Why is sterile tissue harvest important in laboratory animal research?

Sterile tissue harvest prevents contamination of cells and organs collected from research animals, which is essential for cell and tissue cultures, protein and RNA analysis, and metabolic profiling. Using harvested tissues for in vitro experiments reduces overall animal usage in research, supporting the replacement principle of the 3 R's framework for humane research practices.

What equipment and preparation are needed before starting a sterile tissue harvest?

The procedure requires a laminar flow hood running for at least 15 minutes before use. Disinfect the hood with 70% alcohol and place wet paper towels inside. Arrange sterile instruments in order of use from left to right to maintain unidirectional workflow. The sterile technician must wear a sterile gown and two pairs of sterile surgical gloves covering the wrists to prevent skin cell contamination.

How are abdominal organs like the liver and spleen removed during sterile harvest?

For the spleen, position the animal in right lateral recumbency and cut directly over the organ, gently retracting it while avoiding punctures. For the liver, place the animal in dorsal recumbency, reflect it away from the diaphragm, and carefully sever membranes and blood vessels. The liver is fragile and easily punctured, so handle it carefully to prevent excessive blood release that could compromise tissue quality.

What is the proper technique for harvesting the heart and lungs together?

Place the animal in dorsal recumbency and open the thoracic cavity by cutting through the abdominal muscle and diaphragm. Puncture the diaphragm at the lateral rib cage and extend cuts to the sternum. Grasp the trachea with forceps and sever it with scissors, then lift and remove lung attachments from the spinal surface until the heart and lungs can be lifted free from the chest cavity.

How is the brain harvested using aseptic technique?

Strip the skin from the body and over the skull, then saturate with alcohol and remove outer gloves. Make a cut along the midline from the cervical area to the nose. Using dedicated sterile scissors, cut through the spine at the skull base and along the midline through the foramen magnum. Lever the parietal bones away, disrupt nerve attachments with a spatula, and break olfactory bulb attachments with forceps before dropping the brain into sterile media.

What research applications use sterile tissue harvest techniques?

Neural stem researchers extract tissue from mouse neonatal brains to study stem cell development and cancer progression in vitro. Metabolic profiling studies analyze tissue metabolites using nuclear magnetic resonance spectroscopy. Immunologists harvest lungs aseptically to measure bacterial load in infection models, collecting samples at multiple time points to track disease progression.

What roles do sterile and non-sterile technicians play during tissue harvest?

Both technicians wear masks and bouffants. The non-sterile technician euthanizes the animal, places the carcass on paper towels, soaks it with 70% alcohol, and opens sterile instrument packages without touching inner surfaces. The sterile technician wears a sterile gown and two pairs of gloves, removes instruments aseptically, and performs the actual organ extraction to maintain sterility throughout the procedure.

滅菌のティッシュの収穫

0 閲覧数12:29 分

1. 準備

一般的な材料は、ホヤの瓶、滅菌 20-25 g 針、アイリスのはさみと親指鉗子 (皮膚に 1 つ) と内部の組織の 1 つ、ペーパータオル、生殖不能の外科医の手袋、滅菌ペトリネットの滅菌器具の 2 つのパックで 70% アルコールを含む料理、生殖不能媒体と滅菌生理食塩水。
フードのファンは、手続きの前に、少なくとも 15 分間実行する必要がある、それは 70% アルコールで消毒する必要があります。
フードには紫外線殺菌ランプが装備されている場合は、さらに作業面の消毒に使えます。
フードのセットアップのきれいな手袋が着用されます。機器は、彼らが使用する、通常左から右への順序でフードに読み込まれます。きれいな項目を汚染からダーティな項目を防ぐ方向ワークフローで実施する作業が可能になります。これは、動物の死体からの偶発的な汚染から収穫された組織や臓器を保護します。
パッケージの生殖不能の内部を尊重する滅菌器パックが開かれます。無菌性を維持、パックをテーブルのセンターに配置、各フラップは滅菌フィールドまたはパックの内側に交差することがなく開かれます。非滅菌の人は、彼/彼女のそれを離れて反射によって最初の上部フラップを開きます。各フラップの両方の手の 1 つを使用して側フラップを開きます、-パックからそれらを引っ張る。最終的なフラップは、パックの内側のサーフェスのいずれかに触れることを避けるために世話、パックを開く人に向かって引っ張られます。
ボンネットにペーパータオルを置き、アルコールとそれらをウェットします。
非滅菌の人が動物を安楽死させます。
不妊の人は、滅菌手術用手袋の 2 つのセットを着ています。
非滅菌の人はペーパータオルに死体を配置し、70% アルコールで死体を完全に浸します。
滅菌はさみと鉗子のセットを使用して、(男性) の包皮や (女性) で骨盤の骨にちょうど前方皮膚の水平カットを作る。腹部の筋肉を切断を避けます。
楽器置いておきます。

