カラム ・ クロマトグラフィ

1 シリカゲル スラリー

1. シリカゲルを三角フラスコに注ぐ。包装材の重量も約 50 倍、分離されているサンプル。分離されている化合物は、非常によく似たR_f値を持つ、それは大量のサンプルは、この例では、あたりのシリカを使用してを必要があります。
   1. 三角フラスコ、50 mg のサンプル (45 mg フルオレノンのテトラフェニルポルフィリンの 5 mg) が分離されているので中のシリカの場所 10 g。
2. 溶剤システムを追加 (ヘキサン/ジクロロ メタン 70%: 30%) シリカゲルを含むエルレンマイヤー フラスコに。シリカゲルのすべてがよく溶媒和であることを確認する十分な溶媒を追加します。シリカは分解しないが、とき、混合物は視覚的に顕著なる溶媒和。溶媒が追加された後、シリカのすべてがよく溶媒和ように三角フラスコを旋回します。

2. 列の準備

1. 適切なサイズの列を選択します。通常シリカゲル スラリーの約半分の方法列を入力する必要があります。精製されているサンプルのサイズを大きくより大きい列が必要です。
2. グラスウールの切れ端で列の下部に差し込みます。長い棒を使用して、ウールが、活栓のすぐ上の列の下部に詰まってしっかりとを確認します。
3. ウールはしっかりと後、は、グラスウールの上砂の薄い層を適用します。
   注:活栓上記ガラスフリット列が装備されている場合は、この手順を省略されなければなりません。
4. リング スタンドに縦位置で列を固定します。
5. 目標到達プロセスを使用して、優しく注ぎ準備スラリー状シリカゲルの列。三角フラスコから列にスラリーを転送する追加溶媒を追加する必要があります。ピペットを使用して、列の両側にスティック任意のシリカゲルを洗います。
   1. シリカゲル列で定着しつつあると優しくシリカゲル パックをしっかりと、空気の泡を除くことを確認する列の側面をタップします。
6. 活栓を開き、シリカゲルと溶媒フロント ミート前だけまでに、きれいな三角フラスコに流出し溶媒を許可します。シリカゲルには、プロシージャが完了するまでに決して乾燥行く必要があります。
7. シリカゲル (図 1) の上に砂の薄層を配置します。ピペットを使用して、列の両側に立ち往生している可能性があります任意の砂を洗います。
8. 砂は、乾燥するまでが、シリカゲル層にない追加溶剤を排出します。

図 1。カラム ・ クロマトグラフィの適切なセットアップは、サンプル添加する前に試してみてください。

3 列にサンプルを追加

1. (シリカゲル スラリーのために使用された同じ溶剤を使用して) 可能な溶媒の少量のサンプルを溶解します。
2. 列の上部にサンプルを追加そっとピペットを使用して。
3. サンプルは、列の上部に適用されている、一度活栓を開き、砂の層がないシリカゲル層を通って流出する溶剤を許可します。上下に列の側面にしがみついている可能性があります任意のサンプルを洗浄する溶剤量が非常に少ないを使用します。砂層にもこの追加溶剤を排出します。

4. 列を通して試料の溶出

1. 砂の層を妨げないような方法で 4-5 mL の溶媒を追加ピペットを使用して、非常に穏やか。
2. 列の上部に漏斗を置き、非常にゆっくりと優しく溶媒と列の残りの部分を埋めます。
3. 活栓を開き、列を通って流出する溶剤を許可します。
4. 試験管に列から排水溝のように移動相を収集を開始します。
   1. 試験管は、順次テスト チューブのラックに配置する必要があります。
5. すべての必要な化合物がカラムから溶出されるまで必要に応じて列の上部に追加溶媒を追加します。

5. 回復成分

1. 化合物が着色されている場合、視覚的に識別できます。しかし、化合物は無色、する場合彼らは (化合物には、共役が含まれて) 場合 ulta 可視 (UV) 光を使用して識別する必要がまたは適切な染色。化合物の純度は、薄層クロマトグラフィーを使用して確認できます。
2. 目的の化合を含む試験管を識別します。
3. あらかじめ重量を量られた丸底 (RB) フラスコに目的の分離化合を含む画分のすべてをマージします。この隔離される各化合物に対して行います。
4. 回転蒸発器に RB フラスコを置くことによって溶媒を蒸発させます。
5. 溶媒のすべてが削除されると、乾燥製品で RB の重さし、収率を取得する RB の初期の重さを引きます。