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本研究はPRILEガイドラインに従って実施・報告されました(補足ファイル1)。全体の実験ワークフローはPRILEフローチャート(補足ファイル2)にまとめられています。
サンプル選択
注意: 抜歯された人間の歯は潜在的な生物的危険性を示しています。すべてのサンプルは、手袋、マスク、保護メガネなど、適切な個人用防護具(PPE)を使用して取り扱ってください。すべての生物廃棄物は、機関および地域の規制に従って指定されたバイオハザード容器に処分してください。
この研究プロトコルは、地域の機関審査委員会(MIU-IRB-2122)から承認を受けました。Baranwalら(8)に基づくG*Power(v3.1.9.7)を用いた検出力分析 では、 1グループあたり12サンプルサイズで効果量0.586に基づく有意差検出の検出力が80%の検出力が得られることが判明しました。Misr国際大学口腔顎顔面外科から、直線的成熟した根を持つ新たに抜歯された単根永久下顎小臼歯24本(Vertucci クラスI)を採取しました。これらの歯は、本研究とは無関係の矯正または歯周病の理由で抜歯されました。抜歯直後、付着した軟部組織や歯石は歯周スケーラーで除去され、歯は流水で洗浄されました。消毒と水分維持のため、サンプルは使用前に4°Cの0.1%チーモル溶液に保存されました。歯は8倍拡大で検査されました。骨折、過去の根管治療、石灰化、吸収性病変を有する者は研究から除外されました。
試料の調製
注意:すべての根管治療用ファイル、針、ダイヤモンドディスクの処分には適切なシャープ容器を使用してください。
クラウンはセメントとエナメル質の接合部で除去され、高速ダイヤモンドディスクを水冷で制御し、根の長さを標準化しました。作業長(WL)は、サイズ10のKファイルを頂端孔で見えるまで挿入し、1mmを引くことで決定されました。運河は400 × gでHyFlex EDMグライドパスファイル(10/.05)で事前にフレアリングされていました。計測はHyFlex EDM OneFile(25/可変テーパー)でフルのWLに完成しました。
最終的な灌漑プロトコルは17%のEDTAと2.6%のNaOClを用いて実施されました。
注意:化学灌漑廃棄物は、実験室の安全基準に従い適切にラベル付けされた化学廃棄物容器に処分してください。各溶液は、サイズ20、テーパー0.02の銀ニッケルアクチベーターチップを備えた超音波ユニットを用いて30秒間超音波で作動されました。先端はWLより2mm手前に配置され、中出力(約45kHz)でパッシブ超音波灌漑(PUI)モードで動作し、先端が運河壁に引っかかることなく自由に振動するようにしました。
閉鎖プロトコル
サンプルは、Microsoft Excelを用いたコンピュータ生成のシーケンスを用いて、偏りのない分布を確保するために2つのグループ(n = 12)にランダムに割り当てられました。
- SCグループ:運河は紙の先端で乾いていました。NeoSealer Floは製造元の管内先端を使って管の冠状3分の1に注入され、サイズ25のHyFlex EDMマスターコーンに薄いシーラー層を塗り、ゆっくりとWLに取り付けました。
- CLCグループ:0.02テーパーのマスターコーンをシーラーに浸し、WLに取り付けました。サイズ25のフィンガースプレッダーをWLから1mm以内に挿入し、横方向にスペースを作りました。補助錐体(細かいサイズ)はシーラーでコーティングされ、同じスプレッダーで横方向に圧縮され、運河が満杯になるまで詰められました。
アクセスはキャヴィットで封鎖されていました。閉鎖の質と空洞の有無は、デジタル口内センサーと65kV、7mAで動作するX線装置を用いて放射線撮影で検証されました。充填密度の三次元評価を確保するため、2つの直交角度(口腔舌側と中近位)からレントゲン写真を撮影しました。画像は2倍倍で分析されました。サンプルは37°C、湿度100%の状態で14日間保管され、シーラーが完全に固まるようにしました。
再治療
再処理はProTaperユニバーサル再処理ファイル(D1、D2、D3)を用いて開始されました。デンツプリ・シロナ、バレーグ、スイス)。充填材の大部分を除去した後、ProTaper NextのX2ファイル(サイズ25、テーパー0.06)とX3(サイズ30、テーパー0.07)を用いて、500 × g 、トルク2.0 Nmでさらに拡大が完了しました。各ファイル間には30ゲージの側面通気針を使って5.25%のNaOCl灌漑を行いました。
再治療の臨床的評価項目は、X3ファイルが作業長さの全長に達し、8倍倍で検査した際にファイルフルートに目に見える充填材料の残留物がなくなった瞬間と定義されました。この基準は、手技の標準化された臨床的「ストップポイント」を表しています。しかし、これは管内の充填物が完全に除去されることを意味するものではなく、顕微鏡的な残留物は象牙質の不規則な部分内に残ることが多く、その後立体顕微鏡評価段階で定量化されます。
再治療の時間はデジタルストップウォッチで分と秒単位で記録されました。タイミング間隔は、最初の再処理ファイル(D1)がコロナのグッタパーチャに触れた瞬間から始まり、灌漑、ファイル交換、フルート清掃の際には、機器稼働時間のみを記録するために一時停止されました。タイミングは最終的な頂端ファイル(X3)が設定された作業長さに達した時点で終了します。
立体顕微鏡的評価
各根は、水冷下でダイヤモンドディスクを用いて、頬面と舌面に約0.5mmの浅い溝を2つ作ることで縦方向分割のために準備されました。根は無菌ノミの刃を溝に差し込み、木槌で軽く叩いて切断しました。各半分は8倍倍率で撮影されました。画像はImageJにインポートされました。標準化された測定を確実にするために、ソフトウェアの測定スケールはまず校正されました。これは、「直線」ツールを選択して撮影した物理定規に線を描き、「スケールを設定する」ダイアログボックスを開き、既知の距離(1 mm)を入力してピクセルをミリメートル(mm2)に変換することで行いました。次に、「ポリゴン選択」ツールを使って、根管全体の正確な周囲周長を手動で追跡し、全根管面積を計算しました。その後、同じツールを使って残留シールとグッタパーチャの見えるすべての島の周囲を追跡し、それらの合計面積を算出しました。残留充填物の割合は、残存物の総面積を運河空間の総面積で割り、100を掛けて計算されました。
冠根、中根、頂端の3つの根レベルにおける残存物は、Sherifら9によれば以下のスコアリングシステムで評価されました。立体顕微鏡分析の限界に沿って、グッタパーカとシーラーを区別しようとはしませんでした。したがって、すべての残留ゴミは総称して「残留充填材」と呼ばれます。
統計分析:
すべての解析は本研究で生成された完全な生データセットを用いて実施されました(補足ファイル3)。序数データは頻度とパーセンテージ値で提示されました。数値データは平均値と標準偏差値として示されます。データはシャピロ・ウィルク検定を用いて正規分布を検証し、正規分布は見られませんでした。各根3分の1におけるSC群とCLC群のグループ間比較には、Mann-Whitney U検定が用いられました。群内比較では、冠状、中間、頂端の3つの根レベルにかけてKruskal-Wallis検定を用い、その後Dunnの事後検定を用いて、有意な差が認められたペアワイズ比較を行った。複数のセクション比較を考慮し、タイプIエラーのリスクを減らすために、ボンフェローニ補正を適用し、有意水準を適切に調整しました。有意水準は P < 0.05に設定されました。統計解析はWindows版R統計解析ソフトウェアバージョン4.3.1(材料表)で実施されました。