2. 組織の収穫

女性と男性の包皮の上に骨盤にちょうど前方の小さなカットを作る。
カットの下で親指を置き、カットの頭蓋の端を把握します。もう一方の手を使用して、安全に後肢を保持、尾の頭に向かって皮膚を引っ張りながら。
皮膚は後肢のすぐ上の体から引き離すだろうし、頭や前足にインサイドアウトになることが。これは効果的に器官の収穫時期に髪の汚染物質を削除します。
70% アルコールで再び体を浸すし、滅菌は、もはや手袋の表面的なペアを削除します。
滅菌器具を使用して腹腔内を開きます。
1. 脾臓
  1. 脾臓を収穫、体は右横ずれの臥床に配置されます。
  2. 脾臓は腹部の筋肉を視覚化できます。
  3. はさみカットは、脾臓の上に直接行われます。
  4. 脾臓は優しく体腔から取り消されます。
  5. 脾臓、胃、膵組織のすべての添付ファイルをカットするときは、穿刺または器官を引き裂くことを避けてください。
2. 肝臓
  1. その他の腹部の臓器を収穫、体は背臥位に。
  2. 腹部の筋肉を持ち上げて切り取る、腹腔内に直接開く楕円形を残してします。
  3. 腹腔内を公開した後横隔膜から尾側の肝臓を反映します。
  4. 横隔膜に肝臓をアタッチする任意の膜を慎重に断ちます。
  5. カットをする血管を通って背骨に垂直な肝臓と横隔膜の間表示されます。
  6. 肝臓を持ち上げ、その下にある添付ファイルを視覚化するダイヤフラムへ反映します。
  7. 胃と小腸は、中断する必要がありますに小さい肝葉をアタッチする薄い膜があります。
  8. その下側の肝臓の中心部に線維性のノードをつかんで、すべての添付ファイルを見つけるための器官。基になる臓器や組織から肝臓を分離します。
  9. 肝臓は壊れやすいと簡単にパンクすることができます血液の解放に終ってことを注意してください。したがって、それは注意深く扱われなければなりません。
3. 腎臓
  1. 右腎を視覚化する左または左の腎臓を視覚化する右腹腔内を公開した後、腸をプッシュします。
  2. 腎臓を削除するには、体から臓器を分離する腎臓の下に把握する鉗子ブレードを使用します。体から腎臓をカットはさみやメス刃を使用します。腎臓の損傷を避けるために鉗子でカットをします。
  3. 腎臓を削除すると、任意の脂肪は臓器からトリミングことができます。
4. 卵巣
  1. 腹腔内を公開した後、子宮を視覚化するため頭側腸に移動します。
  2. 左し、右の卵巣に子宮角に従ってください。
  3. 卵巣が小さいです。古い動物の彼らは脂肪に埋め込まれる可能性があります。
  4. 体からそれを分離するために卵巣の下で鉗子をスライドさせ、脂肪と卵管から無料でカットします。
5. 精巣
  1. 腹腔内を開いたら、優しく鼠径の脂肪パッドを持ち、前方引き出します。
  2. これは陰嚢から精巣を引っ張ってくる。
  3. 精巣を露出すると、一度は、陰嚢や体から輸精管に添付ファイルをカットします。
  4. これは、それぞれの精巣。
胸腔内の開いた胸部臓器を削除するには
1. 体は背臥位に。胸腔臓器を収穫する場合皮膚が頭の上にも反映されるが不可欠です。
2. 剣状突起と肋骨にちょうど尾側腹部の筋肉のカットを許可するリフトを把握します。両側に胸郭の下のカーブに沿ったカットを拡張します。横隔膜の可視化できるようになります。
3. 胸郭のそれぞれの側に可能な限り最も外側の点をカット小することによって横隔膜を穿刺します。肋骨からダイヤフラムをカットします。
4. 胸部の臓器を視覚化する剣状の肋骨を持ち上げます。
5. 両側、胸骨の上部に横方向のカットを拡張し、胸を開きます。
6. 心臓と肺は最も簡単に一緒に削除されます。
  1. 鉗子を気管に垂直に置き、気管をしっかりと把握します。
  2. はさみを使って気管鉗子にちょうど前方に垂直カットをします。このカットは、気管と食道を断つ必要があります。
  3. 気管のグリップをゆるめることがなく立ち上がって尾側気管を持ち上げます。

