5.12: 麻酔導入とメンテナンス

獣医師が手術やその他の潜在的痛みを伴う処置の麻酔薬の適切な選択を決定する必要があります。これは、手順、種、ひずみ、年齢、および動物の生理学的状態の期間である程度など、多くの側面に基づいています

麻酔薬、吸入や注射として使用できます。手術の麻酔は、注射と吸入麻酔薬の組み合わせを使用して実現できます。²

1。吸入麻酔導入

吸入麻酔にはとイソフルレンの最も一般的に使用されるイソフルラン、セボフルラン、desflurane が含まれます。これらの麻酔薬は、それら、それが麻酔の深さをコントロールしやすくなるのでより頻繁に使用されます。ガラスベル ジャーまたは精度の気化器に取り付けられている誘導室で吸入麻酔薬を用いた麻酔導入を実現できます

1. ベルジャー
   1. 機器: ベルジャーやセラミックやプラスチック製の穴あきプラットフォーム、綿球、液体麻酔薬 (イソフルラン、セボフルラン、または desflurane) と屋外に出されたヒューム フード乾燥瓶
   。
   2. 準備
      1. 担当者の麻酔ガスへの暴露を避けるために、フードの下ではなく、ベンチ、ベルジャーを使用します
      。
      2. は、下部には、瓶の底とプラットフォームの間のスペースを作成するプラットフォーム ベルジャーを組み立てます。これは麻酔液の接触から動物を防ぐために必要です
      。
      3. 身に着けてニトリル手袋やその他の不浸透性の手袋、麻酔薬と綿球を飽和します
      。
      4. 、ベルジャーのプラットフォームの下でコットン ボールを配置します
      。
      5. 麻酔蒸気の脱出を防ぐためにベルの瓶に蓋をセキュリティで保護します
      。
   3. 誘導
      1. ベル jar ファイルに 1 つの側面に蓋をスライドさせて、動物を配置します
      。
      2. 動物が瓶の中と、その活動と麻酔の深さを判断する呼吸を観察する必要があります
      。
      3. 動物は麻酔薬の効果を公開します
      。
      4. 動物完全に麻酔をかけられ、一度は、手の導入を許可するための十分なスペースを残して、1 つの側面に蓋をスライドさせます。尾、首筋、または麻酔下の動物のボディを持ち、そっとベルの jar ファイルから削除します
      。
2. 気化器精度
   精度気化器は誘導室またはフェイス マスクのいずれかで使用できます。麻酔器は、各プロシージャの前に検査する必要があります。適切な麻酔をする必要がありますレベルが低いかどうかを追加。清掃システムをチェックして、廃棄物のガスが完全に削除されていることを確認する必要があります。受動的廃ガス麻酔システム清掃のキャニスターは、それがまだ有効であるかどうかを考慮すること。一般に、上記の開始の重量 50 グラムの体重の増加は、キャニスターに費やされているポイントです。
   1. 設備
      1. 誘導室、精密気化器、ユニット (受動またはアクティブ)、および液体の麻酔薬 (イソフルラン、セボフルラン、または desflurane、気化器使用中のタイプによって決定される) を清掃廃棄物ガス
      。
   2. 準備
      1. 気化器からの入力は、出力は、システムを清掃廃棄物ガス誘導室を組み立てるです
      。
   3. 誘導
      1. 誘導室に動物を配置。いくつかの部屋は、スライド式の蓋、その他ラッチ ヒンジ蓋
      。
      2. 一度動物は商工会議所で、酸素の流れを開始、精密気化器はイソフルランを 3-4 の誘導レベルでオンします。下位麻酔配信誘導時間が長くなります
      。
      3. 動物は麻酔薬の効果を公開します
      。
      4. 動物完全に麻酔をかけられ、一度は、麻酔ガスを人の接触を防ぐために動物を削除する前に酸素室をフラッシュします。酸素フラッシュ場合は発煙のフードで誘導室を配置すると、開く前に商工会議所から麻酔薬をパージする必要はありません
      。
      5. 尾、首筋、または麻酔下の動物のボディを持ち、商工会議所から注意深く取り外します
      。
3. フェイス マスク
   1. 齧歯動物の鼻の円錐形またはマスク、精密気化器、ユニット (受動またはアクティブ)、および液体麻酔薬 (イソフルラン、セボフルラン、または desflurane、種類によって決定される清掃廃棄物ガス機器が含まれます気化器使用中) の
   。
   2. 準備
      1. 鼻の円錐形を組み立てたり、気化器からの入力は、システムを清掃廃棄物ガスは出力をマスクします
      。
      2. 齧歯動物麻酔器頻繁に齧歯動物の鼻の円錐形またはマスクする誘導室から麻酔蒸気供給を切り替えるトグルがあります。これは正しくノーズコーン麻酔配信設定を確認してください
      。
   3. 誘導
      1. 麻酔ガスの不快な臭いとして多くの動物誘導のマスク対象に反対するでしょう。鼻の円錐形で保守が続く誘導ボックスを使用することをお勧めします。一度動物 ' s 鼻や顔がマスクでしっかりと、酸素の流れを開始、精密気化器はイソフルランの 5 の誘導レベルでオンします。麻酔配信の下位になります長い誘導時間と動物に苦労して増減します
      。
      2. 誘導中に余りにもしっかり把握することができます窒息する可能性としてその動物が呼吸の監視が不可欠です
      。
      3. とすぐに、動物がリラックスを開始、鼻や顔を鼻の円錐形またはマスク、調整できます、完全なリラクゼーションが達成されれば麻酔配信はイソフルランの 1.5 0.5 のメンテナンス レベルに削減します
      。

