マンノース受容体C型2は膠質腫の予帰不良を予測し、侵襲的な表現型やβカテニン/EMT関連変化と関連しています

サマリー

公開コホート解析およびグリオーマ細胞を用いた実験により、MRC2は神経膠腫における増殖、移動、浸潤、およびβカテニン/EMT関連変化と関連した予後不良マーカーであることが特定されています。

要約

膠腫は依然として致死的な中枢神経系の悪性腫瘍であり、予後層化を改善し治療的探求を促す追加のバイオマーカーが依然として必要とされています。本研究では、公的トランスクリプトムコホートと in vitro 検証を統合して、マンノース受容体C型2(MRC2/Endo180)を評価しました。発現プロファイルおよび臨床的一致注釈は、がんゲノムアトラス(TCGA)および遺伝子型-組織発現(GTEx)プロジェクトから取得され、腫瘍と正常の比較および汎がんスクリーニングを行い、中国膠腫ゲノムアトラス(CGGA)コホートでは予後関連性をさらに調査しました。MRC2発現はグリオーマ細胞株で逆転写定量PCR(RT-qPCR)および免疫ブロッティングで評価され、レンチウイルス短ヘアピンRNA(shRNA)を用いてU87およびU251細胞で安定したMRC2ノックダウンが確立されました。細胞増殖およびクロンノ生成性はCCK-8およびコロニー形成アッセイを用いて評価され、移動および侵入は多孔膜挿入アッセイで評価されました。CDK4、CDK6およびβカテニン/上皮–間葉転移(EMT)関連マーカーを免疫ブロット法で解析しました。データセット全体で、MRC2は膠腫で上昇し、発現が高いほど全体の生存期間、疾患特異的生存期間、無進行間隔の低下と関連していました。 in vitroでは、MRC2の枯渇により増殖、クロンノ生成性、移動、侵入が減少し、CDK4およびCDK6タンパク質レベルの低下、βカテニンおよびEMT関連マーカーの変化が伴いました。これらの発見は、MRC2が攻撃的なグリオーマ表現型に関連する予後バイオマーカー候補であることを支持し、さらなる機構的および in vivo での研究を支持しています。

概要

膠腫は中枢神経系で最も一般的な原発腫瘍であり、頭蓋内腫瘍のかなりの割合を占めます^1,2。疫学的研究では、年間10万人あたり数件の感染率と推定されており、地理的および性別に関連する差異は^3.4人で報告されています。臨床的には、神経膠腫は行動の幅広範囲に及びます。低グレードの神経膠腫は長期にわたる経過をたどることがありますが、特に膠芽腫のような高悪性度の疾患は、^{ほとんどの患者にとって}急速に致死的^です。現代のWHO分類では、組織学と主要な分子特徴(例:IDH変異、TERTプロモーター変異、MGMTプロモーターメチル化、1p/19q共欠失)を統合し、診断を精緻化し予後を判断^します。手術、放射線療法、化学療法を組み合わせた多様管理にもかかわらず、再発は一般的であり、高悪性度腫瘍の長期的な予帰は依然として芳しくありません。したがって、追加の予後マーカーや標的となる脆弱性の特定は依然として緊急の優先事項です。

MRC2(マンノース受容体C型2、別名Endo180/CD280/uPARAP)は、C型レクチン受^{容体ファミリー}に属する膜貫通メンバーです。線維芽細胞やマクロファージなどの間質や免疫区画に富を持ち、細胞外マトリックス(ECM)のターンオーバー、線維症関連の再構築、腫瘍と微小環境の相互作用に関与します^12,13。構造的には、MRC2はN末端のシステイン豊富な領域、コラーゲン結合するフィブロネクチンタイプIIドメイン、複数のC型レクチン様ドメイン、膜貫通セグメント、細胞質尾部を含みます^14,15。コラーゲンの内部化と再形成を通じて、MRC2は細胞運動性と組織侵入を促進し、MRC2の上昇は乳がん、膵臓がん、前立腺がん、メラノーマがん、膠芽腫など複数のがんにおける攻撃的行動と関連しています(^{11,14,16,17,18}.先行研究では、MRC2と侵襲的シグナル伝達プログラム(例:TGF-β関連経路)、マトリックスメタロプロテイナーゼ活性、EMT様表現型変化との関連、さらにがん関連線維芽細胞およびマクロファージ状態への関与(^{17,18,19,20,21})との関連も示唆されています。.しかし、グリオーマにおけるMRC2の臨床的意義およびグリオーマ細胞におけるMRC2の調節異常の機能的影響は依然として明確ではありません。