胸郭の脊髄の表面に肺のすべての添付ファイルを以下略します。

食道は、心臓と肺が胸腔の無料を持ち上げることができるにカットする必要があります。

心だけ

心臓を持ち上げ、心膜嚢を慎重にカットします。
大動脈は、動物の左側中心の頭蓋の側面です。
大動脈を鉗子で保持、カットをする遠位大動脈, 心臓のホールドを保持鉗子に。
前方の上大静脈、肺動脈と静脈を断つと大動脈を把握します。
大動脈の動脈によって胸腔内の無料の心を持ち上げます。

その他の胸部臓器

楽器の無菌性を維持するために次の順序で収穫している臓器: 胸腺, リンパ節, 食道。

脳

特殊な状況で脳は無菌培養のために収穫する必要があります。
他の器官の収穫後、脳は最後に収穫されます。
脳が収集する唯一の臓器の場合、皮膚が、体からは削除できませんが、カットの首のうなじで作られ、正中線に沿って背側頸部から鼻の先端に延長の代わりに。
頭蓋骨から皮膚を横に引っ張って後、露出骨が 70% アルコールに浸した、汚れた手袋が削除されます。
専用滅菌脳収穫はさみのペアを使用して、頭蓋骨のベースで背骨をカットします。
後頭にはさみのポイントを配置し、正中線に沿って切断して頭蓋骨を開きます。
脳から頭頂骨をレバーにシザーの刃の平らな終わりを使用します。
慎重に脳幹部と親指鉗子の終了ポイントを使用して、脳の下にある視交叉神経の添付ファイルが中断されます。
同様に、脳の前方下に鉗子閉鎖をスライドさせ、嗅球で添付ファイルを分割します。
脳は、生殖不能媒体に頭蓋骨からドロップすることができます。
脳を収穫すると 1 つの手、みなされます非滅菌頭蓋骨をカットしながら、頭を安定させるためにあごの下に反映される頭骨および削除脳から皮膚にチャッキングします。

肌

乳腺組織
1. 乳腺組織は、胸骨柄、胸骨の上から腹側表面に生殖器の開口部に発見され、ほぼ腰と肩に背側表面に触れて、両側を横方向に拡張します。
2. 大衆、変色や異常を探す乳腺組織を調べます。授乳中、または妊娠中の女性は、乳腺組織のボリュームを増加しているでしょうし、ミルクがあります。
3. 乳腺の切除では、親指の鉗子で腺の端をつかみ、皮膚に添付ファイルを緩めるに鈍的切離を使用してを必要があります。腺は、皮膚から分離されている、一度アイリスはさみは残り添付ファイルをカットに使用できます。
4. 70% アルコールで表面を浸漬し、滅菌器具の新しいセットを使用して組織の収穫を開始します。
5. 収穫された組織は、培地のそれを配置する前に滅菌生理食塩水で洗浄です。
皮下腫瘍
1. 多くの場合、腫瘍細胞を動物に注入され繰り返しと、結果の腫瘍は腫瘍細胞株を維持するために収穫されます。
2. 皮下腫瘍の無菌組織収穫が皮膚の完全性の侵害の前に実行することが不可欠です。
3. 質量がすり減りや壊死、収集組織は質の良いされず、滅菌できない場合があります。
4. 体は、関心のある領域を公開する配置されます。皮膚は、腫瘍の 1 つの側面に沿って切断されます。
5. 慎重に腫瘍を公開するスキンが反映されます。側に皮膚の楽器を置き、70% アルコールで露出した組織を吸収します。
6. 新しい滅菌器具、基になる添付ファイルから質量を解剖し、血管の固まりを断ちます。
7. 腫瘍は培養液中に配置されます。

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ソース: ケイ・スチュワート、RLATG、RVT CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

1959 年に、3 R の W.M.S. ラッセルと r. l. トリーバーチによって彼らの本で導入された人道的な実験技術の原則です。3 R の交換、削…