2。麻酔の注射の麻酔を使用しての誘導

注射麻酔薬ケタミン、鎮静剤、筋肉弛緩の主に混合物である

一般的な組み合わせは、: 1) 滅菌生理食塩水 (10 mg/ml)、アセプロマジン、キシラジン (20 mg/ml) ケタミン (100 mg/ml) から成っている齧歯動物カクテル (0.9 %nacl);2) ケタミン ・ キシラジン 2:1、ケタミン (100 mg/ml)、キシラジン (20 mg/ml)、滅菌生理食塩水から成っている (0.9 %nacl);・ 3) ケタミン ・ キシラジン (100 mg/ml) ケタミン ・ キシラジン (20 mg/ml)、滅菌生理食塩水で構成されるマウス ミックス (0.9 %nacl). ケタミン ・ キシラジンのコンボを使用している場合を高めるだけされるべきのみ、ケタミンを用いたないキシラジンの半減のためこれらの薬剤。

鎮静剤や筋弛緩薬ケタミンの組み合わせは、個人線量を描画できる原液として準備される必要が。エージェントを正確に測定し、適切な用量は動物に投与されるように滅菌生理食塩水で希釈する必要があります。ボトルから使用量に注意しなければなりませんので、ケタミンは、規制物質、" 制御薬のログ、" 混合物は個々 に必要と " 制御物質ログ " の混合物を準備するときは、徐々 に、ケタミンを追加、。ボトル、それは泡の力を注入した場合に傾向があります。滅菌栓 20 ml ボトルは、混合物に使用されます。ボトルが正しくの化合物、混合日付、有効期限、ケタミン ロット番号 (制御物質である)、名前を付けてくださいと推奨される投与量。すぐに期限切れになる成分の日付によって決定される有効期限 (施設/国家の規則/ガイドラインによって異なります)。ケタミンの正確な記録は、充填瓶と空ボトルを検討する必要があります。その後、混合物のラベルと各ボトルに準備されている個々 の制御物質ログ シート、重みは記録されなければなりません。効力を維持するために暗い、温度管理された領域にケタミン混合物を保存します