MRC2は複数の悪性腫瘍における細胞外マトリックス再構築や侵襲的行動に関与しているとされていますが、その膠質腫における臨床的意義は独立したトランスクリプトムコホート間で体系的に確立されておらず、その表現型関連効果も公開データセット解析と機能検証を組み合わせた統合的枠組みの中で評価されていません。したがって、本研究はMRC2が膠質腫における有害な臨床転帰および悪性表現型と関連していると仮説を立てました。この問題に答えるために、全がんスクリーニング、独立した膠腫コホート検証、安定したノックダウン実験を膠質腫細胞株で統合し、MRC2の予後的重要性と増殖、移動、浸潤、βカテニン/EMT関連マーカーの変化との関連を評価しました。MRC2はマンノース受容体ファミリーに属し、グリオーマの進行も腫瘍の微小環境によって形作られるため、IDH状態によるMRC1発現の追加探索解析を含め、グリオーマサブタイプ間の免疫関連の違いに関する文脈情報を提供しました。

本研究の新規性は、公開された膠腫データセットと in vitro 機能的アッセイの両方でMRC2を統合評価し、膠腫におけるその関連性を補完的に臨床的および実験的に示すエビデンスを提供していることにあります。単一コホート解析や細胞のみの研究と比較して、この統合ワークフローはいくつかの実用的な利点を提供します。TCGA、GTEx、CGGAの導入により、クロスコホート間の検証が可能となり、単一のデータセットへの依存が減ります。さらに、公開コホート解析とグリオーマ細胞ノックダウンアッセイを組み合わせることで、臨床関連と表現型レベルのエビデンスが結びつきます。最後に、RT-qPCR、免疫ブロッティング、CCK-8、コロニー形成、多孔質膜挿入アッセイなどの補完的なリダクションを用いることで、転写、タンパク質レベル、増殖性、運動性に関連する変化を並行して評価することが可能になります。全体の研究設計と分析ワークフローは 図1にまとめられています。この戦略は、バイオインフォマティクスのみや単一アッセイアプローチに比べて、結果の堅牢性と生物学的解釈性を向上させます。

プロトコル

本研究では、公開されている非同定データセット(TCGA、GTEx、CGGA)および確立された商業細胞株を用いました。新たに募集されたヒト参加者、特定可能な患者情報、患者由来標本は関与していません。すべての分析は、公開データの利用に関する関連する機関および国際ガイドラインに従って実施されました。したがって、本研究に対して追加の機関倫理承認やインフォームド・コンセントは必要ありませんでした。

1. バイオインフォマティクスのワークフローとデータ前処理

がんゲノムアトラス(TCGA)、遺伝子型組織発現(GTEx)プロジェクト、中国膠腫ゲノムアトラス(CGGA)などの公開リソースから遺伝子発現プロファイルや一致した臨床注釈が得られました。発現行列と臨床メタデータはRにインポートされ、サンプル識別子に従って調和されました。重複または一致しないエントリーを削除し、重要な生存情報が欠けたサンプルは生存分析から除外しました。MRC2の発現値および対応する臨床病理学的変数を抽出し、後続解析を行いました。腫瘍と正常な比較では、適合する正常組織がある場合にTCGAのみのデータを使用し、追加の正常対照が必要な場合は統合されたTCGA–GTExデータを用いてMRC2発現を比較しました。膠腫に焦点を当てた解析では、TCGA-LGGおよびCGGAコホートの患者を、コホートの中央値MRC2発現レベルに応じて高発現群と低発現群に層分けしました。その後、Kaplan-Meier生存分析、時間依存受信者動作特性(ROC)解析、Cox比例ハザード回帰分析を用いてMRC2の予後関連性を評価しました。Coxモデルには、各コホート内のデータの完全性に応じて、年齢、性別、WHO評価、その他の臨床病理学的変数などの共変量が含まれていました。年齢、組織学的サブタイプ、WHOグレード、IDH変異の状態、1p/19qコードレッションの状態、利用可能な場合は治療関連情報などの変数に基づいてサブグループ解析が行われました。図はRおよびGraphPad Prismの標準的な統計プロットワークフローを用いて作成されました。

