本プロトコルでは、皮膚伝導度、行動、および フェーズごとの評価を同時に記録し、成人における脅威学習および報酬学習の個人別指標を導出するための、60分間の統合的な一連のタスク(回避を伴うパブロフ的-オペラント恐怖条件付け、社会的刺激を用いた恐怖の獲得・消去・再獲得、および確率的報酬学習)について記述します。
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本プロトコルでは、皮膚伝導度、行動、および フェーズごとの評価を同時に記録し、成人における脅威学習および報酬学習の個人別指標を導出するための、60分間の統合的な一連のタスク(回避を伴うパブロフ的-オペラント恐怖条件付け、社会的刺激を用いた恐怖の獲得・消去・再獲得、および確率的報酬学習)について記述します。
逆境的な児童期体験(ACEs)は、成人期の不安および抑うつの診断横断的なリスク要因として確立されていますが、早期の逆境が症状に結びつく神経認知メカニズムは、統一的な枠組みの中では依然として不明確です。本プロトコルでは、脅威の識別、安全学習、および報酬感受性を単一のラボセッション内で捉える、統合的なマルチシステム実験バッテリを提示します。38名の健康な成人を対象に、3つの行動パラダイム(回避を伴うパブロフ型からオペラント型への恐怖条件付け[実験1]、社会的刺激を用いた恐怖の獲得・消去・再獲得[実験2]、および確率的報酬学習[実験3])と、妥当性が確認された児童期の逆境(CTQ-SF)、肯定的な児童期体験(BCE)、抑うつ(PHQ-9)、不安(GAD-7, STAI)の自己報告尺度を実施しました。マルチチャンネルデータが同時に収集されました:自律神経覚醒の生理学的指標としての皮膚伝導反応(SCR)、行動指標としてのボタン押し回避および確率的選択、そして期待感、脅威、および安堵感のフェーズごとの主観的評価です。各パラダイムにおいて、正準的な効果が認められました:SCRにおけるパブロフ型識別(p = 0.009, ηp2 = 0.12)、期待感(p < 0.001, ηp2 = 0.58)、および脅威評価(p < 0.001, ηp2 = 0.35)。また、回避可能な脅威と回避不可能な脅威を識別するオペラントな安堵感(p < 0.001, d = 0.86)、実験2における獲得時には認められたが消去時には認められなかった自律神経反応の差異(獲得 p = 0.008; 消去 p = 0.168)と、それに共存する随伴性に関する持続的な宣言的知識(p < 0.001, d = 3.08)、および実験3におけるチャンスレベルを上回る確率的報酬学習(M = 73%, p < 0.001, d = 1.97)が示されました。このマルチシステム設計により、単一のチャネルでは見落としていたであろう乖離、特に持続的な主観的脅威を伴う自律神経反応の減衰が明らかになりました。本プロトコルから得られた参加者ごとの指標は、児童期体験の個人差に敏感であり、例示的な調整分析の結果を補足資料に報告しています。本プロトコルは、早期の逆境が成人期における脅威および報酬処理をどのように再調整するかを指標化するための、ポータブルで拡張可能な枠組みを提供します。
虐待、ネグレクト、家庭内機能不全を含む逆境的小児期体験(ACEs)は世界的に非常に一般的であり、多くの集団で60%を超える割合で報告されています1。研究の統合結果によれば、ほとんどの子供が発達過程で少なくとも1つの逆境的出来事にさらされていることが示されています2。ACEsは成人期の精神病理における診断横断的なリスク要因として確立されており3、不安障害の推定30%、うつ病例の40%に関与しています1。このような強い関連性があるにもかかわらず、一般的に用いられている臨床評価はカテゴリー診断と回想的な自己報告に依存しており、これらは想起バイアスの影響を受けやすく、リアルタイムの神経認知プロセスを捉えることができません4。
これらの限界を克服するため、根底にあるメカニズム、特に連合学習を標的としたトランスダイアグノスティック(診断横断的)アプローチが重視されるようになっています。パブロフ型条件付けとオペラント条件付けの両方を含む連合学習は、個体が環境の手がかり、行動、および結果の間の関係をどのように符号化し、意思決定を導くかを理解するための枠組みを提供します4,5。この枠組みにおいて、潜在的脆弱性理論は、早期の逆境が警戒心の亢進などの神経生物学的な適応を誘発し、それが予測不能な環境では当初は適応的であるものの、後のより安全な状況では不適応となる可能性があることを示唆しています6,7。
