堆積物から脂質バイオ マーカーのソックスレー抽出法

1. セットアップと材料の準備

1. 冷凍、凍結乾燥、粉砕、均質化の海洋堆積物のサンプルを収集します。このようなサンプルには、標準に必要な化合物の多くが含まれています。
   1. 基準よく掘削遠征または分析の後が残っている堆積物から作られています。たとえば、この実験では、ケープコッドの真南に位置する '泥パッチ' から得られた堆積物が抽出されます。この沈殿物はコアリングの遠征の一部として撮影されたが、科学的な質問に答えるには使用されません。我々 したがって標準にそれを使用できます。
   2. それはでフリーズするので、冷凍庫に一晩堆積物の ~ 100 g チャンクを配置します。
   3. 堆積物、完全に凍結、一度オンに凍結乾燥機 (多くの利用可能な科学機器小売業者を好むフィッシャー)、コンデンサーが規定値に達するまで待ちます (しばしば 〜-30 ° C)。
   4. 凍結乾燥機に堆積物サンプルをロードし、サンプルに真空引き作業を開始するパージを閉じます。
   5. 底質中の水の量は、サンプルのサイズによっては、数日間乾燥するサンプルをかかることがあります。
   6. サンプルが乾燥して、凍結乾燥機、ベントをオフにしてサンプルを削除します。
   7. 溶媒リンス乳鉢と乳棒を用いて粉に挽くにサンプルを配置します。抽出する準備ができるまでサンプル全体と冷凍庫にガラスの瓶にストアにこれを行います。
2. サンプルのサイズに応じて 4 60 mL に至るボリュームでバイアルを使用します。この実験では、ホウケイ酸ガラスの瓶 (40 mL) と溶剤の安全キャップを使用します。燃焼バイアル、ホウケイ酸ガラス ピペット、および可能な有機汚染物質の除去を確保する前に 6 時間 550 ° C で計量缶。
3. ジクロロ メタンおよびメタノール (両方は、一般的なほとんどの有機性地球化学研究所)、取得、実験室のツールと使用前にガラスを洗浄するそれらを個別に使用します。多くのラボでメタノール (メタノール; 9:1) (DCM) ジクロロ メタンの混合物を使用することで、極性の広い範囲でバイオ マーカーを効率的に抽出します。溶剤は、有機汚染物質の無料する必要があります。
4. ソックスレー抽出装置 (これらは fisher Scientific 社または他の科学の小売業者から購入することができます) この実験で使用するを取得し、洗浄、燃焼使用前に h 6 550 ° C でそれ。
5. ガラス繊維指ぬき (ワットマンから購入することができます) と燃焼を取得使用する前に h 6 550 ° C でそれら。

2. サンプルの調製

1. ラボ ・風袋錫の重量を量る燃焼を配置します。
2. 洗浄溶剤、ラボへら計量錫に適切なサンプル量を転送するためにそれを使用し、質量を記録します。
   1. 試料の質量は、その有機物の含有量によって異なります。有機物豊富な材料 (葉組織) が、はるかに少ない必要ですが、比較的有機物の無駄のない材料 (海泥) は数グラムを必要があります。
3. 燃焼ガラス繊維指ぬきにすべての計量のブリキ缶に材料を転送します。

3. 抽出

1. 丸底フラスコに DCM:MeOH (9:1) 混合物の ~ 400 mL を転送 (フラスコを半分以上にする必要があります) 加熱マントルを入れて。いくつか (5-10) 溶剤洗浄沸騰チップを追加します。
2. サンプルの指ぬきは、ソックスレー抽出装置の目玉に、オープン エンドを配置します。
3. 丸底フラスコの上に目玉を入れ、ガラスのクランプで固定します。
4. ソックスレーの目玉の上にコンデンサーを取り付け、ガラス クランプします。
5. ホースのクランプを使用してフードで冷たい水のラインにコンデンサーから冷たい水ラインの 1 つを接続します。ドレインに他をルーティングします。
6. 適切な循環と排水のように水を入れます。
7. 加熱マントルに切り、丸底フラスコに溶媒が軽く沸騰するまで温度を調整します。
8. 次の 1 時間で数回抽出を監視します。
   1. 温度が低い沸騰で正しく設定されて、溶媒はコンデンサーで凝縮、センター ピースに滴下、センター ピースは充填と適切に空にしてフード ドレインに水切り適切かどうかを確認してください。
9. 次の 36 h 以上抽出を監視します。
   1. 温度が低い沸騰で正しく設定されて、溶媒はコンデンサーで凝縮とセンター ピースに滴下、センター ピースがいっぱいと正しくを空にした水が正しくフード ドレインに流出させると丸底フラスコに溶媒のレベルはまだ半分程度。
10. 36 時間後に、加熱マントルをオフに抽出を停止します。
11. フラスコ「TLE」ラベルを付けます。