2. 汎がん発現および生存分析

MRC2発現は、TCGAおよびGTExデータセットを用いてがんタイプを対象に腫瘍と正常組織間で比較されました。差はボックスプロットで可視化され、レーダープロットで要約されました。Cox比例ハザード回帰分析を用いて、MRC2発現とがんタイプ間における総生存期間(OS)、疾患特異的生存期間(DSS)、および無進行間隔(PFI)との関連性を評価しました。ハザード比およびそれに対応する有意水準は、森林プロットとヒートマップを用いて可視化されました。

3. グリオーマコホートにおける予後検証およびサブグループ解析

TCGA低グレードの膠腫(TCGA-LGG)コホートでは、患者はMRC2発現が高いグループと低いMRC2発現グループに階層分けされました。カプラン・マイヤー生存解析を実施し、群間でOS、DSS、PFIを比較しました。時間依存的な受信者動作特性(ROC)曲線を生成し、予測性能を評価しました。MRC2の独立予後価値を評価するために、単変量および多変量Cox回帰解析が実施されました。外部検証はCGGA膠質腫データセットを用いて行われ、Kaplan–Meier生存分析、ROC解析、Cox回帰分析が含まれます。MRC2の発現を、年齢、腫瘍グレード、組織学的サブタイプ、IDH変異の状態、1p/19qコードレット状態、治療関連変数など臨床病理学的変数を超えて評価するためにサブグループ解析を実施しました。

4. IDH変異株 と IDH野生型膠腫におけるMRC1発現

MRC1の発現とIDH変異状態の関連は、GlioVisウェブプラットフォームおよびTCGA GBMLGGGデータセットを用いて評価されました。症例は注釈付きIDHの状態に基づき、IDH変異型とIDH野生型膠腫に分類されました。選定されたデータセット内でMRC1のmRNA発現を照会し、プラットフォームの統計解析機能を用いて両群間の発現レベルを比較しました。グループごとの発現分布はプラットフォームによって生成された通りに表示され、統計的有意性はP<0.05と定義されました。

5. 細胞培養

ヒトグリオーマ細胞株および正常なヒトアストロサイトは、確立された細胞リポジトリから取得されました。細胞は、10%の胎児用牛血清(FBS)を補足したダルベッコ改良イーグル培地(DMEM)で培養され、5%のCO₂、約95%の相対湿度を含む加湿インキュベーターで37°Cで維持されました。U87およびU251細胞は、試験されたグリオーマ細胞パネルを横断したベースラインスクリーニングにより、これら2つの細胞株が比較的高いMRC2レベルを発現し、ノックダウンベースの機能解析に適していることが示されたため、機能喪失実験に選ばれました。

6. MRC2のレンチバイラルノックダウン

MRC2を標的とした短いヘアピンRNA(shRNA)と非標的対照群をレンチウイルスベクターにクローニングしました。レンチバイラル粒子は、HEK293T細胞とトランスフェクトプラスミドを共トランスフェクトし、標準的なトランスフェクション試薬を用いてプラスミドを包装することで作製されました。ウイルス上清液はトランスフェクション後48時間と72時間に採取され、2,100 × gで5分間遠心分離して包装細胞や細胞の残骸を除去し、その後0.45 μmフィルターを通過してすぐに使用または保存し、−80°C¹⁹で処理しました。ウイルスを含む上清液は即座に使用するか、分割して−80°Cで保存しました。 繰り返される凍結と融解のサイクルは避けられた。ポリブレンの存在下で膠質腫細胞はレンチウイルス粒子に感染しました。感染後、細胞はプロマイシンで選択され、安定したノックダウン細胞株を確立しました。使用された配列は以下の通りです:sh-MRC2-1: 5′-GAAATGAATGAGCAAGCAAA-3′;sh-MRC2: 5′-CCGGTATTGCTATAAGGTGTT-3′;sh-NC: 5′-TTCTCCGAACGTGTGTCACGT-3′。

