ソース: ロバート ・ m ・ Rioux ・ Suprita Jharimune、ペンシルバニアの州立大学、大学公園、PA
地球の重力は異種混合物を分離することが可能です。ただし、多くのシステムは、通常このような場合に必要な時間の長さのための分離のこのタイプを避けるため。遠心分離は、異種混合物 1…
1 です安全なの遠心分離機の使用のための一般的なプロトコル
2。追加の注意事項、処理有害物質や感染性物質
3。緊急時の状況とその安全対策
ローターが誤動作している場合、またはチューブ破損または誤って取り扱うことにより遠心分離機で流出がある場合、緊急事態が生じることがあります。このような状況では、次の手順を実行する必要があります
。4。 遠心分離機メンテナンス
注: 遠心分離機の体は通常湿気、薬品や強い洗浄剤の存在下で腐食することができる金属から作られて。遠心分離機の適切なメンテナンスは、メーカーを慎重に従う勧め ' クリーニングやメンテナンスのための指示。以外は、留めておかれるまでメンテナンスのため、いくつかの一般的な措置は次のようにします
。遠心分離は、不均一な混合物を分離するためにラボで使用される最も強力なツールの1つですが、危険な場合があるため、安全対策を適用する必要があります。
遠心分離機は、サンプルを急速に回転させて不均一な材料を分離するため、サンプルと装置に極端な遠心力が加わります。遠心分離機は高速で動作するため、取り扱いを誤るとユーザーに重傷を負わせる可能性があります。したがって、遠心分離機を使用するときは、こぼれたり機器が損傷したりしないように特別な注意を払う必要があります。
このビデオでは、遠心分離機のメカニズムと、遠心分離機を安全に操作および保守する方法を説明します。
安全対策の詳細に入る前に、遠心分離の基本を簡単におさらいしておきましょう。遠心分離機には、スピンドルに収納されたローターが含まれています。通常、異なるサイズのローターを1つのスピンドルに取り付けて、さまざまなサンプルボトル、チューブ、またはバッグを収容できます。モーターは、指定されたRPMまたは毎分回転数でローターを回転させます。これにより、回転軸から離れる方向に向けられた不均一な混合物に遠心力が与えられ、密度の異なる粒子が分離されます。
低速遠心分離機は10,000 RPM未満、高速は最大21,000 RPMで、超遠心分離機は30,000RPM以上で動作します。各タイプには、互換性のあるローターが異なります。走行後、通常、ブレーキシステムがローターを減速させます。どの遠心分離機でも、ローターは高速で変形します。
通常の使用では、以前のサイズに戻ります。ただし、回転による力がローターが処理できる最大力を超えると、ローターが永久に変形する可能性があります。これにより、亀裂が発生し、深刻な故障につながる可能性があります。一方、遠心分離機の故障はサンプルの漏れにつながる可能性があり、危険物が関与している場合は危険であり、取り扱いには注意が必要です。次に、サンプルを調製し、遠心分離機で安全に使用する方法をご紹介します。
まず、使用したい回転速度に対応した適切な遠心分離管を選択します。チューブの制限については、ドキュメントを確認してください。チューブは無傷で、亀裂が入っていない必要があります。こぼれないように、それぞれを3/4以下でいっぱいにします。次に、チューブのバランスが取れていることを確認し、しっかりとキャップします。
危険な化学サンプルまたは生物学的サンプルを遠心分離する場合は、特別な注意を払ってください。適切な保護具を着用し、ドラフトや層流キャビネットなどの適切な作業環境でサンプルを調製します。これらの安全機能の詳細については、JoVEのヒュームフードに関するビデオをご覧ください。
必要に応じて、ガラスやプラスチックのインサートなど、危険物用の二次封じ込めを使用します。密閉された安全チューブを使用して、封じ込められた環境を提供することもできます。遠心分離機やローターを使用する前に、全員がトレーニングを受ける必要があります。
遠心分離機に適したローターを選択します。ローターとそのカバーが清潔で乾燥しており、ひび割れや変形がないことを確認してください。ローターまたはカバーのOリングが摩耗していないことを特に確認してください。また、遠心分離機のスピンドルをチェックして、曲がっているか、その他の変形がないか確認してください。次に、ローターをスピンドルに置き、正しく取り付けられていることを確認します。サンプルをローターに挿入し、チューブがローターにぴったりと収まることを確認します。
常にバランスの取れたチューブを互いに反対側に置きます。ローターを覆い、シールがしっかりと締まっていることを確認します。遠心分離機の蓋を閉じて、プログラムを開始します。繰り返しになりますが、遠心分離プログラムの実行の詳細については、JoVEの以前の遠心分離ビデオを参照してください。
遠心分離機が最高速度に達するまで、遠心分離機にとどまります。電源ボタンの位置をよく理解してください。異常な音や振動がある場合は、電源ボタンをオフにして、遠心分離機をすぐに停止してください。次に、ローターが停止するまですぐのエリアから避難させます。停止したら、サンプルにこぼれがないか、ローターに異常や不均衡がないか検査します。問題がなければ、遠心分離機がプログラムを完了して完全に停止するまで待ちます。
エアロゾル形成化学物質が存在する場合は、さらに30分待ちます。それ以外の場合は、すぐに
遠心分離機を開くことができます。サンプルを取り出し、必要に応じて専用のエリアに持ち帰り、開きます。万が一、こぼれた場合は、すぐに遠心分離機を片付けてください。存在する危険に対して適切なPPEを使用し、ガイドラインに従って汚染された物質を廃棄してください。研磨剤入りのブラシワイヤーはローターを損傷する可能性があるため、清掃に使用しないでください。救急隊員に警告し、生命を脅かす危険がこぼれた場合は遠心分離機を清掃しようとしないでください。?
遠心分離機で使用される生物学的サンプルの10%漂白剤でローターを除染します。漂白剤を30分間放置してから、70%エタノールをすすぎ、風乾します。最後に、ローターを取り外して損傷がないか検査し、ログブックに使用を書き留めます。
JoVEの「Introduction Into Centrifuge Use」をご覧になりました。これで、サンプルの準備方法と、機器の操作方法とメンテナンス方法を理解できるはずです。
ご覧いただきありがとうございます。
