で構成されています。すべてのハーブ成分は濃縮顆粒として使用され、 材料表に記載されています。106 gの濃縮顆粒を200 mLの沸騰した水に溶かし、最終濃度0.53 g/mLの原油医薬品換算物を得てSDDを製製します。顆粒が完全に溶けるまで十分に混ぜ、溶液を室温まで冷めてから、1回投与2.5 mL/kgで胃内ガベージで投与します。胃内ガベージに必要な濃度に応じてイブプロフェン懸液を準備してください。陽性対照治療としてイブプロフェンを0.02 g/kgで投与します。

動物とグループ分け

特定の病原体なしグレードの健康な成体雌スプラグ・ドーリーラット36頭を使用し、生後2〜3か月、体重200〜20g、妊娠や交尾歴なし±。ラットは22 ± 2°C、相対湿度50〜70%の12時間/12時間の明暗サイクルに保ち、通常の食事と飲料水は自由に利用してください。1週間の順応後、ラットをランダムに6つのグループ(1グループあたりn = 6)に分けます:ブランク、モデル、SDD、TEAP、SDD+TEAP、イブプロフェングループ。

QSBSPDモデルの準備と管理

この実験では、広く受け入れられているOT誘発性月経異常症のモデルが用いられました。簡単に言えば、ラットの発情周期は膣塗抹で評価されました。発情周期が4〜5日と判断された場合、ラットは研究対象とみなされました。

ブランク群を除き、実験群のラットは10日間、毎日エストラジオールベンゾエートおよび塩酸エピネフリンを皮下注射しました。塩酸エピネフリンを1日0.9 mg/kgの投与後、ラットは様々な複合刺激(A: 音響刺激:ラットは1日3〜4回、1〜4回、1時間にわたり5分間、90 dB、1 kHz)に曝露され、各時間の間に2時間間隔を置きました。B:光刺激:ラットは1日3〜4回、1時間に5分間、2時間間隔で点滅する光刺激にさらされました。C: 電気刺激:ラットは30〜35Vの電気刺激(二相性方形波パルス)を受け、2秒ごとに0.3秒交流電流を流しました。この刺激は2時間ごとに5分間、1日2〜4回投与されました。D: 拘束:ラットは長さ約25cm、直径約5cmの有刺鉄線製の拘束ケージに入れられました。ケージの中に入ると、ラットの端をクランプで固定し、1日1回2時間動きを制限します。さらに、1日目と10日目には皮下注射で5.0 mg/kg/日のエストラジオールベンゾエートを、2日目から9日目に2.5 mg/kg/日投与しました。

エストラジオールベンゾエート注射の5日目から、ラットは7日間、異なる胃内薬剤を投与されました。1日2回、午前10時と午後4時に投与されましたが、イブプロフェン群は1日10時に1回投与されました。ブランク群、モデル群、TEAP群では、ラットに2.5 mL/kgの生理食塩水が投与されました。SDD群およびTEAP+SDD群では、ラットに2.5 mL/kgのSDD(106 gの粗薬を200 mLの水に溶かして調製、0.53 g/mL)を投与しました。この用量は成人の臨床用1日投与量106gから体表面積の等価性に基づいて換算され、ラット相当の用量となりました。イブプロフェン群では、ラットに0.02 g/kgのイブプロフェン懸液が投与されました。TEAP群およびTEAP+SDD群では、ラットはエストラジオールベンゾエート注射後5日目からTEAP刺激を受けました。電極を、先に報告されたラット経位の標準に従って定義された両側の焦感、神門、内生志岐、内芬米耳音点に取り付け^ます。これらのポイントは迷走神経によって支配されている両側耳の頭皮腔に位置しています。電極は電子針治療機器に接続され、1日1回20分間連続波(周波数:20Hz、強度:1 mA)を送り出しました。TEAP+SDD群ラットは、最初のSDDガベージ後、毎日TEAPを受けました。最終的なTEAP刺激は、腹腔内OT注射の前に行われました。

最後のエストラジオールベンゾエート注射から24時間後、すなわち最後の胃内投与から1時間後の11日目に、ブランク群およびTEAP群を除く他のグループのラットには1匹あたり2UのOTを腹膜内注射で投与しました。TEAP群のラットは、最終TEAP刺激後に1匹あたり2Uの腹膜内注射を受けました。空白グループのラットはOT注射を受けていませんでした。このプロトコルはQSBSPDのラットモデルを確立することに成功しました。全体の動物選択、モデル調製、投与スケジュール、TEAP刺激パラメータ、耳のポイント位置は 図1にまとめられています。

