Name: 個別散在セルの優位を持つ細胞診標本からのセルブロックの準備 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-21T00:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 20 s
Description: 学ぶ Shidham法による細胞ブロック調製法。AVマーカーとHistoGelを用いて散在細胞を効率的に濃縮・包埋し、免疫組織化学染色と特殊染色の精度を向上させる病理診断技術です。

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著者らは、AVのマーカーでセルブロックの切断セクションを実証するためにクリスチャートランド、HT（ASCP）を感謝。

はじめに： これはHistoGelTM（サーモサイエンティフィック）（HG）を使用して液体ベースの細胞診（LBC）標本からのセルブロックの準備のためのShidhamの方法を説明するビデオです。他のランダムなアプローチと比較して、以下は単独で散在バラセル（1-5）と比較的hypocellular標本から細胞のブロックを製造するためのこのプロトコルの2つの重要な機能です。 <ol><li>このプロトコルは、セルのブロックの切断面に平行な平面に沿って細胞を濃縮するための手順が含まれます。 </li><li>また、以下の目的のうちの2つを提供するAV -マーカー（図1b）、のビーコンのようなダークインクルージョンが含まれています。 <ol style="list-style-type:lower-alpha;"><li>細胞が濃縮されるレベルを可視化へ。暗い色のビーコンが切削中にさらされているときに目的の細胞と細胞のブロックの面積は現在histotechnologistによって可視化することができます。監視するには、この能力は、細胞の大部分でレベルを切断、またはサンプルの細胞の最も高い濃度でのレベルにあまりにも表面的なカットではないのを妨げる。 </li><li>別のスライド上でシリアルセルブロックのセクションのロケータの基準点として機能する。この基準点は、SCIPのアプローチ（6,7）と座標の免疫反応性のパターンの評価のための細胞の特定の細胞またはグループを検索するためのビーコンとして機能します。 </li></ol></li></ol> PROTOCOL（図2） サンプルの調製。 <ol><li>平底ガラス管（直径15mmさx 45mm）（2.4〜図2.1）に残留LBC子宮頸部細胞診標本を転送する。大きなプラスチック製のキャリアのチューブ（28 × 85ミリメートル）と遠心分離機にガラス管を置きます。キャリアのチューブからガラス底のチューブを外し、上清を取り除き。 </li><li>ガラス管は、蓋を（次のステップで加熱水の流出を防止するため）と大きな平底のキャリアのプラスチックチューブの内側に戻される</li><li>ガラス管を含むキャリアのプラスチック製のチューブは、その後、ふたを遠心分離機に入れ（ 細胞がガラス管の平らな底に垂直に落ちるように旋回カップではなく、固定アングルカップ付き ）、および1805でG（3000 rpmをスピンしているローター半径- 17センチメートル）5分（図2.5）のため。 </li><li>試験管を遠心分離器から垂直に削除され、小さなガラス管は、細胞を沈殿ペレットを乱すことなく、より大きなキャリアのプラスチックチューブから鉗子で除去する。 </li><li>試験片とガラス管が非キャップされ、上清は下部の堆積物の細胞の平らな層（図2.6）を乱さないように注意しながらオフ注がれています。 </li></ol>基準座標AV -マーカーの包含およびゲルの追加<ol><li>暗いビーコンAV -マーカー （2 × 2mmの大きさについて、フラットは、暗い色、sectionable材料の断片を表面化）（図3）ガラス管（図2.7）への道標として追加されます。 </li><li>ミディアムパワーで10秒間電子レンジで溶かしてHGのアリコートを液化する。 </li><li> 、チューブに溶融HGの0.5 mlを加え素早く堆積物と混合し、（図2.8）、それを要約（HGが凝固を開始できるようにすることなく、迅速に次のステップに進みます）。 </li><li>キャリアのプラスチックチューブに温かい（45℃）水（図2.9）の約2.5 mlを追加します。 </li><li>小さなキャップガラス管は、暖かい水とプラスチック製のチューブ内に配置されます。 （この手順は、次のステップの間に固化するからHGを維持する必要がある）（図2.9）。 </li><li>キャリアのプラスチック製のチューブは、（ 細胞がガラス管の平らな底に垂直に落ちるように旋回カップと固定されていない角のカップ付き ）遠心分離機に入れ、と5のための1805 G（3000 rpmの、ローター半径- 17センチメートル）で回転さ分。この遠心分離のステップの目的は、AV -マーカーをプッシュすると近い最後のパラフィン包埋細胞のブロック（図1d）の切断面の層に細胞を集中することです。 </li><li>チューブを下部に、サンプルの細胞と沈殿した薄い層を乱さないように注意しながら遠心機から静かにして垂直に削除されます。 </li><li>大きなプラスチック製のチューブは非キャップされており、小さいガラス管は、試料の細胞の堆積層を乱すことなく、ピンセットで垂直に削除されます。 </li><li>小さなガラス管は、HG（図2.11）を冷却固化するために15分間垂直位置で冷凍です。 </li></ol>最終処理のための試料を用いてゲルのボタンなど、セルブロックの除去<ol><li>下部に集中/堆積物試料の層を持つ固化HGディスクは、注射器（図2.12）と23ゲージの針を通して10％ホルマリンを潮吹きで平坦な底部のガラス管から外れている。 </li><li>針は、試料（図2.12）と固化HGディスクの周辺部での管の側面に沿って挿入されます。 </li><li> needlホルマリンがゆっくりとシリンジを介してプッシュされる一方、電子は管の側面に沿って回転される。暗い色のビーコンAV -マーカーとガラス管の平底（図2.12）からそれに集中標本とともにHGボタンの分離でこの結果。 </li><li>セルブロック（試料の細胞とゲルのボタン）は、標識カセット内に配置し、パラフィン包埋セルブロック（図2.13）を調製するために組織の処理のために送信されます。 </li></ol>埋め込みと試料の切断<ol><li>ディスクは切断面のようなダウン暗いビーコンマーカー側（図1）とパラフィンに埋め込まれています。 </li><li>ビーコンなどの暗い色のAV -マーカーが露出し、はっきりと見えるようになるまでブロックは切片です。 </li><li> 3〜4ミクロンの切片を試料から単独で散在する細胞のほとんどが含まれている必要がありますこのレベルからカットされています。 </li><li>セクションは、さらに染色、免疫組織化学染色、または示されるように他のテスト用のガラススライド上に収集されます。セクションをマウントするために使用するスライドの種類を含めこれらのテストのためのプロトコルが異なる場合があります。一般的に免疫染色のために、コーティングされたスライドは、免疫染色のステップ中に浮遊し、スライドからセクションの損失を防ぐために使用されます。 </li></ol> （アルファベット順）使用される略語：CISH、in situハイブリダイゼーション試験発色、FISH、蛍光in situハイブリダイゼーション試験、FFPE、ホルマリン固定パラフィン包埋、FNA、穿刺吸引、HG、HistoGel™（サーモサイエンティフィック）; LBC、液体ベースの細胞診、PCRのポリメラーゼ連鎖反応; <img src="/files/ftp_upload/1316/1382fig1.jpg" alt="図1" /> 図1。Shidhamのプロトコルによって調製された細胞のブロックの構造。 <img src="/files/ftp_upload/1316/1382fig2.jpg" alt="図2" /> 図2。ShidhamのプロトコルによってLBC検体からのセルブロックを調製するためのさまざまな手順の概要。 <img src="/files/ftp_upload/1316/1382fig3.jpg" alt="図3" /> 図3。バナナの皮からAV -マーカーの調製。 <img src="/files/ftp_upload/1316/1382fig4.jpg" alt="図4" /> 図4とし、AV -マーカーなしのセルブロックとセクションの比較。 <img src="/files/ftp_upload/1316/1382fig5.jpg" alt="図5" /> 図5。AV -マーカーがある場合とない場合のセルのブロックのセクションの細胞数の比較。

