カラム ・ クロマトグラフィで総脂質抽出物の精製

1. セットアップと材料の準備

1. 総脂質抽出物 (TLE) を溶媒抽出法 (超音波、ソックスレー、または加速溶媒抽出 (ASE)) を使用してを取得します。
2. 次の収集: 燃焼ホウケイ酸ガラス ピペットと球根、シリカゲル、ヘキサン、ジクロロ メタン (DCM) メタノール。
   1. これらの材料は、任意の化学の小売店から購入できます。試薬は、純粋で炭化水素から自由にする必要があります。
3. また燃焼グラスウールと 4 mL ホウケイ酸ガラスの瓶を取得します。
4. プロシージャの間に列とコレクション バイアルをサポートする手段を持っていることを確認します。たとえば、クランプと下劣なラック スタンド。多くのラボでは、いくつかの列とコレクション バイアル (図 2) を保持するカスタムメイドのラックを設計しました。これは多くの列を同時に実行することができます。

2. 方法

1. 4 mL バイアルで乾燥のサンプルを開始します。サンプルの重量を量る場合以上 〜 10 mg の乾燥時、シリカゲルだけ有機物の有限質量反応できるよう、次の手順を実行する前に分割する必要があります。
2. ヘキサンを少量のサンプルを中断します。これは、最初、この実験で少なくとも 3 つの溶媒の極性使用します。
3. 超音波照射 5 分サンプルをサンプルのバイアルの中に立ち往生している場合、
4. グラスウールの少量を清潔なピンセットのセットを使用してピペットの上部に読み込みます。プラグを形成する別のピペットを使用して、ピペットの底部にガラスウールを軽く押します。
5. それが約半分がいっぱいになるまで慎重に、ピペットにシリカゲルを転送します。
6. 4 mL 廃棄物収集バイアル] 列の下に配置します。
7. ヘキサンの 3 巻でピペットでケイ酸ゲルを浸します。これは、列を条件空気の泡を削除し、シリカゲルを不純物をリンスします。
8. 最終的な洗浄が終わったら、廃棄物収集バイアルを取り外して極冠割合を収集するバイアルを置き換えます。
9. 慎重にピペットを使用して列にヘキサンでのサンプル全体を転送します。少量のヘキサンでサンプルバイアル 2 回以上を洗い、列に転送。シリカゲルに完全に浸るサンプルで移ったヘキサンを許可します。手順中に時間がない時をシリカゲルを乾燥する必要があります。
10. 列の下コレクション バイアルがほぼいっぱいまでサンプルの上部にヘキサンを追加 (〜 4 mL)。
    1. 次の溶剤から始まる前にケイ酸ゲルを入力するヘキサンのすべてを許可します。
11. 列の下中間極性コレクション バイアルを配置します。
12. コレクション バイアルがほぼいっぱいになるまで、列の上部に DCM を追加します。もう一度、次の溶剤を開始する前にコレクションのバイアルを入力する DCM のすべてを許可します。
13. 列の下極コレクション バイアルを配置します。
14. 下劣なコレクションがほぼいっぱいになるまで、列の上部にメタノールを追加します。