ライト・ギエムサ染色

発情周期は膣塗抹のライト・ギムサ染色によって決定されました。滅菌綿棒を0.9%塩化ナトリウム溶液で湿らせ、膣管内に0.5〜1.0cm優しく挿入しました。綿棒を1〜2回回転させて膣の角質除去細胞を採取し、サンプルはきれいなガラススライドに均等に塗り広げられました。塗りついたものは室温で自然乾燥させられました。ライト・ギエムサ染色液を塗布して塗布を覆い、5分間培養しました。次に同量のリン酸塩緩衝生理食塩水を染色溶液に加え、さらに5分間染色を続けました。スライドは超純水で優しく3回洗い流され、自然乾燥させられ、光学顕微鏡で調べられました。発情周期の段階は、核上皮細胞、角膜上皮細胞、白血球などの優勢細胞タイプに基づいて特定されました。

サンプル採取

ラットはイソフルラン濃度を3%から5%に設定した麻酔誘導ボックスに入れられました。ラットが意識を失った後、手術台に移され、マスクを着用したまま麻酔下で維持されました。濃度は1.5%から2.5%に減少しました。ラットの腹部の毛はハサミで切り取られ、その後アルコールを塗布して消毒されました。腹部中央線に沿って2〜3cmの切開が行われました。子宮の片側とその靭帯は外側に取り除かれ、子宮表面に付着していた脂肪組織は切除されました。その後、子宮組織を慎重に分離しました。採取後もラットが生きている場合は、CO₂窒息で安楽死させてください。

ヘマトキシリンおよびエオシン(HE)染色

子宮組織を固定し、パラフィンに埋め込み、厚さ5μmで切片しました。各区画はキシレンで2回、それぞれ10分間脱石されました。切片は絶対エタノールで2回ずつ5分間、続いて95%、90%、80%、70%エタノールでそれぞれ5分間再水和されました。切片は超純水で洗浄されました。ヘマトキシリン染色を5分間行い、切片を水で洗い流して余分な染料が残らないまで続けました。切片はリン酸塩緩衝塩水に5分間浸してブルーイングしました。その後、切面にエオシンを1分間染め、水で洗い流しました。その後、切片は95%エタノールで10分間、絶対エタノールで10分間脱水され、キシレンで10分間クリアリングされ、中性樹脂で埋め合わせられました。代表的な画像は光学顕微鏡またはデジタルスライドスキャナーで取得されました。

酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)

新鮮な子宮組織は、残留血液を除去するために、あらかじめ冷却されたリン酸塩緩衝生理食塩水で洗浄されました。各組織サンプルは計量され、小さく切られ、1:9の組織とバッファー比で予備冷却されたリン酸塩緩衝生食塩水で均質化されました。均質液は5000 × g で4°Cで5〜10分間遠心分離し、その後分析のために上清液を採取しました。IL-1β、IL-6、TNF-α、PGF2α、PGE2のレベルは、製造元の指示に従ってラットELISAキットを用いて測定されました。すべての試薬とマイクロプレートストリップは使用前に室温に平衡化されていました。指定された井戸に標準またはサンプル(50μL)が追加されました。ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ結合検出抗体(100 μL)をブランクウェルを除く各ウェルに加え、プレートを密封して37°Cで60分間培養しました。液体は捨てられ、各井戸は薄めた洗浄バッファーで5回洗浄されました。その後、各ウェルに基質Aと基質Bをそれぞれ50 μLに加え、37°Cの暗闇で15分間インキュベートしました。その後、各井戸に停止液(50μL)を加え、15分以内に450 nmの光学密度を測定しました。サンプル濃度は標準曲線から計算されました。

定量リアルタイムPCR(qRT-PCR)

製造元の指示に従い、全RNA抽出試薬を用いて子宮組織から全RNAを抽出しました。短時間、組織を液体窒素で挽き、1mLのRNA抽出試薬を加えました。溶解液は室温で5分間培養されました。次にクロロホルム(200 μL)を加え、混合物を激しく振って15秒、室温で5分間培養、12,000 × g で4°Cで12分間遠心分離しました。 水相は新しいチューブに移され、同量のイソプロパノールと優しく混ぜられ、−20°Cで15分間インキュベートされました。サンプルは12,000× g で4°Cで10分間遠心分離し、上澄液を廃棄し、RNAペレットを75%エタノールで洗浄しました。ペレットは空気乾燥させられ、RNaseフリーの水に溶かされました。RNA濃度と純度は微小体積分光光度計を用いて測定しました。ゲノムDNAは除去され、逆転写試薬の指示に従ってcDNAが合成されました。ゲノムDNA除去では、全RNAを42°CでゲノムDNA除去試薬と共に5分間培養し、その後氷に置きました。逆転写は50°Cで15分間行われ、その後75°Cで5分間反応を終了させました。