<ol><li>Shidham, V. B., Epple, J. Chapter 14, Appendix I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aShidham%2C+VB+%22Cytopathologic+Diagnosis+of+Serous+Fluids%22">Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids</a>. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , Elsevier. Forthcoming.</li>
<li>Varsegi, G., D'Amore, K., Shidham, V. p16INK4a Immunocytochemistry as an Adjunct to Cervical Cytology - Potential Reflex Testing on Specially Prepared Cellblocks from Residual Liquid Based Cytology (LBC) Specimens. Modern Pathology 22: 98th Annual Meeting of United States and Canadian Academy of Pathology. 2009 Mar 7-13, Boston, Ma, , Abstract 424 97a-97a (2009).</li>
<li>Nigro, K., Tynski, Z., Wasman, J., Abdul-Karim, F., Wang, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+cell+block+preparation+methods+for+nongynecologic+ThinPrep+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Diagn+Cytopathol%22%5BJournal%5D)">Comparison of cell block preparation methods for nongynecologic ThinPrep specimens.</a> Diagn Cytopathol. 35, 640-643 (2007).</li>
<li>Saleh, H. A., Hammoud, J., Zakaria, R., Khan, A. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Thin-Prep+and+cell+block+preparation+for+the+evaluation+of+Thyroid+epithelial+lesions+on+fine+needle+aspiration+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22CytoJournal%22%5BJournal%5D)">Comparison of Thin-Prep and cell block preparation for the evaluation of Thyroid epithelial lesions on fine needle aspiration biopsy.</a> CytoJournal. 5, 3-3 (2008).</li>
<li>Kyroudi, A., Paefthimiou, M., Symiakaki, H., Mentzelopoulou, P., Voulgaris, Z., Karakitsos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+diagnostic+accuracy+with+a+cell+block+preparation+from+thin-layer+endometrial+cytology%3A+a+feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cytol%22%5BJournal%5D)">Increasing diagnostic accuracy with a cell block preparation from thin-layer endometrial cytology: a feasibility study.</a> Acta Cytol. 50, 63-69 (2006).</li>
<li>Atkinson, B. F. Chapter 5: Immunocytochemistry of effusion fluids: introduction to SCIP approach (Chapter 5. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAtkinson%2C+BF+%22Cytopathologic+Diagnosis+of+Serous+Fluids%22">Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids</a>. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , Elsevier. (2007).</li>
<li>Shidham, V. B. Chapter 15, Appendix II: Immunocytochemistry of effusions processing and commonly used immunomarkers. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aShidham%2C+VB+%22Cytopathologic+Diagnosis+of+Serous+Fluids%22">Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids</a>. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , Elsevier. (2007).</li>
</ol>