ACEs(逆境体験)が脅威および報酬に関連する学習プロセスの両方に影響を与えることが示唆されています。逆境の経験を持つ個人は、条件付けられた危険信号(CS+)と安全信号(CS−)の識別の低下を示すことが多く、これは脅威学習の変化を示しています8。並行して、早期の逆境は報酬感受性の低下と関連しており、それは報酬の随伴性に対する精度の低下と獲得の遅延に反映されています8。不確実な条件下において、これらの個人は選択の変動性の増大や、報酬がランダムに提供されると想定するバイアスを示す場合があり、これは不安定な環境に早期にさらされたことと整合しています5,9。
これらの学習パターンは、保護的要因および状態依存的要因によってさらに形成されます。肯定的な幼少期体験(Benevolent Childhood Experiences: BCEs)は、学習システムに対する逆境の影響を緩衝する可能性があり10、一方で不安などの現在の感情状態は、条件付けプロセスを調節することがあります11。皮膚電気反応(Skin Conductance Response: SCR)を含む自律神経覚醒の生理学的指標は、これらのプロセスの客観的な指標となり、条件付けパラダイムで広く用いられています12。
現在の文献における大きな制限は、脅威または報酬の学習を個別に評価する独立したタスクが用いられていることであり、統合的な神経認知機能を捉える能力が制限されている点にあります1。本プロトコルは、複数の学習領域にわたる行動学的および生理学的指標を組み合わせた標準化された枠組みを提供することで、この課題を解決します。具体的に、本プロトコルは3つの実験的構成要素を含んでいます。(1) パブロフ型条件付けからオペラント条件付けへの移行を評価するパラダイム、(2) 社会的恐怖消去タスク、および (3) 確率的報酬学習タスクです8。
この特定のパラダイムの組み合わせを採用した根拠は、これら3つのタスクのいずれかが、単独で、他の多くの既存の学習パラダイムよりも早期の逆境に対して感度が高いということではなく、測定上の根拠に基づいています。81件の研究(脅威 38件、報酬 43件)を対象とした系統的レビューにおいて、Rugeら1は、ACEsと連合学習を関連付ける文献が依然として不均一であり、主要な点において結論が出ていないことを示しました。これは、典型的には単一のタスクを用い、単一の反応チャネルを記録し、逆境を統一されていない方法で操作化しているためです。例を挙げると、行動的な報酬学習研究の半分は学習の鈍化を報告しましたが、残りの半分は有意な結果が得られなかったと報告しています。また、少ないながらにある消去に関する文献は、有意な結果が得られなかった報告や、先行する獲得相を省略した報告が大部分を占めています。さらに、普遍的に信頼性が高いとされるアウトカム指標は現れておらず、異なる反応チャネルを互いの代替指標として扱うことはできません。彼らが明確に推奨しているのは、個体レベルの指標を得るための、被験者内、マルチドメイン、およびマルチチャネルのプロトコルへの移行です。本研究の3つのタスクの組み合わせはこの推奨に従っています。なぜなら、これら3つのタスクは、単一のパラダイムでは網羅できない、計算論的に解離可能な3つの要求をカバーしており、潜在的脆弱性理論7では、逆境がそれぞれ異なる形で影響を及ぼすと予測されているためです。(i) 脅威と安全の識別と道具的な制御可能性の組み合わせであり、回避の想定強化因子として安堵感が機能します13。(ii) 抑制(安全)学習と恐怖の回帰であり、対人虐待にとって生態学的に関連のある刺激領域である社会的顔刺激を用いて検証します11。(iii) 確率的な不確実性の下での強化学習であり、参加者ごとの計算パラメータ(学習率 alpha、逆温度 beta)を得ることができます8。これら3つすべてを同一の参加者に実施することで、ACEsに関連する変化がドメイン一般的であるのか(Hansonら8が提案し、神経計算論的な潜在的脆弱性モデルが予測するように6、連合学習のグローバルな再調整であるのか)、あるいは脅威に限定された価(バレンス)特異的なものであるのかを問う設計となっています。単一タスクの研究では、構造上、これらの競合する仮説を判定することはできません。