1. 齧歯動物カクテル
   1. 装置麻酔液の準備のための準備が含まれます " 針、1.8 cc ケタミン注射の100 mg/ml、1.8 キシラジンの cc 注射用 20 mg/ml、0.6 アセプロマジンの cc 注射用 10 mg/ml、15.8 cc の生理食塩水の注射と麻酔のラベル
   。
   2. ドロー 15.8 を滅菌生理食塩水の cc し、ボトルに注入します。12 cc 注射器と 3 cc の注射器を使用し、正確な測定のための空気の泡を解消
   。
   3. ボトルにケタミン、キシラジン、アセプロマジンを追加します
   。
2. カクテルの齧歯動物の誘導
   1. 一般に、齧歯動物カクテル用マウス麻酔。ラット齧歯動物カクテルへの応答の差、それに適していますラット 5 週齢未満。特にラットでの吸入麻酔と組み合わせて齧歯動物のカクテルを使用する可能性があります
   。
   2. 齧歯動物カクテルは一般的に次の計算を使用して重量によるとマウスに与えられる: (BW x 10) - 50 マイクロリットル齧歯動物に与えられるカクテルを =。これは、ひずみ・年齢・健康状態に異なります
   。
   3. このソリューションは腹腔内に与えられただけ。筋肉内に注射する場合、組織に重篤な反応があります
   。
3. ケタミン ・ キシラジン 2:1 の準備
   1. 麻酔液の準備のための機器を含む 3 cc 注射器、22 g × 1 " 針、10 cc のケタミン注射用 100 mg/ml、5 キシラジンの cc 注射用 20 mg/ml、滅菌栓 20ml 瓶と麻酔のラベル
   。
   2. ボトルにケタミン ・ キシラジンを追加します
   。
4. 誘導
   1. ケタミン ・ キシラジン 2:1、ラットの麻酔用し、吸入麻酔と組み合わせて使用する場合があります
   。
   2. ケタミン ・ キシラジン 2:1 である一般に 0.3 の用量で開始 cc し、0.02 増以降麻酔イベント cc。これは、ひずみ・年齢・健康状態に異なります
   。
   3. ケタミン ・ キシラジン 2:1 は筋肉あるだけ
   。
5. ケタミン ・ キシラジン マウス ミックスの準備
   1. ケタミン ・ キシラジン マウス ミックス装置必要な麻酔液の調製を含む 3 cc 注射器、22 g × 1 " 針、3.6 cc のケタミン注射用 100 mg/ml、0.4 cc のキシラジン注射用 20 mg/ml、16 cc 滅菌生理食塩水 (0.9 %nacl)、滅菌栓 20 ml 瓶と麻酔のラベル
   。
   2. キシラジンにケタミンの 9:1 の溶液を作り、ボトルにケタミン ・ キシラジンを追加します
   。
   3. 生理食塩水にケタミン ・ キシラジン 9:1 の 1:4 の混合物に終って、ボトルに生理食塩水を追加します
   。
6. ケタミン ・ キシラジン マウス ミックスの誘導
   1. ケタミン ・ キシラジン マウス ミックスは、吸入麻酔と組み合わせても使用可能性があります
   。
   2. ケタミン ・ キシラジン マウス ミックスは一般的に次の計算を使用して重量によるとマウスに与えられる: (BW x 10) - 50 マイクロリットル ケタミン ・ キシラジン与えられるマウス ミックスを =。これは、ひずみ・年齢・健康状態に異なります
   。
   3. 腹腔ケタミン ・ キシラジン マウス ミックスを指定できます
   。

3。麻酔評価

麻酔深度は様々 な刺激への応答をテストすることによって評価することができます。随意運動は、体の物理的な刺激からなります。麻酔深度の評価のために利用する物理的な方法の一覧については表 1 を参照してください

テーブル 1。麻酔の深さを評価する物理的な刺激方法。²

心拍数、呼吸数、血圧、粘膜の色や毛細血管再充満時間など生理学的指標を使用もする必要があります。一般的な観察は、動物の呼吸数の変化を検出することができます、心拍数や血圧の深さの評価を活用する特殊な機器が必要です。心電計を使用できる場合は、速度と心拍動の強度が測定できます。血圧を測定するためさまざまな尾や体全体にも十分整ったデバイスがあります。物理的な刺激の表 1 に記載されて、これらのパラメーターのすべての 3 つの増加を引き起こすが