セルブロックは、様々な細胞診標本（1）の評価のための貴重なツールです。最も重要なことは、試料のアーキテクチャの詳細に加えて、セルのブロックは、免疫細胞化学などの補助的な研究は、発色/蛍光in - situハイブリダイゼーション試験（FISH / CISH）とのin - situ PCRの評価を可能にする。セルブロックの調製のための様々な方法が記載されている。しかし、これらのほとんどは、比較的多くの細胞を含む、組織のFNA吸引のようなmicrofragmentsや滲出液（1,3,4,5）などのいくつかの漿液性の液体で、非婦人科細胞診標本に適しています。 セルブロックは、主に免疫細胞化学的評価のための機会を提供するので、それらの処理は、好ましくは、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織のそれのようになります。最終的にセルブロックのセクションの免疫細胞化学的評価後に得られた結果は、FFPE組織切片で主に行わ発表された文献とのそれらと比較されます。プロトコル内の任意の変化は、潜在的にルーチンFFPEのために使用される以外のさまざまな固定液と試薬のシーケンスを通じて処理セルブロックで得られた結果の妥当性が損なわれ、無効にする。いくつかの商用技術は他の固定液、試薬の露出への曝露のプロトコルを介して処理の欠点を持つことができます。 セルブロックの準備の様々な方法は、堆積物および組織断片のかなりの量の試料のために用意されています。主に、濃縮された堆積物は、いくつかのゲルまたは凝集の原理によってサポートされています。操作しやすいボタンは、外科病理標本/生検のように処理した後、パラフィンに埋め込まれています。 使用するゲルは、ゼラチン、寒天、フィブリノーゲン/プラズマトロンビン、およびそのようなHGのような他の市販のゲルを含む。濃度のメソッドは、遠心分離によって沈殿物の単純なペレットからの膜の様々なタイプに沿って細胞の濃度に変化する。例としては：ミリポア、collodin（Celloidin）バッグまたはガラススライド（1）細胞診塗抹標本から細胞をこすりを。我々はまた、寒天とゼラチンの様々な組み合わせを試すことによってゲルの多様性を評価した。組み合わせのどれもワンピースの試料から埋め込まれた細胞と凝固ゲルの簡単に操作しやすいディスクを入手するために会社に十分な一貫性を達成していない。 HGは、適切な一貫性を示し、我々の経験でHGのセルブロックのセクションでの免疫染色の結果が優れている。 前述のようにcervicovaginal細胞診のための液体ベースの細胞診（LBC）標本は、一般的に非婦人科標本よりも携帯電話です。さらに、婦人科LBC標本は主にcervicovaginal粘膜から個々の散在剥離した表層の細胞が含まれています。このため、セルブロックのセクション内の適切な細胞充実性は、特別なアプローチなしでは達成されないことがあります。ブロックはセクションカット時のhistotechnologistが見ることができないで、これらの単独で散在する細胞成分として、細胞がセクションに表示されて開始されるレベルは高く評価することはできず、どちらかほとんどの細胞でレベルを越えてカットしてかどうか、見逃されることがあるサンプルセルの最高濃度（図4）でレベルに十分に深くカット。 Shidhamのプロトコルは、培地と従来のラボ機器（2）（図2）を埋め込むようにHGを使用して、これらの問題の両方に対応しています。 このプロトコルは、2つの主な機能（図1）以下が含まれます。 <ol><li>隣接およびセルブロック（図5）の切断面に平行な狭い面で単独で散在して細胞の濃度と整列。 </li><li>道標としてビーコンのような暗いAV -マーカーの包含。これは、次の機能を得るために重要です。 <ol style="list-style-type:lower-alpha;"><li>識別し、細胞をセルブロックに集中してレベルを監視すること。 濃い色の道標の暴露は、セルブロックで単独で散在して細胞のほとんどが （図4）が配置されると予想されるレベルを強調しています。これによセルブロックへの伐採 （ほとんどの細胞でレベルを越えて切断）やアンダーカット （サンプルセルの最高濃度でレベルに十分深くカットされていない）と最高濃度に対応するセルブロックのレベルからのセクションの選択を可能に細胞の。 </li><li>セクションで暗い色の道標にも別のスライド上のセルのブロック（図4）の別の連続切片で全く同じ細胞を調査し、識別するための基準点として機能します。別のセクション（6,7）で同じセルに従うようにSCIPのアプローチにより、特定のセルの座標プロパティなどimmunoprofileを解釈し、評価しながら、これは非常に重要です。 </li></ol></li></ol> OUもののRプロトコルは、液体ベースの子宮頸部細胞診標本のための標準化と報告されている、それはまた、さらにAVマーカーを改善促進するような滲出液、FNA、ブラッシング、嚢胞の内容等、多くの他の非婦人科標本の診断率を高めるために使用することができますこれらの標本のセルブロックの切片の免疫組織化学評価中にSCIPのアプローチの応用。埋媒体は、関連するステップで適切な変更を加えて他の試薬に置き換えてもよい。 HGは、室温（1）においてトロンビンによってゲル化するプラズマ（フィブリノーゲン）に置き換えてもよい。