本バッテリーは、一連の明確かつ方向性のある予測を検証するように設計されており、現在のサンプルではそれらを判定するための十分な統計的パワーはありませんが、ここでは十分なパワーを備えた研究における目標として記述します。Rugeら1によって記述された学習鈍化のパターンに従い、高いACE負荷は以下の項目に関連すると予測されます。(i) 実験1におけるCS+/CS−識別の低下。これはCS+に対する反応の減弱によってもたらされ、宣言的な期待値(維持される可能性がある)よりも、自律神経系チャネル(SCR)においてより顕著になると予想されます。(ii) 回避強化による安堵感13と一致する、より強い回避反応および回避可能なCS+に対するより高い主観的安堵感。(iii) 実験2における消去の遅延、および再獲得時における恐怖のより速く、より大きな回復。この効果は、対人的な逆境において生態学的関連性を持つ社会的(顔)刺激によって増幅されると予測されます11。(iv) 実験3における選択精度の低下、学習率(alpha)の低下、および選択の変動性の増大(betaの低下)8。極めて重要な点として、これら3つのタスクは、5つ目の識別的な予測に関する情報を共同的に提供します。すなわち、ACEに関連する変化がドメイン全般的なものであるならば、3つのタスクすべてで減弱が現れるはずであり、価(バレンス)特異的なものであるならば、2つの脅威パラダイムに限定され、確率的報酬学習では現れないはずです。また、反応チャネルが同時に記録されるため、さらなる予測の検証が可能です。すなわち、ACEの効果は一様ではなくチャネル依存的であり、単一のチャネルから導き出された結論は他のチャネルには一般化できないということです。
実験1では、San Martínら13によって開発された、回避行動および試行ごとの安堵感評定を伴うパブロフ型からオペラント型への恐怖条件付けパラダイムを適応させています。このパラダイムでは、2つのCS+刺激(回避可能なものと回避不可能なもの)と1つのCS−刺激を用いて、パブロフ的な弁別と、嫌悪的な結果に対する道具的な制御を分離します。元のパラダイムでは、パブロフ的獲得相におけるUS期待値の評定は、試行ごとではなく、相の終了時に実験者が遡及的に評価していました。本適応では、期待感、脅威感、および安堵感の主観的評定を、ビジュアルアナログスケールを用いてタスク全体を通じて相ごとに同時に収集し、相をまたいだ学習ダイナミクスの継続的な追跡を可能にしました。
実験2では、DibbetsおよびEvers9による社会的(顔)刺激を用いた恐怖獲得・消去プロトコルを適応させ、さらに短時間の再獲得テストを追加することで、条件付け反応の急速な再出現(節約効果)を評価します。
実験3では、早期逆境に関連する学習上の相違を研究するため、Hansonら8によって導入された確率的報酬学習タスクを適用しています。ここでは2つの報酬条件(80/20および70/30)を用い、参加者ごとの強化学習パラメータ(Q学習のAlphaおよびBeta)の推定を可能にしています。これら3つのパラダイムを単一のラボセッションに統合することで、本プロトコルでは、通常は個別に研究される脅威学習と報酬学習のプロセスの直接的な参加者内比較が可能となります。試行ごとの正解率およびQ学習パラメータに加えて、解析パイプラインでは線形混合モデルの適合による個々の学習軌跡の傾きも算出され、より大規模なサンプルへの適用が可能です。
ここでは、同等ではない2つの明確に異なる目標を区別しなければなりません。1つ目は、この種のバッテリーを単一の統合された60分間のセッションとして実施可能であること、および各構成要素が設計通りに標準的な効果を誘発することを立証することです。標準的な効果が再現されれば、この最初の目標に対する十分な証拠となります。2つ目は、得られた指標が児童期の逆境体験の結果に対して感度と特異度を持つことを立証することです。標準的な効果の再現だけでは不十分であり、今回のサンプルサイズではそれを証明するための検出力はありません。したがって、本報告の主な目的は、統合バッテリーの技術的および方法論的な実現可能性を検討することです。すなわち、脅威の獲得、安堵を伴う道具的回避、社会的刺激による恐怖の消去と回帰、および確率的報酬学習が、単一セッション内で自律神経、行動、および自己報告の各チャネルを通じて同時に獲得できるか、また、このパイプラインによって安定した再利用可能な参加者ごとの指標(差分SCRコントラスト、オペラント安堵コントラスト、Q学習のαおよびβパラメータ、個別の学習軌跡の傾き)が得られるかを検証することです。ACEに関連する学習の変化の評価は、二次的、探索的、かつ例示的な目的となります。ここで報告する個人差分析は、プロトコルの測定能力を実証し、候補となる指標を今後の研究で利用可能にすることを意図したものであり、トラウマと学習の経路を具体的に検証することを目的としたものではありません。したがって、本プロトコルは候補指標を提示するものであり、それらが児童期の逆境体験による神経認知的な結果を特徴づけるために必要な感度と特異度を備えているかどうかは、より大規模で、理想的には極端な群を十分に含み、事前登録されたサンプルを用いて立証される必要があります1,14
