6.10: オートクレーブの適切な使用

1。 着用適切な個人保護装置 (PPE)

高圧および温度条件のオートクレーブ滅菌中に発生した潜在的な熱燃焼または爆発上のリスクをもたらします。適切な PPE を含む閉鎖つま先の靴、耐熱手袋、安全メガネ研究室コートこれらは、オートクレーブから材料を出し入れするときに着用する必要があります。液体試料を扱う場合、着用追加 PPE は、エプロンと顔シールド

2 します読み込まれる材料の準備

1. オートクレーブ対応材料の識別とオートクレーブ互換性のない材料
   オートクレーブを表しますが一般的に使用される、経済すべて除染法。材料は、オートクレーブ高圧と温度労働条件のために適しています。一般に、蒸発または高圧蒸気の下で溶融するすべての材料は、オートクレーブと互換性がないです。これは、有機溶媒、ポリスチレン、ポリエチレン、ステンレス鋼を除く金属など耐熱性の悪いプラスチックのような材料が含まれています。決してオートクレーブ可燃性、腐食性、毒性、反応性、または放射性化学物質。オートクレーブ対応材料パイレックスを含めるまたはホウケイ酸ガラス、ポリプロピレン、ポリカーボネート、手袋、ステンレス鋼、ピペット チップ、紙 (オートクレーブ バッグの中に入れた)、およびメディア ソリューション型します
。
2. 包装材
   オートクレーブ対応材料を特定した後適切な包装も重要ですこれにより、安全性と効率的なオートクレーブに入れること。ここでは基本的な原則、包装材料:
   1. ポリプロピレン ・ ステンレス鋼セカンダリ コンテナーを常に使用します
   。
   2. 液体試料の ½ フル周りバイアルを満たしキャップ緩めたり通気式クロージャを使用します。2/3 以上完全にキャップが完全に締め容器を満たすことはできない
   。
   3. は、ひびがないかどうかを確認するガラス容器を検査します。亀裂が指定されている場合は、適切な容器にガラスの処分します。決して オートクレーブ知られているガラス容器
   。
   4. は、常にパッケージ廃棄物にオートクレーブ互換袋を使用します。袋表示テープを持つべきで、両端に袋の中の蒸気を許可するようにロードする前に開く必要があります
   。
   5. は決して袋をオーバー ロードまたは十分な許可されるようにコンテナー蒸気の完全な殺菌の流れ。項目間のスペースを残しています
   。
   6. ドン ' t ミックス互換性のない材料
   。
   7. ゴミ袋で決して場所の鋭い項目
   。

3。素材を読み込む

1. オートクレーブをチェック ' する s の内部確認がない以前のユーザーから潜在的な危険です
。
2. ドレインの良好な循環を許可する素材を読み込む前にお掃除します
。
3. バッグが溶融を避けるためにオートクレーブの内部の壁に触れないでいることを確認します
。
4. 液体と乾燥材料の別のサイクルを必要とする別にオートクレーブ養生する必要があります
。
5. ドアをしっかりと閉める
。

4。オートクレーブの操作

1. 訓練された人員だけによってオートクレーブを操作できます。操作プロトコルが異なるオートクレーブによって異なりますので、必要な場合は設備の説明書を参照してください
。
2. オートクレーブ ドアを必ずしっかりと閉じた後オートクレーブ温度を 121 ° C に設定し、少なくとも 15 の psi の圧力を維持します
。
3. オートクレーブ時間とサイクルを設定する次の要因を考慮しなければ:
   1. メーカーから装置の推奨 ' s マニュアルします
   。
   2. 内の読み込まれている材料の種類: 乾燥または液体
   。
   3. 素材の量が読み込まれます
   。
   4. 形状と使用されるコンテナーのサイズ
   。
   5. コンテナーおよび材料の導電率を熱します
   。
   6. 除染の目的します
   。

5。オートクレーブ材料のアンロード

1. 上記のように適切な PPE を着用します
。
2. 温度・ オートクレーブの圧力が安全な範囲に戻っていることを確認します
。
3. 慎重にドアの後ろに立って部屋にオートクレーブ内任意の残りの蒸気を解放への扉を開きます
。
4. 材料に蒸気や熱風をリリースする 10 分間立ってオートクレーブ内に閉じ込められた材料許可します
。
5. は、オートクレーブから除去しながら任意の液体材料を振るか。かどうか、必要に応じてラベルとして熱を避けるために熱い材料に燃える人は可能性がある材料では、オートクレーブ最近されている事実を認識できない場合があります
。
6. 材料研究室の内外で研究室を輸送する前に室温に冷却するを待ちます。両方のインスタンスを輸送するための適切な封じ込めを利用してください
。
7. ユーザーの材料とオートクレーブ滅菌条件の詳細を記録 ' s ログ