粘膜、目、耳、口、鼻、肛門の色と -送料変更の程度、前足と尾を観察。領域はピンク、十分な呼吸や心機能を示すべきであります。ステージ IV 麻酔に移動する動物、呼吸が停止すると、その結果でチアノーゼ - で示される青やグレー色-粘膜と周囲の皮膚

キャピラリー詰替時刻が後それは区域上の圧力の適用によって湯通しが外部の毛管ベッドに戻る色にかかる時間の量として定義されています。歯茎、耳介、または麻酔下の動物の爪床にアプリケータ棒や指が押される。ピンク色に戻ります湯通しのエリアにかかる秒数以上をしないでください。1-2 秒。拡張詰替時死の近くの動物をあまりにも深く麻酔可能性がありますを示す心臓収縮の心拍数や強度の減少を示唆している

麻酔の深さを評価するためにいくつかの異なるパラメーターを利用することが重要です。地域、鈍感、同じつま先または繰り返しのつまみのための耳を使用して、応答が抑圧され、麻酔深度の正確な評価を与えていません。つま先と耳ピンチの評価、代替サイトを使用します。麻酔の深度は手術中の 10-30 分ごとに再評価されるべき。²

研究は、麻酔下の動物の呼吸循環の変化があることを示しています。麻酔注射薬、動物が発生する安定した呼吸;しかし、彼らは、心拍出量の変動を示しています。注射麻酔薬への応答が異なる系統間大きく変化する報告されている、従ってそれは投与量を標準化することは困難です。⁷ 吸入剤は、呼吸数の減少が心血管系にあまり影響する傾向があります。プロシージャの全期間にわたって吸入麻酔の投与量を簡単に調整、それはしばしば推奨される方法です

麻酔の導入と維持は、あらゆる形態の外科的処置を受ける実験動物の獣医学的ケアの不可欠な要素を形成します。麻酔の目標は、動物を適切に固定し、すべての痛みの感覚を軽減することです。導入に加えて、手順全体で正しい麻酔の深さを安全に維持するために、正確で継続的なモニタリングが必要です。

このビデオでは、最初にげっ歯類の麻酔のレベルと、達成を目指すべきステージについて簡単に説明します。次に、さまざまな導入方法とメンテナンス方法、動物が常に目的の麻酔段階にあることを確認するためのさまざまな方法、そして最後に、さまざまな目的でさまざまな麻酔薬を使用するいくつかの実際の実験を確認します。

まず、レベルについて説明します。麻酔には4つの段階があり、第3段階または手術段階には4つの平面があります。

ステージ1では、動物は見当識障害になります。ステージ2は、不規則な呼吸数と立ち直反射の喪失によって特徴付けられます。ステージ3の平面1では、眼瞼反射と嚥下反射はありません。飛行機2では、喉頭反射と角膜反射が失われます。この時点まで、麻酔薬は健忘症や鎮痛を誘発していません。

記憶喪失と鎮痛が部分的から完全へと進行するのは第3面であり、動物は外科的処置のために完全に麻酔されます。平面3は、肋間筋の麻痺によっても示され、その結果、呼吸が浅い横隔膜呼吸になります。第4面では、動物は過剰摂取され、肋間筋と横隔膜の両方が完全に麻痺する第4段階に急速に進行し、呼吸停止を引き起こし、最終的には死に至る可能性があります。

麻酔薬は吸入剤または注射剤として利用可能であり、獣医師は実行する手順に何を使用するかを決定する必要があります。この選択は、処置の程度と期間、種と系統、年齢、動物の生理学的状態など、多くの側面に基づいています。

一般的に使用される吸入麻酔薬のクラスには、イソフルラン、セボフルラン、デスフルランなどの化合物が含まれます。これらの化合物は、麻酔の深さの容易な制御を可能にする。吸入麻酔薬を投与するために選択できる機器にはいくつかのオプションがあります。