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本プロトコルでは、倫理委員会の要件に基づき、18歳以上の健康な被験者を対象に皮膚電気伝導反応(Skin Conductance Response: SCR)を測定するために使用した手順および器具について説明します。研究への参加に先立ち、すべての被験者は、6ヶ月後のフォローアップ評価のために再度連絡を受ける可能性がある旨を含むインフォームドコンセントに署名しました。本ドキュメントに記載されているすべての手順は、アンデス大学(Universidad de los Andes)の科学倫理委員会(ID: CEC2025023)によって承認されました。
注意:本プロトコルでは、被験者のスケジューリング、ラボでの準備、生理学的信号の取得、データの整理、および実験後のデータ処理を含む、完全な実験ワークフロー(図 1)について詳細に説明します。さらに、すべての実験セッションにおいてSCR記録が一貫して、標準化され、かつ信頼性の高い方法で収集されるように実施されたスタッフトレーニング手順についても概説します。

図 1: 研究デザインの全体的な概略図。各参加者は、3つの連続した行動パラダイムを含む1回のラボセッションを完了した:回避を伴うパブロフ型からオペラント型への恐怖条件付け(実験1)、社会的刺激を用いた恐怖の獲得・消去・再獲得(実験2)、および確率的報酬学習(実験3)。また、幼少期の逆境体験(CTQ-SF)、幼少期の肯定的な体験(BCE)、および現在の症状(PHQ-9、GAD-7、STAI)の自己報告も収集した。皮膚電気反応、行動(回避、確率的な選択)、および主観的評価(期待、脅威、安堵)などのマルチチャネルデータが同時に記録された。参加者ごとの指標は、個人差分析に入力された(補足ファイル 2を参照)。この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
1. スタッフのトレーニング
2. スケジューリング
3. 準備
4. 実験セットアップ
注記: すべての生理学的測定値が、参加者間で同一の制御条件下で取得されることを確実にするため、実験セットアップは厳格かつ標準化されたプロトコルに従わなければなりません。

図2: 皮膚コンダクタンス記録のためのデータ収集システム、材料、および電極の配置. (A) 本体 Biopac MP200 (B生理学的信号取得モジュール(PPG/EDA)C) センサーコネクタモジュール (Dアナログ入力モジュールEPsychoPyとAcqKnowledge間の通信用TTLモジュール。F) 使い捨て電極(EL507A)。(G皮膚との接触を改善するための等張性ゲル(GEL101A)。H電極へのゲルの塗布。I非利き手の第3および第4指の基節骨に電極を配置した。JSCR測定のため、非利き手にリストストラップを装着した様子。K校正プロセスの後、電極を接続する。 こちらの図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。
5. 実験の開始
6. 実験間
7. 実験の終了
8. データの前処理
注意:実験セッションが完了し、すべての生理学的記録が適切に保存された後、SCRデータは解析前に標準化された前処理手順を行う必要があります。
9. データベース
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分析サンプル
計38名の健康な成人を対象に、全実験セッションおよび自己報告式質問票(CTQ-SF、BCE、PHQ-9、GAD-7、STAI)を実施した。分析ごとのサンプルサイズは、参加者の脱落ではなく、チャンネル固有のデータ損失によりわずかに変動した。分析別のサンプルサイズは以下の通りである:実験1 — SCRおよび評価のANOVA(パブロフ条件付けおよびオペラント条件付けフェーズ)、n = 37;オペラントボタン押しANOVA、n = 38。実験2 — 評価分析(獲得、消去、再獲得)および獲得SCR、n = 36;消去SCRおよびSCRのフェーズ × 刺激のART-ANOVA、n = 35。実験3 — 全分析、n = 37。自己報告尺度(CTQ、BCE、症状)のみを用いる相関分析は、全サンプル(N = 38)を対象とした。