リアルタイムPCRはSYBR GreenベースのqPCRミックスを用いて実施されました。各20μL反応には、2μLのcDNA、0.4μLの前方プライマー、0.4μLの逆プライマー、10μLの2×SYBR qPCR混合物、7.2μLのヌクレアーゼフリー水が含まれていました。qPCRは以下のサイクルプログラムで実施されました:95°Cで1分間;95°Cで20秒、56°Cで20秒、72°Cで38秒の40サイクル;その後、融解曲線解析を行います。内部対照としてGAPDHを使用し、相対mRNA発現は2^−ΔΔCt 法で計算されました。各生物サンプルは技術的に三重に測定されました。技術的三重体の平均Ct値を用いて、各生物学的複製のΔCtおよび相対mRNA発現を算出しました。プライマー配列は以下の通りです:PPAR-γ2、順方向5′-CGGAAGCCCTGTGTGACTT-3′および逆方向5′-CTCGATGGGCTTCACGTTCA-3′;COX-2、前進5′-AACCAGGTGAACTCTCTATTAG-3′および後方5′-GGTCGGTGTGTGTATGTA-3′;GAPDHは前進5′-GGTGTCTCCTGACTTCA-3′、後退5′-GGTGTCCAGGGTTTCTTACTC-3′。

統計解析

データは統計ソフトウェアを用いて分析されました。すべての定量データは平均±標準偏差として提示されました。qRT-PCR解析では、まず各生物複製ごとに技術的三重化を平均し、生物学的複製値を用いて統計解析を行いました。複数のグループ間の比較は分散の一方向解析を用い、データが分散の正規性と均質性の仮定を満たした場合にボンフェローニの事後検定を実施しました。統計的有意性はP < 0.05と定義されました。

結果

ラットの発情周期のスクリーニング

ライト・ギームサ染色の結果、発情前期の膣塗抹標識は主に核形成された上皮細胞を示し、少量の角化細胞も含まれていることが示されました。これらの上皮細胞の核は薄く染色され、拡大し、溶解の兆候を示しました。発情期には、塗片状の大きな落葉性角質化上皮細胞が優勢であることが特徴でした。発疹後には、角質化した上皮細胞がかなり存在し、少数の白血球集団も存在しました。アスチュアでは、塗抹痕に白血球の多くと粘度の低い液体の増加が特徴でした(図2)。結果は、ラットの発情周期が4〜5日であることを示し、本研究への登録が可能であることを示しました。

TEAPとSDDの組み合わせがQSBSPDラットの子宮の病理的形態に与える影響

図...

ディスカッション

PDは生理前後に現れる下腹部痛で、性器や骨盤周辺に明確な有機的損傷がない状態^です。調査によると、世界中の女性の約45%から90%が月経困難症を経験しており、そのうち10%から25%が重度の月経困難症に苦し^{んでいます。}したがって、パーキンソン病に対するより安全で効果的な介入を特定し、その根本的なメカニズムをさらに明らかにすることが不可欠です。

現在、ラットにおけるPDモデルの誘導プロトコルは、エストロゲンとOTの投与による月経困難症の症状のシミュレーションを含んでいます。この方法は、初期の感作段階の^{後に痛みの}誘発を伴う。発情期を通じて、子宮の機能状態やホルモンレベルに大きな変動が見られます。特に、興味期にはホルモンの影響が最小限に抑えられ、ラットの行動パターンがより一貫性を持つことが注目に値します¹⁵。本研究では、モデルラットが...