オートクレーブは、除染の目的で実験室で最も一般的に使用される方法の1つです。

多くの科学者、特に生物学的サンプルを扱う科学者は、滅菌された機器と培地を必要としており、オートクレーブは材料を迅速かつ経済的に除染する方法を提供します。彼らは微生物を殺すために高温高圧の蒸気を使用します。ただし、これらの極端な条件のため、慎重に使用する必要があります。

このビデオでは、オートクレーブがどのように機能し、どのように正しく使用するかを説明します。

オートクレーブでは、材料は蒸気で摂氏121度の温度に少なくとも15 p.s.iの圧力で加熱されます。少なくとも30分後、これらの条件は細胞を脱水して死滅させます。

オートクレーブは液体材料と固体材料の両方を滅菌できますが、異なる動作設定を考慮する必要があります。液体は、フラッシュボイルを防ぐために、蒸気を排出するのに固体よりも長い時間を必要とします。さらに、液体材料の量が多いほど、適切な温度まで加熱するのに時間がかかります。

すべての材料がオートクレーブ内の温度に耐えられるわけではありません。したがって、溶けるもの、燃えるもの、爆発するもの、または蒸発する液体は絶対にオートクレーブしないでください。また、有毒化学物質や放射性化学物質をオートクレーブしないでください。

それでは、オートクレーブのサンプルの作り方と操作方法をご紹介します。

まず、オートクレーブする材料を選択し、互換性のある容器と器具のみを使用します。パイレックス、ホウケイ酸ガラス、ステンレス鋼、ポリプロピレン、ポリカーボネートをオートクレーブに使用できます。

ピペットチップやボックスなどの他の一般的なラボ材料も互換性があります。紙はオートクレーブ対応の袋に入れてオートクレーブ滅菌できます。

固形廃棄物は、適切な袋に入れてオートクレーブすることもできます。このバッグには、蒸気が循環して端を結ぶためのスペースを残してください。最後に、オートクレーブする前に、蒸気が入るようにバッグに小さな開口部を必ず開けてください。

水性媒体およびその他の適合液体サンプルの場合は、亀裂のない無傷の容器を使用してください。容器を約半分に満たし、3分の2を超えないようにします。

液体容器からガスを換気するには、キャップを緩めます。キャップがない場合は、オートクレーブ材料の汚染を防ぐために、アルミホイルでゆるく覆います。

すべての材料をポリプロピレンまたはステンレス鋼製の二次容器に入れます。オートクレーブ滅菌する固体材料と液体材料を分離します。材料の間にはスペースを空け、コンテナをいっぱいにしすぎないようにしてください。

最後に、オートクレーブテープをすべての材料に貼り付けます。このテープには、十分な温度に達すると黒くなる温度感知インジケーターがあります。

オートクレーブを使用するときは、高温および高圧のリスクから保護するために、適切な個人用保護具を着用してください。これには、標準のPPE安全メガネ、白衣、つま先が閉じた靴、耐熱手袋が含まれます。液体サンプルを取り扱うときは、エプロンとフェイスシールドを使用してください。

オートクレーブでは、まずドアを開けて、内部に危険がないか確認します。液体材料と乾燥材料は、異なるオートクレーブサイクルを必要とするため、別々にロードします。

溶けないように、材料が壁に触れないように注意してください。材料間の十分な間隔を保つことにより、良好な熱の流れを確保します。最後に、ドアを閉めて密封します。

オートクレーブが異なれば、操作手順も異なります。サイクルは、温度と時間を手動で設定するか、プリセットリストから選択して設定できます。一般に、除染する材料の種類に推奨されるサイクルを使用してください。

固体と液体、およびオートクレーブ処理する材料と廃棄物の量には、さまざまなサイクルが存在します。サイクルを実行するときは、温度が摂氏121度以上に達し、圧力が少なくとも15 p.s.i.

サイクルが終了した後、圧力がゼロに戻り、オートクレーブが冷えたことを確認してください。ドアを慎重に開けて、残った蒸気を放出します。次に、材料を10分間放置して、高温のガスを放出します。オートクレーブテープには、黒い縞模様が入っているか、オートクレーブされているはずですが、これは滅菌が行われたことを保証するものではありません。

適切なPPEを着用し、液体サンプルを振らないように注意しながら材料を取り除きます。物質の種類や遭遇した場合の特別な状況など、ログに使用状況を書き留めます。最後に、材料を安全な場所または層流フードに運んで冷却します。

JoVEのオートクレーブの紹介をご覧になりました。これで、オートクレーブできる材料、それらをどのように調製するか、および装置を安全に使用する方法を理解できるはずです。ご覧いただきありがとうございます!