実験1:回避を伴うパブロフ型およびオペラント条件付け
パブロフ期:3つのCS(回...
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本結果は、道具的制御を伴う脅威獲得、安全学習、恐怖の回帰、および確率的な報酬学習を網羅する、統合されたシングルセッション・バッテリーの技術的および方法論的な生存可能性を立証するものである。35名から38名の健康な成人を対象としたサンプルにおいて(チャンネル固有の信号喪失により、参加者の脱落ではなく解析サンプルサイズが実験間でわずかに異なった)、すべてのパラダイムでその標準的な効果が再現された。具体的には、パブロフ期における主観的および(より弱いが)自律神経的な条件付けの差異、オペラント期における制御可能性に依存した回避と緩和、実験2における宣言的な脅威の選択的消去と自律神経反応の非選択的な減少、および実験3におけるチャンスレベルを上回る信頼性の高い確率的学習である。これが何を実証し、何を実証しなかったかを正確に述べておくことが重要である。実証されたのは、これら3つのパラダイムを、相互干渉なく1回の60分セッションで同時に実施できること、このようなセッションが強いる試行回数の圧縮後でも3つの標準的な効果がすべて維持されること、およびこのパイプラインが、他のサンプルにそのまま再適用可能な参加者ごとの指標セットを提供することである。実証されて...
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著者らは、金銭的または非金銭的な競合利益がないことを宣言します。
著者らは、時間を割いて協力してくださったすべての参加者、およびUniversidad de los Andesの研究助手と研究室チームに感謝いたします。本研究は、チリ国家研究開発庁(ANID)のFondecyt Iniciacion助成金 #11250037(研究代表者:Maria Consuelo San Martin)の支援を受けました。R.C.Vは、National Center for Artificial Intelligence CENIA FB210017、Basal ANIDの支援を受けました。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| AcqKnowledge ソフトウェア | BIOPAC Systems Inc. | ACK100W (Windows) / ACK100M (Mac) | 生理学的信号のデータ収集および解析ソフトウェア。RRID:SCR_014279 (最新の SciCrunch エントリで確認のこと)。 |
| afex (R パッケージ) | Singmann, Bolker, Westfall, Aust & Ben-Shachar | Version 1.5-1 | 要因実験用 R パッケージ。aov_ez() を介して、すべての反復測定 ANOVA (実験 1-3) に使用。RRID:SCR_022761 (最新の SciCrunch エントリで確認のこと)。 |
| ARTool (R パッケージ) | Wobbrock, Findlater, Gergle & Higgins | Version 0.11.2 | ノンパラメトリック要因 ANOVA 用の Aligned Rank Transform。分布が非ガウス分布である実験 2 の皮膚伝導度の Phase x Stimulus ANOVA に使用。 |
| Benevolent Childhood Experiences (BCE) スケール | Narayan, Rivera, Bernstein, Harris & Lieberman (2018) | パブリックドメインの尺度 (10 項目) | スペイン語適応版を使用。本尺度に RRID は割り当てられていないため、元の妥当性検証論文を引用すること。 |
| BioNomadix リストストラップ (送信機) | BIOPAC Systems Inc. | BN-PPGED-T | EDA および PPG 信号用ウェアラブル送信機。BioNomadix 受信モジュールとペアで使用。 |