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
0.9% 塩化ナトリウム溶液	Heilongjiang Qiqin Animal Health Products Co., Ltd.	240314A03	組織の洗浄とサンプルの準備
1× リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)	Biosharp	BL601A	組織の洗浄、ELISA ホモジネート、および染色手順
音響および光刺激システム	動物施設でカスタムビルド	カスタムビルド	QSBSPD モデル構築中の複合ストレス刺激
接着顕微鏡スライド	Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd.	80312-3161	パラフィン切片および膣塗抹標本の準備
自動デジタルスライドスキャナー	Guangzhou Guangying Cell Technology Co., Ltd.	GCell-60	HE 染色切片のデジタルイメージング
自動組織脱水器	Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.	KH-TS	パラフィン埋め込み前の組織脱水
生物学的顕微鏡	Nikon	E200MV	膣塗抹標本および染色組織切片の観察
CO2 ガスシリンダーと安楽死チャンバー	Fuzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine Animal Center	Institutional CO2 system	動物の安楽死
埋め込みステーション用コールドプレート	Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.	KH-BL	パラフィン埋め込み
冷凍式グラインダー	Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd.	TISS-24	組織ホモジネート
当帰 (Radix Angelicae Sinensis)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A1070343	SDD 成分; 濃縮顆粒
DEPC処理水	Meilunbio	MA0018	qRT-PCR 試薬
電子鍼治療器	Suzhou Medical Appliance Factory Co., Ltd.	SDZ-II	TEAP 刺激と電気刺激
電子分析天秤	Sartorius Balance Beijing Co., Ltd.	BS 224S	サンプルと試薬の計量
エオシン	Epredia	7111	HE 染色
塩酸エピネフリン	TargetMol	119091	QSBSPD モデル構築
エストラジオールベンゾエート	Sigma-Aldrich	E8515	QSBSPD モデル構築
エタノール	Xilong Scientific Co., Ltd.	240403A1	組織処理と脱水
桂枝 (Ramulus Cinnamomi)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A2060533	SDD 成分; 濃縮顆粒
ヘマトキシリン	Epredia	7211	HE 染色
イブプロフェン懸濁液	Shanghai Johnson & Johnson Pharmaceutical Co., Ltd.	H20000359	陽性対照薬; 20 mg/mL
劉君腧 (Herba Artemisiae Anomalae)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A210A413	SDD 成分; 濃縮顆粒
低速ミニ遠心機	Hunan Xiangyi Laboratory Instrument Development Co., Ltd.	WTL-4K	サンプル準備
マイクロ冷蔵遠心機	Beckman Coulter	Microfuge 22R	RNA 抽出と組織ホモジネートの準備
マイクロプレートリーダー	Guangdong Danli Technology Co., Ltd.	K3	450 nm での ELISA 吸光度測定
顕微鏡カバースリップ	Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd.	80340-1630	顕微鏡スライド準備
モールドインキュベーター	Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.	W0704	染色またはアッセイ手順中のインキュベーション
没薬 (Myrrh)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	1107853	SDD 成分; 濃縮顆粒
中性バルサム	Meilunbio	MB9899	染色組織切片の取り付け
NovoScript Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix	Novoprotein	E047-01A	逆転写
NovoStart SYBR qPCR SuperMix Plus	Novoprotein	E096-01B	qRT-PCR 増幅
オキシトシン注射	Anhui Fengyuan Pharmaceutical Co., Ltd.	220906-4	QSBSPD モデル誘導
パラフィンワックス	Hualing	20220918	パラフィン埋め込み
PCR システム	Bio-Rad	PTC-100	PCR 関連手順
蒲黄 (Pollen Typhae)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A2092143	SDD 成分; 濃縮顆粒; 石消散の成分
PPAR-γ2、COX-2、および GAPDH の qRT-PCR プライマー	Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.	カスタム合成	qRT-PCR プライマー
ラット IL-1β ELISA キット	Meimian Biotechnology	MM-0047R2	ELISA キット
ラット IL-6 ELISA キット	Meimian Biotechnology	MM-0190R2	ELISA キット
ラット PGE2 ELISA キット	Meimian Biotechnology	MM-0068R2	ELISA キット
ラット PGF2α ELISA キット	Meimian Biotechnology	MM-0230R2	ELISA キット
ラット拘束ケージ	動物施設でカスタムビルド	カスタムビルド	QSBSPD モデル構築中の拘束ストレス
ラット TNF-α ELISA キット	Meimian Biotechnology	MM-0180R2	ELISA キット
リアルタイム PCR システム	Applied Biosystems	7300	qRT-PCR 分析
RNAiso Plus	TaKaRa	9109	総 RNA 抽出
ロータリーマイクロトーム	Thermo Fisher Scientific	HM325	パラフィン切片
紫草 (Herba Salviae Chinensis)	Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd.	A3052113	SDD 成分; 濃縮顆粒
Sprague–Dawley ラット	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.	SCXK (Jing) 2019-0010	動物モデル構築
組織埋め込み用カセット	Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd.	23033	パラフィン切片消耗品
組織埋め込み機	Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.	KH-BL	パラ