連絡先を介して可視化の土壌微生物スライド法と顕微鏡

1. 土壌のスライドの小宇宙の準備

1. 表面から庭の土を収集 (0-6"深さ)、2 つのカップに土壌 150 g の重量を量る。
   1. 土壌に有機物の高密度がある場合 100 g の重量を量る。
2. ラベル一杯「治療」と、その他「制御」
3. 含水率を変更するために必要な水の量を計算します。
   1. 水分含有量が多いフィールドの容量の近くにあります。
      
4. メスシリンダーの蒸留水の量を測定。
5. 2 つのバイアルに蒸留水の量を注ぐ。
6. ラベル 1 バイアル「治療」と、その他「制御」
7. 「治療」土壌の乾燥重量ベースによると最終的な土壌のグルコース濃度 1% の十分なブドウ糖を「治療」瓶で水を改正します。
8. 「治療」のバイアルに 200 mg NH₄の₃を追加し、改正を溶解する攪拌します。硝酸態窒素は、土壌微生物の栄養素の窒素源として機能します。
9. 「コントロール」バイアルを改正すれば。
10. 約 50 mg の小さい因数は、「治療」のカップに「治療」バイアルの内容をミックスします。追加するたびに分注後ヘラでかき混ぜます。
11. 小さい因数で「コントロール」のカップに「コントロール」バイアルの内容をミックスします。追加するたびに分注後ヘラでかき混ぜます。
12. 4 つのきれいな顕微鏡スライド ラベル: 2 つの「治療」と「制御」の 2 つのスライド。
13. 「治療」土壌カップに 2 つの「治療」のスライドを挿入し、「コントロール」土壌カップに 2 つの「コントロール」のスライドを挿入します。土の表面の上に投影各スライドの 2 cm を残して、2 つのスライド間のギャップを残すようにしてください。
14. プラスチック製のラップとカップをカバーし、ゴムのバンドで固定します。
15. 空気がまだ余分な蒸発を防ぐためにラップの数回を穿刺します。
16. 両方のコップの重量を記録します。
17. 7 日土壌充填カップ指定エリア/インキュベーターに室温で孵化させなさい。

2. スライドの染色と顕微鏡観察

1. 両方のコップの重量を記録します。
2. スライドの取り外しの時に土壌水分を計算します。
3. 傾斜位置に各スライドを押してスライドの上面を妨げないので撤退、それぞれのカップから 2 つのスライドを削除します。
4. 識別し、染色して観察したスライドの側面をマークします。
5. 優しく大きな土壌粒子を除去するベンチ上のスライドをタップします。
6. 少し湿らせたペーパー タオルで、スライドの下面を拭きます。室温でスライドを乾燥させます。
7. 保護ゴーグルを着用し、鉗子で各スライドを保持、ヒューム フードの下で 1 〜 3 分の 40% (v/v) 酢酸にスライドを浸します。
8. 水の穏やかな流れの下で過剰な酸を洗浄します。
9. ドロッパー ボトルを使用すると、フェノール ローズ ベンガルとスライドの表面を覆います。余分な汚れをキャッチするためのコンテナーで、染色ラックにスライドをサポートします。注意してください、スライドの表面から微生物を削除可能性があります力で洗浄しないでください。
10. 5 ~ 10 分スライドになるスライドさせないで汚れは乾燥します。必要に応じてより多くの汚れを追加します。
11. 余分な汚れを削除するスライドを優しく洗います。
12. スライドは、室温で乾燥させてください。
13. 油浸対物レンズを使用して、顕微鏡 (図 1) を使用してスライドを確認します。

図 1。顕微鏡下でのスライド。