7. RT-qPCRおよび免疫ブロッティングによるMRC2ノックダウンの検証

TRIzol試薬で全RNAを抽出し、製造元の指示に従って逆転写キットでcDNAを合成しました。定量PCRはSYBR Green化学を用いて以下のサイクル条件下で実施されました:95°Cで30秒間の初期変性、その後95°Cで5秒、60°Cで30秒の40サイクルを行い、増幅終了時に解離曲線解析を実施しました。プライマー配列は以下の通りです:MRC2前方、5′-GGCAAGGACAAGAGTGGT-3′;MRC2逆方向、5′-CTTTGGTGACGTGTGCTGCTT-3′;GAPDH フォワード、5フィート - TCCACCCATGGCAAATTCC-3′;そしてGAPDHの逆方向、5′-TCGCCCCACTTGATTTTGG-3′。比較 C_t (2^-ΔΔCt)法を用いて、比較 mRNA 発現を GAPDH を内部対照として計算しました²⁰。同時に免疫ブロッティングも行い、タンパク質レベルでのMRC2ノックダウンを確認する。RT-qPCRでは、3つの独立した生物学的複製を解析し、各サンプルは技術的に三重に処理されました。

8. 細胞増殖アッセイ

細胞増殖はCCK-8アッセイを用いて評価されました。細胞は適切な密度で96ウェルプレートにシードされ、指定された期間にわたって培養されました。各時点でCCK-8試薬が各ウェルに加えられ、製造元の指示に従ってインキュベーションされ、その後マイクロプレートリーダーで450nmでの吸収を測定しました。少なくとも3回の独立した生物学的複製が実施されました。

9. コロニー形成アッセイ

細胞は低密度で6ウェルプレートにシードされ、10〜14日間培養されました。コロニーは4%パラホルマルデヒドで室温で15分間固定され、0.1%のクリスタルバイオレットで15分間染色されました。コロニーはリン酸塩緩衝生食塩水(PBS)で洗浄され、空気乾燥後、手動または画像^{解析ソフトウェアを}用いてカウントされました。少なくとも3回の独立した生物学的複製が実施されました。

10. 細胞移動および侵入アッセイ

細胞移動および侵入は多孔膜挿入^アッセイを用いて評価されました。浸潤アッセイでは、上部挿入部分に細胞外マトリックスゲルがあらかじめコーティングされていました。移動検査には、コーティングされていないインサートが使用されました。血清不含有培地に懸浮した細胞が上部チャンバーに加えられ、血清を含む培地は化学誘導剤として下部チャンバーに配置されました。培養後、上膜表面の移動していない細胞は綿棒で優しく除去されました。下表面に移動したり侵入した細胞は、4%パラホルムアルデヒドで15分間固定され、0.1%クリスタルバイオレットで15分間染色され、冷たいリン酸塩緩衝生理食塩水で洗浄され、空気乾燥させられ、逆立顕微鏡で×200倍率で画像化されました。細胞は挿入物ごとにランダムに選ばれた5つの顕微鏡フィールドでカウントされました。少なくとも3回の独立した生物学的複製が実施されました。

11. ウェスタンブロット解析

細胞はプロテアーゼ阻害剤を補足したRIPAバッファーで溶解され、BCAアッセイを用いてタンパク質濃度を測定しました。SDS-PAGEによって等量の総タンパク質を分離し、PVDF膜に移しました。膜は5%無脂肪ミルクに室温で1時間封じ、4°Cで一次抗体と共に一晩培養しました。 ウェスタンブロッティングには以下の一次抗体および希釈剤が用いられました:抗MRC2(1:5,000)、抗CDK4(1:1,000)、抗CDK6抗体(1:2,000)、抗βカテニン(1:5,000)、抗E-カデリン(1:10,000)、抗N-カデリン(1:3,000)、および抗βアクチン(1:5,000)。洗浄後、膜は室温で1時間、ホースラディッシュ過酸化酵素結合ヤギ抗マウスIgGまたはヤギ抗ウサギIgG二次抗体(1:5,000)でインキュベートしました。シグナルは化学発光法を用いて可視化され、バンド強度は定量化されβアクチンに正規化されました。少なくとも3回の独立した生物学的複製が実施されました。

