Question 1

バクテリオファージの構造は何ですか？

Accepted Answer

バクテリオファージは、DNAまたはRNAの核酸ゲノムからなり、タンパク質の被覆であるカプシドに囲まれています。一部のファージには、追加の脂質被膜とスパイク状の表面付属構造または尾があります。これらの超微小粒子は、光学顕微鏡では見ることができず、電子顕微鏡でのみ見ることができます。

Question 2

バクテリオファージはどのように細菌細胞に感染し、増殖するのでしょうか？

Accepted Answer

バクテリオファージは細菌の細胞表面に付着し、その遺伝物質を宿主に注入します。ウイルスゲノムは複製され、宿主細胞の生化学的機構を使用してカプシドタンパク質が生成されます。ファージ粒子が組み立てられると、宿主細胞を裂解することで放出され、しばしば突然破裂し、その過程で細菌を殺します。

Question 3

プラークアッセイとはどのようなものであり、どのようにファージ濃度を測定するのでしょうか？

Accepted Answer

プラークアッセイでは、ファージを細菌と混ぜ、通常のアガープレートの上にソフトアガーを重ねます。細菌は連続的な芝生を形成し、ファージが細菌に感染してそれらを裂解すると、クリアゾーンとしてプラークが形成されます。個別のプラークを数え、1ミリリットルあたりのプラーク形成単位（PFU）を計算することで、サンプルの元のファージ濃度を決定します。

Question 4

コリファージはなぜ水汚染の有用な指標となるのでしょうか？

Accepted Answer

コリファージはE. coli、糞便汚染を示す一般的な腸内細菌に感染します。これらは、糞便によって伝播されるが検定が困難な病原性腸ウイルスの信頼できる代理指標です。迅速で安価な列挙法により、コリファージは環境における糞便汚染を評価するための魅力的なツールとなっています 水サンプル。

Question 5

プラークアッセイで細菌を準備するためにはどのような条件が必要ですか？

Accepted Answer

バクテリアが全て生きていてファージが子孫を生み出せるようにするには、細菌が対数増殖相にある必要があります。アッセイの3時間前に、一晩培養したものを新鮮なブロスに接種し、振とうしながら35-37°Cでインキュベートします。このタイミングにより、細菌がファージの複製をサポートするための最適な代謝活性を達成できます。

Question 6

プラークアッセイをバクテリオファージ以外のウイルスを検出するためにどのように適応させることができますか？

Accepted Answer

プラーク検定は、組織培養皿で単層として哺乳類細胞を成長させることで、インフルエンザのような哺乳類ウイルスに対して実行できます。感染を可能にするためにウイルスを含む培地を加え、次いでアガロースのような固定培地で細胞を覆います。最大2週間にわたる培養後、感染した細胞を固定し、染色してプラークを可視化し数えます。

Question 7

プラークアッセイを使用して環境サンプルから個々のファージ分離株はどのように得られますか？

Accepted Answer

ファージは環境サンプルから土壌のようにろ過によって収集され、その後プラークアッセイで感受性のある細菌に感染させるために使用されます。個々のプラークを選び、細菌を含む上層アガーが被せられた新しいアガープレートに塗布されます。塗布に沿ってファージ濃度が低下し、単一のファージタイプから個別のプラークを分離してさらに分析することが可能になります。

環境試料中のバクテリオファージの検出 - 評価クイズ