選択肢の1つはベルジャーで、ベンチの上ではなくボンネットの下で使用することで、人員が麻酔ガスにさらされるのを避ける必要があります。セラミックまたはプラスチックの穴あきプラットフォームでジャーを組み立て、ジャーの底とプラットフォームの間にスペースを作ります。次に、不浸透性の手袋を着用しながら、綿球を麻酔薬で飽和させ、プラットフォームの下に置き、瓶の底に載るようにします。その後、麻酔薬の蒸気が逃げるのを防ぐために、すぐに蓋を固定します。動物を置くには、蓋を片側にスライドさせ、動物を紹介してすぐに固定します。その後、活動と呼吸を観察して麻酔の深さを決定し、動物を吸入剤にさらして効果を発揮します。プラットフォームはバリアとして機能し、動物が液体麻酔薬と直接接触するのを防ぐことに注意してください。

ベルジャーに代わるものとして、酸素タンクに接続された精密気化器マシンと組み合わせて使用される誘導チャンバーがあります。最初のステップは、気化器に適切な量の液体麻酔薬が充填されていることを確認することです。次に、廃ガス掃気システムを確認します。一般的に使用されるパッシブシステムの場合は、キャニスターの重量を量って、まだ有効かどうかを判断します。一般に、開始重量より50グラム増加することが、キャニスターが費やされるポイントです。次のステップは、誘導チャンバーを組み立てることです。入力が気化器からのものであり、出力が廃ガス掃気システムにあることを確認します。

まず、動物を誘導チャンバーに入れ、蓋を固定します。動物がチャンバーに入ったら、まず1分あたり1リットルの速度で酸素の流れを開始し、次に精密気化器の設定をイソフルランの3〜4%の誘導レベルに調整します。ベルジャーのように、動物を麻酔薬にさらして効果を発揮します。動物が完全に麻酔されたら、動物を静かに取り除く前に、イソフルランをオフにしてチャンバーを酸素で洗い流します。.これは、人員が麻酔ガスにさらされるのを防ぐためです。

麻酔導入の別の方法は、精密気化器に接続されたノーズコーンまたはフェイスマスクを使用することです。しかし、麻酔ガスは不快な臭いがするため、動物は誘導のためにマスクされることに反対するかもしれません。また、しっかりと握りすぎたために窒息するリスクもあります。したがって、好ましい方法は、誘導ボックスまたはベルジャーを使用して麻酔を誘発し、続いてノーズコーンによるメンテナンスを行うことです。多くの場合、コーンと誘導チャンバーの両方が同じ気化器に接続され、その間にトグルが入り、麻酔薬の蒸気供給が誘導チャンバーからノーズコーンに、またはその逆に切り替えるようなものです。チャンバー内で動物に麻酔をかけた後、顔をコーンに固定し、チューブのトグルを切り替えてガスの流れをノーズコーンにリダイレクトします。呼吸を監視し、動物がリラックスしていることを確認した後、麻酔薬を0.5〜1.5%の維持レベルに下げます。また、角膜の乾燥を防ぐために、眼科用軟膏を目に塗ります。

注射麻酔薬の場合、ケタミンと他の鎮静剤またはキシラジンおよび/またはアセプロマジンを含む筋弛緩薬の混合物。これらの化合物を使用して、さまざまな組み合わせを調製できます。一般的に使用される比率については、以下のテキストを参照してください。ケタミンは規制物質であるため、使用量は規制薬物ログに記載する必要があり、混合物には個別の規制薬物ログがある必要があることに注意してください。動物の種類、年齢、健康状態に応じて、麻酔薬の混合物と用量を選択し、溶液を腹腔内または筋肉内に注射することができます。通常、注射麻酔薬と吸入麻酔薬を組み合わせて使用して外科的麻酔を行います。

麻酔の引き込み方がわかったところで、手術中に動物が傷つけられていないことを確認するために10〜30分ごとに監視することが重要な麻酔深度評価について学びましょう。げっ歯類でこれを行うにはいくつかの方法があります。