| Childhood Trauma Questionnaire - Short Form (CTQ-SF) | Bernstein et al. (2003) | 妥当性が検証された 28 項目の回顧的自己報告式尺度 | 5 つのサブスケール (EA, PA, SA, EN, PN)。RRID なし。元の妥当性検証論文を引用すること。スペイン語適応版を使用。 |
| EDA 電極用導電性ジェル | BIOPAC Systems Inc. | GEL101A | 皮膚伝導度測定用の等張性ジェル。 |
| 使い捨て Ag/AgCl EDA 電極 | BIOPAC Systems Inc. | EL507A | 皮膚伝導度記録用の使い捨て電極。 |
| 全般性不安障害尺度 (GAD-7) | Spitzer, Kroenke, Williams & Löwe (2006) | 7 項目の自己報告式尺度 | 妥当性が検証されたスペイン語版を使用。尺度の RRID なし。原典を引用すること。 |
| ggplot2 (R パッケージ) | Wickham | Version 4.0.3 | グラフィックスの文法に基づくプロッティングシステム。RRID:SCR_014601 (最新の SciCrunch エントリで確認のこと)。 |
| ヘッドホン (オーバーイヤー型) | HyperX (HP Inc.) | Cloud III | 有線密閉型ゲーミングヘッドセット。恐怖条件付け中の聴覚的無条件刺激の提示に使用。 |
| Ledalab | Benedek & Kaernbach (2010) | オープンソース MATLAB ツールボックス v3.2.5 | 皮膚伝導度信号の連続分解解析 (CDA)。RRID は割り当てられていない (代わりに元の論文を引用すること)。 |
| lme4 (R パッケージ) | Bates, Maechler, Bolker & Walker | Version 1.1-37 | 線形混合効果モデル。実験 3 における参加者ごとの学習軌跡の傾きを推定するために使用。RRID:SCR_015654 (最新の SciCrunch エントリで確認のこと)。 |
| MATLAB | MathWorks | R2025a | Ledalab および SCR 前処理パイプラインの実行に使用。RRID:SCR_001622。 |
| 患者健康質問票-9 (PHQ-9) | Kroenke, Spitzer & Williams (2001) | 9 項目の自己報告式尺度 | 妥当性が検証されたスペイン語版を使用。尺度の RRID なし。原典を引用すること。 |
| 生理学的データ収集ユニット (PsychoPy) | BIOPAC Systems Inc. | MP200 | 主要な生理学的信号収集ユニット。BioNomadix ワイヤレス EDA モジュールと組み合わせて使用。 |
| Python | Python Software Foundation | Version 3.12 | Ledalab の出力と PsychoPy の行動記録を統合する前処理パイプライン (Data_Bases.py, Completed_Bases_Per_Experiment.py) に使用。RRID:SCR_008394 (最新の SciCrunch エントリで確認のこと)。 |
| R (統計計算環境) | R Foundation for Statistical Computing | Version 4.5.0 | すべての統計解析が行われた環境。調整モデルは、基本 stats パッケージの lm() 関数を用いた最小二乗回帰によって推定され、予測変数は z 標準化し、交互作用項はそれらの積として計算した。特定の調整用パッケージは使用していない。RRID:SCR_001905 (最新の SciCrunch エントリで確認のこと)。 |
| 状態-特性不安検査 (STAI) | Spielberger et al. (1983) | STAI Form Y (40 項目, SAI + TAI) | 妥当性が検証されたスペイン語版を使用。尺度の RRID なし。原典を引用すること。 |
| 刺激提示モニター | Samsung | LS22D300GALXZS (S22D300, 22-inch LED) | 視覚的 CS+ / CS- 刺激および評価尺度の提示に使用したディスプレイ。 |
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