Name: 海馬ニューロンの遺伝子郡のトランスフェクション (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2006-11-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 44 s
Description: 学ぶ海馬ニューロンの遺伝子郡トランスフェクション法。クリーンスライサーステージを用いた脳組織分離とインキュベーションにより、海馬の正確な単離と遺伝子導入を実現します。神経科学研究の再現性向上に貢献します。

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海馬ニューロンの遺伝子郡のトランスフェクション

Gene-gun Transfection of Hippocampal Neurons

こんにちは、Kmaです。ブラウン大学のCase Labで研究しています。70% ethanolを用いてClean Slicerステージを洗浄します。プレートインサートを6つの穴に配置してください。培地を入れたウェルプレートを用意し、37°Cでインキュベートします。ピンセットを用いて、中脳と後脳の間から全脳を取り出します。片側の海馬を単離し、次にもう片側の海馬を単離します。単離した海馬をPBSの液滴上に置きます。PBSを吸引し、組織スライサーを用いて正中面切片を作成します。スライサーをペトリ皿に移し、PBSで洗浄する操作を繰り返します。PBSと培地を穏やかに加え、吸引することで切片を洗浄します。ピンセットで切片を分離します。切片をPBSおよび培地で洗浄します。再び切片をプレート上に移し、挿入します。ピンセットを用いて切片内の培地を吸引除去します。ジーンガン用ホースをヘリウムシリンダーに接続します。バレルをジーンガンに取り付けます。マガジンに粒子（ブレット）を充填します。マガジンをJing gunに挿入します。ヘリウムタンクの射出圧を調整します。セクションにEGFPコートビーズを射出します。それでは、次へ進みます。

gene-gun-transfection-of-hippocampal-neurons

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生物学

我々は、DNAコートした金の弾丸の製造方法を説明し、biolistically培養海馬スライスの神経細胞をトランスフェクトするためにそのような弾丸の使用方法を示しています。...

遺伝子銃の箇条書きとスライス培養における神経細胞の微粒子銃トランスフェクションの準備

オルガネラの人身売買のダイナミクスを研究するときに、ライブセルイメージングには特に有用です。ここでは、広視野蛍光顕微鏡を用いた培養神経細胞における高密度コア小胞のライブイメージングのためのプロトコルについて説明します。このプロトコルは柔軟性があり、画像その他のようなミトコンドリアなどのオルガネラ、エンドソーム、およびペルオキシソームに適合させることができます。...

初代培養海馬ニューロンにおける高密度コア小胞のライブイメージング

このプロトコルは、エレクトロポレーションと文化のマウス海馬および皮質のニューロンを経由してトランスフェクション、解剖するために必要な手順を説明します。長期培養がシナプスと樹状突起棘の解析の研究に使用することができますが、短期的な文化は、軸索伸長やガイダンスの研究に使用されることがあります。...

Nucleofectionとマウス胎児海馬および皮質ニューロンの初代培養

出典: Keener, D. G., et al.マウス海馬興奮性およびクラス特異的抑制性ニューロンの異なる器官型スライス培養にわたる単一細胞エレクトロポレーション。J. Vis.

マウス海馬スライス培養における単一細胞エレクトロポレーションによる遺伝子発現

出典: Denaxa, M., el al., Transplantation of Chemogenetically Engineered Cortical Interneuron Progenitors into Early Postnatal Mouse Brains.J. Vis. 経験。...

マウス皮質介在ニューロン前駆細胞におけるアガロース包埋エレクトロポレーション支援遺伝子導入

リン酸カルシウム沈殿法は、培養細胞のトランスフェクションのため便利で経済的な方法である。最適化により、一次ニューロンのような困難なトランスフェ細胞上で、この方法を使用することが可能である。ここでは、アストログリア細胞と共培養した海馬神経細胞のリン酸カルシウムトランスフェクションのための私達の詳細なプロトコルを記述します。...

初代海馬ニューロンのリン酸カルシウムトランスフェクション

器官型脳スライス調製物の最近の改善により、バイオテクノロジーへの応用が可能になりました。器官型スライスは、機能的なシナプス結合を含むin...

位置選択的微粒子銃は、改変された遺伝子銃を使用した器官型脳切片におけるターゲティング

提示し、培養するため変更されたロール チューブ法をここでは、フォトエッチング coverslips...

密閉システムで脳スライスの長期培養中に正確にローカライズされた、反復的な断続的なイメージングのため変更されたロール チューブ法

ここで提示される単細胞エレクトロポレーションのためのプロトコルは、体外海馬スライス培養年代の範囲にわたって興奮性および阻害性ニューロンの両方の遺伝子を送達することができる。このアプローチは、細胞自律機能や細胞間機能を調べるために使用できる個々の細胞内の遺伝子の正確かつ効率的な発現を提供します。...

マウス海馬興奮性およびクラス特異的阻害ニューロンの異なるorganotypics Slice培養における単細胞エレクトロポレーション

この手法は、人間の癌遺伝子をコードし、その後マウスモデルにおける骨髄増殖性疾患の誘発に使用される。複製欠損レトロウイルス株を準備する効率的な方法を示します...

293T細胞の一過性トランスフェクションにより、複製欠損レトロウイルスの生産

学ぶ海馬ニューロンの遺伝子郡トランスフェクション法。クリーンスライサーステージを用いた脳組織分離とインキュベーションにより、海馬の正確な単離と遺伝子導入を実現します。神経科学研究の再現性向上に貢献します。

海馬ニューロンの遺伝子郡のトランスフェクション

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