12. 統計分析

統計解析はRおよびGraphPad Prismを用いて実施されました。生存曲線は対数ランク検定を用いて比較されました。コックス比例ハザード回帰モデルは単変量および多変量解析に用いられました。細胞ベースの実験では、データは平均標準差±表示されます。パラメトリック検定以前は、シャピロ–ウィルク検定を用いて正規性を評価していました。正規分布データでは、2つのグループ間の差異をStudentのt検定で評価し、複数グループ間の比較は一方方向のANOVAを用いて実施しました。正規性仮定が満たされない場合は、対応する非パラメータ検定が用いられました。P値はベンジャミニ–ホッホバーグ偽発見率手順^23,24を用いて複数回の検査で調整されました。両側P<0.05は統計的に有意とされました。

結果

MRC2の汎がん発現と予後状況
まず、MRC2の発現パターンと予後関連性をヒト悪性腫瘍全体で特徴づけるために汎がん解析が行われました。TCGAおよびGTExデータセットに基づく比較では、複数のがんタイプにおいて腫瘍と正常組織間でMRC2発現が有意に異なることが示されました(図2A、2B)。レーダープロットの要約は、がん間でのMRC2発現の広範なばらつきをさらに示しました(図2C)。MRC2発現が全がんレベルで臨床的に関連性があるかどうかを評価するため、Cox回帰解析を用いて全生存期間(OS)、疾患特異的生存期間(DSS)、および無進行間隔(PFI)を対象に実施しました(図2D、2F)。ヒートマップの要約は、腫瘍タイプごとの予後関連の方向性と大きさをさらに可視化しました(