一般的に使用される方法は、つま先をつまむことです。動物の足を伸ばし、つま先の間にウェビングを分離します。次に、爪または非外傷性鉗子を使用してその領域をしっかりとつまみます。陽性反射は、脚の収縮または足の撤回によって示されます。別の方法は、尾の先端で行われる尾のピンチです。ポジティブな反応は、けいれんや尻尾の動きによって示されます。また、耳介の先端をつまむこともできます、そして、頭の揺れやひげの前方への動きがある場合、動物は麻酔の手術面にいません。

麻酔の深さを確認するために、眼瞼の内側の角または目頭に触れて、まぶたに触れるとまばたきで示される眼瞼反射を引き出すこともできます。まぶた、ひげの動き、または呼吸の著しい増加があっても、動物は麻酔の手術面にいません。

最後に、手袋をはめた指または綿の先端のアプリケーターで角膜に触れることで、角膜反射を確認できます。肯定的な応答は点滅で示されます。

麻酔薬の深さを評価するために、サイト間を交互に行うことが重要です。同じつま先や耳を繰り返しつま先を使用すると、その領域が鈍感になり、反応が抑制され、麻酔の深さを正確に評価できなくなります。

これらの物理的刺激による評価方法に加えて、心拍数、呼吸数、血圧、粘膜の色、毛細血管の補充時間などの生理学的指標も監視する必要があります。一般的な観察は呼吸数の変化を検出するのに役立ちますが、心拍数を深度評価に利用するには、心電計などの特殊な機器を使用できます。血圧を測定するために、尾部や全身に装着できるさまざまなデバイスがあります。粘膜、目、耳、口、鼻、肛門、足、尾の色も麻酔の深さを示している可能性があります。これらの領域はピンク色で、適切な呼吸と心拍数を示唆しています。

毛細血管の補充時間を確認するには、麻酔をかけた動物の耳介を押し、湯通しした領域がピンク色に戻るのにかかる時間を秒数カウントします。これは 1 秒から 2 秒以内にする必要があります。補充時間が長いと、心拍数の低下や心臓の収縮の強さが減少し、動物が過度に麻酔され、死にかけている可能性があることを示しています。動物を麻酔から外した後、飼育エリアで継続的に監視されていない限り、麻酔から回復するまで飼育施設に戻さないでください。

げっ歯類の麻酔導入と維持の原理と手順を学んだので、今日の生物医学研究における麻酔薬の頻繁な適用のいくつかを見てみましょう。

おそらく、げっ歯類の麻酔の最も一般的な使用は、手術前と手術中です。たとえば、ここで研究者は、脳内の血栓形成によって引き起こされる脳卒中のモデルを開発したいと考えていました。それを達成するために、彼らはマウスに麻酔を誘発し、次に頭蓋骨をドリルで開けて細い窓を作りました。そして、動物がまだ鎮静剤を投与されている間に、これらの科学者たちは感光性染料を循環器に注入しました。次に、彼らは穿孔された頭蓋骨を通してレーザーの助けを借りて光活性化を誘発し、頭蓋血管系に血栓の形成を引き起こしました。

げっ歯類の麻酔が必要な別の例は、生理学的分析を行うことです。たとえば、科学者は、心臓の活動を監視するために、麻酔をかけた動物にECG電極を使用することがよくあります。または、超音波プローブを使用して横隔膜の動き速度を決定し、呼吸数をより正確に定量化します。

最後に、子宮内での生存実験を行う際には、麻酔の使用が必須です。例えば、子宮内エレクトロポレーション(妊娠中の女性に麻酔をかけ、切開して発生中の胚を露出させ、電極を使用して注入された遺伝物質の胚細胞への取り込みを誘導する方法)があります。

JoVEの麻酔管理とメンテナンスに関するビデオをご覧になりました。げっ歯類麻酔は、このような幅広い生物学的実験の実行を容易にするため、すべての科学者が実験全体を通して正しい麻酔の深さを誘導し維持するスキルを持っていることが不可欠です。いつものように、ご覧いただきありがとうございます!