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前立腺オルガノイド研究の技術と手法:三次元(3D)培養、スピンダウン、ディンプル付きパラフィルムおよび融合法
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Guest Editors

Sanghee Lee

Sanghee Lee

University of California San Diego

Sanghee Lee博士は、2015年にウィスコンシン大学マディソン校の泌尿器科および細胞・分子生物学プログラムで博士号を取得しました。学位論文の指導教官はWade Bushman博士であり、成マウスの膀胱と前立腺の間の神経クロストーク、および前立腺炎症によって誘発される膀胱の機能的変化について記述しました。博士研究員として、Lee博士はコロラド大学アンシュッツ医学キャンパスのAnna Malykhina博士の研究室にて、多発性硬化症のマウスモデルにおける神経原性膀胱機能不全の研究に従事しました。2017年、Lee博士はカリフォルニア大学サンディエゴ校(UCSD)に、UCSD泌尿器科およびラディ児童病院サンディエゴへの共同任命を受けた初の神経泌尿器科フェローとして就任しました。研究指導委員会のメンバーは、Christina Jamieson博士(PI)、George Chiang博士、Yahir Santiago-Lastra博士、Todd Coleman博士、およびTony Yaksh博士です。現在の研究関心は、骨転移を伴う前立腺がんにおける転移と痛みのメカニズムです。 

Christina Jamieson

Christina Jamieson

University of California San Diego

Jamieson博士は、カリフォルニア大学サンディエゴ校(UCSD)泌尿器科の泌尿器腫瘍学におけるトランスレーショナルサイエンティストです。彼女は骨転移の原因を研究しており、新しい治療法の検証および進行した去勢抵抗性前立腺癌患者への希望を提供するため、患者サンプル由来の新しいモデルを構築しました。 彼女はブランダイス大学のRanjan Sen博士のもとで分子免疫学の博士号を取得し、T細胞受容体(TCR)刺激自体がNF-kBおよびNF-ATの活性化を誘導することを示しました。その後、Jamieson博士はポストドクトラルフェローとしてカリフォルニア大学サンフランシスコ校(UCSF)に移り、まずDan R. Littman博士、次にKeith R. Yamamoto博士のもとで研究に従事しました。彼女は、T細胞前駆細胞の生存を制御し、免疫レパトアを形成するTCRとグルココルチコイドとの間のシグナルクロストークのメカニズムを明らかにしました。これらの経路は、ステロイドホルモン駆動型癌においても調節不全に陥る可能性があります。 Jamieson博士は、癌におけるステロイドホルモン療法の耐性メカニズムを研究するため、UCLAの泌尿器科および人類遺伝学部の助教授としてキャリアをスタートさせ、その後UCSDに移り、患者サンプルベースのモデルと新しい治療法を用いて、骨転移前立腺癌における治療耐性をいかに克服するかに焦点を当てて研究を行っています。

Collection Overview

オルガノイドは、細胞の生存能および治療薬に対する反応性のin vivo条件を再現し、維持すると考えられている三次元(3D)ex vivo細胞構造です。患者由来細胞が嚢胞様構造やスフェロイドを含む3D/オルガノイドを形成できるようにするため、Matrigelやコラーゲンが細胞外マトリックスとして利用されてきました。3D培養されたオルガノイドは、腫瘍形成のメカニズムを理解し、抗がん剤の効果を判定するための優れたモデルであると考えられています。そのため、脳、乳腺、肺、前立腺など、さまざまながんに対する手法が開発されてきました。しかし、前立腺は、現在のオルガノイド培養法の成功率が他のがんよりも低いという点で、やや特異的です。前立腺オルガノイド培養の確立が困難な理由は、部分的に腫瘍形成の不均一性に起因している可能性があります。ほとんどの前立腺オルガノイドは患者由来がん異種移植片(PDX)に由来しており、患者の前立腺がんをゲノム的に代表しています。したがって、PDXオルガノイドモデルは、標的分子の下流シグナル伝達や抗がん剤治療の効果を研究する上で極めて価値があります。いくつかのグループが、それぞれの実験目的に合わせて最適化した修正プロトコルを開発しています。本コレクションの目的は、(1)患者由来前立腺がん3Dオルガノイドに最適化されたいくつかの培養条件の例を提示すること、(2)RNA-FISHやフローサイトメトリーなどのシングルセル解析法に続く手法を紹介すること、(3)オルガノイド特有の免疫組織化学(IHC)/免疫蛍光(IF)法の詳細な手順を共有すること、そして(4)薬剤投与がオルガノイドに及ぼす効果を判定するための評価基準を提示することです。 

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遺伝子型と突然変異プロファイルを薬理学的応答に変換するツールとしての前立腺オルガノイド培養
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