ディスカッション

膠質腫の標準治療は、最大限安全な切除に続き、放射線療法および化学療法、最も一般的にはテモゾロミド⁴を用いることに基づきます。それにもかかわらず、びまみ浸潤は完全な外科的切除を制限し、特に高悪性度疾患において避けられない再発に寄与することが多い^3,25。MGMTプロモーターメチル化、IDH変異、1p/19q共欠失、EGFR変異など、いくつかの分子的特徴が臨床的に予後および治療計画に用いられています26,27,28。しかし、これらのマーカーには実用的または生物学的な制約があり、多くの状況では単独では正確なリスク層分けには不十分です(26,27,28)。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
抗CDK4抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	11026-1-AP	ウェスタンブロッティングのための一次抗体。リッド:AB_2078702。
抗CDK6抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	66278-1-Ig	ウェスタンブロッティングのための一次抗体。リッド:AB_2881661。
抗E-カデリン抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	20874-1-AP	ウェスタンブロッティングのための一次抗体。RRID:AB_10697811。
抗MRC2抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	86028-1-RR	ウェスタンブロッティングのための一次抗体。リッド:AB_2879692。
抗N-カデリン抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	22018年1月AP	ウェスタンブロッティングのための一次抗体。RRID:AB_2813891。
抗βアクチン抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	66009-1-IG	ウェスタンブロッティングのためのローディングコントロール抗体。RRID:AB_2687938。
抗β;カテニン抗体	プロテインテック・グループ社、アメリカ	51067-2-AP	ウェスタンブロッティングのための一次抗体。リッド:AB_2086128。
BCAタンパク質アッセイキット	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	P0012	タンパク質濃度測定のためのBCAタンパク質アッセイキット。
細胞計数キット-8(CCK-8)	同仁島研究所、日本	CK04-500T	細胞生存性/増殖アッセイ。
化学発光イメージングシステム	ユヴィテック・リミテッド、フランス	アライアンスQ9アドバンストマニュアル	ウェスタンブロット検出用の画像取得システム。
CO2インキュベーター	汎用実験機器	詳細は不明です	加湿CO2培養用インキュベーターは37 & dg;Cと5%のCO2。
クリスタルバイオレット溶液(0.1%)	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	C0121-100 mL	結晶バイオレット染色液は0.1%の作動濃度で使用されます。
DMEM、高血糖	Gibco、サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック、アメリカ	C11995500BT	グリオーマ細胞培養のための基礎培地。
胎児用牛血清(FBS)	ExCell Bio、中国	FSP500	細胞培養用の血清サプリメント。
グリオヴィス	gliovis.bioinfo.cnio.es	該当しません	脳腫瘍発現データセット、特に膠腫の可視化および解析のためのウェブベースのプラットフォームです。
GraphPad プリズム	GraphPad Software、アメリカ	バージョン 10.4.0	統計分析およびグラフ作成ソフトウェア。リッド:SCR_002798。
HEK293T細胞	中国科学院タイプ文化コレクション(上海、中国)	GNHu43	レンチウイルス産生に使われる包装細胞株。リッド:CVCL_0063。
HRP結合ヤギ抗マウスIgG(H+L)	プロテインテック・グループ社、アメリカ	SA00001-1	ウェスタンブロッティングのための二次抗体。リッド:AB_2722565。
HRP結合ヤギ抗ウサギIgG(H+L)	プロテインテック・グループ社、アメリカ	SA00001-2	ウェスタンブロッティングのための二次抗体。RRID:AB_2722564。
ヒトのアストロサイト	中国科学院タイプ文化コレクション(上海、中国)	一般公開されていません	腫瘍以外の対照としては正常なヒトアストロサイトが使用されます。カタログ番号は公開されていません。
逆立顕微鏡	汎用実験機器	詳細は不明です	移動および侵入アッセイにおける画像取得に用いられる倒立顕微鏡。
マトリジェル行列	コーニング、アメリカ合衆国	354234	浸潤アッセイ用のインサートをコーティングするための基底膜マトリックス。
マイクロプレートリーダー	汎用実験機器	詳細は不明です	CCK-8アッセイで450 nmの吸収測定に用いられるマイクロプレートリーダー。
PAGEジェル調製キット、10%	EpiZyme、中国	PG212	SDS-PAGEゲル調製キット。
PAGEジェル準備キット、7.5%	EpiZyme、中国	PG111	SDS-PAGEゲル調製キット。
パラホルマルデヒド溶液(4%)	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	P0099-100 mL	4%のパラホルムアルデヒド固定剤は、コロニー形成および移動・侵入アッセイに使用されます。
ペニシリン-ストレプトマイシン溶液	Gibco、サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック、アメリカ	15140163	細胞培養のための抗生物質サプリメント。
ポリブレン	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	C0351-1 mL	レンチウイルスの伝達を促進するために用いられるヘキサジメトリン臭化液(10 mg/mL)。
プレスティンドタンパク質マーカー	エラブサイエンス、中国	E-IR-R331	タンパク質分子量マーカー。
PrimeScript RT Reagent Kit	タカラバイオ株式会社、日本	RR047A	cDNA合成のための逆転写キット。
プロマイシン	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	ST551-10mg	安定したノックダウン細胞の選別に用いられたプロマイシンジヒドロ塩酸塩。
PVDF膜	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	FFP20	親水性PVDF膜(0.45 & micro;M) ウェスタンブロット転移のためのもの。
R	R統計計算財団、オーストリア	バージョン 4.5.1	バイオインフォマティクス解析に使用される統計計算環境。リッド:SCR_001905。
RIPA溶解バッファー	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	P0013B	タンパク質抽出用のRIPA溶解緩衝液(強力)。
SDS-PAGEロードバッファ(5×)	ビヨタイム・バイオテクノロジー、中国	P0015L	タンパク質サンプルローディングバッファー。
SYBR プリミックス Ex Taq II	タカラバイオ株式会社、日本	RR066A	qPCRマスターミックス。
トランスウェルインサート、8.0およびマイクロ;mの孔径	コーニング、アメリカ合衆国	3422	細胞培養挿入は8.0 & micro;m個の孔径ポリカーボネート膜;移動および侵入アッセイの標準24ウェルフォーマット。
トリゾル試薬	インビトロジェン、サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック、アメリカ	10296010CN	RNA抽出試薬。
U251グリオーマ細胞	中国 認証細胞培養国立コレクション	SCSP-559	ノックダウンおよび機能的アッセイに用いられるヒトグリオーマ細胞株。リッド:CVCL_0021。
U87グリオーマ細胞	中国 認証細胞培養国立コレクション	SCSP-5432	ノックダウンおよび機能的アッセイに用いられるヒトグリオーマ細胞株。リッド:CVCL_0022。