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Q1: What is the basic mechanism of how a centrifuge separates mixtures?
A centrifuge rapidly spins a rotor containing samples, generating centrifugal force directed away from the axis of rotation. This force causes particles with different densities to separate, with heavier particles moving toward the bottom of the tube. The separation speed depends on particle size and density, making centrifugation much faster than gravity-based sedimentation.
Q2: How should centrifuge tubes be prepared before use?
Select tubes compatible with your centrifuge's maximum RPM and verify limits in the documentation. Inspect tubes for cracks or damage and ensure they are intact. Fill each tube to no more than three-quarters full to prevent spills, then balance tubes and cap them tightly before placing them in the rotor.
Q3: What precautions are necessary when centrifuging hazardous materials?
Wear appropriate personal protective equipment and prepare samples in a fume hood or laminar flow cabinet. Use secondary containment such as glass or plastic inserts for hazardous chemicals or biological samples. Sealed safety tubes provide an additional contained environment. Always ensure proper use of personal protective equipment when handling potentially dangerous materials.
Q4: What rotor inspection steps should be completed before centrifugation?
Verify the rotor is appropriate for your centrifuge and check that it and its cover are clean, dry, and free of cracks or deformities. Inspect O-rings for wear and examine the centrifuge spindle for bending or damage. Ensure the rotor is correctly seated on the spindle and that sample tubes fit snugly without gaps.
Q5: What should you do if unusual sounds or vibrations occur during centrifugation?
Immediately turn off the power button to stop the centrifuge. Evacuate the immediate area and allow the rotor to stop completely before approaching. Inspect samples for spillage and the rotor for abnormalities or imbalances. Do not attempt to restart until the cause is identified and resolved.
Q6: How should a centrifuge be decontaminated after use with biological samples?
Decontaminate the rotor with 10% bleach regardless of whether a spill occurred. Allow the bleach to stand for 30 minutes, then rinse with 70% ethanol and air dry completely. After decontamination, remove and inspect the rotor for damage and document your use in the logbook.
Q7: What is the proper procedure for cleaning up a centrifuge spill?
Clean the centrifuge immediately using appropriate personal protective equipment for any hazards present. Dispose of contaminated materials according to guidelines. Do not use abrasive brush wires, as they damage the rotor. For life-threatening hazards, alert emergency personnel and do not attempt cleanup yourself.