個別散在セルの優位を持つ細胞診標本からのセルブロックの準備

Cell Block Preparation from Cytology Specimen with Predominance of Individually Scattered Cells

このビデオでは、個々に散在する細胞と小細胞群を含む液体ベースのcervicovaginal細胞診標本からのセルブロックの調製のためのShidhamの方法を示しています。この手法は、従来の実験装置でHistoGel（サーモサイエンティフィック）を使用しています。 セルブロックのセクションの使用は非婦人科細胞診の評価のための貴重な補助的なツールです。彼らは、細胞病理学者が病変のアーキテクチャを含む、追加の形態学的試料の詳細を調べることができます。最も重要なことは、彼らは、in situハイブリダイゼーション試験（FISH / CISH）とのin - situポリメラーゼ連鎖反応（PCR）は、このような免疫細胞化学などの補助的な研究の評価が可能になります。従来のセルブロックの調製技術は、主に体液の滲出液および穿刺吸引生検のために一般的に、非婦人科細胞診標本に適用されている。 液体ベースのcervicovaginal標本は多くの個々の散在のセルとの非婦人科比べ相対的に小さい携帯電話です。このため、セルブロックのセクション内に十分な細胞数は達成することは困難である。さらに、ブロックの切削histotechnologistは、細胞が最も高い濃度にさらされているレベルを可視化することはできません。したがって、セクションは、テスト用スライドガラスに転送するように選択されることができる適切なレベルを監視するのは困難です。その結果、目的の細胞と細胞のブロックの面積はどちら過去切断または十分深くカットしないことで、見逃されることがある。 Shidhamのメソッドの現在のプロトコルは、これらの問題に対処します。このプロトコルは、婦人科、液体ベースの細胞診標本のための標準化と報告ですが、それはまた、滲出液、FNA、ブラッシング、セルブロックのセクションの診断材料の品質向上のための嚢胞の内容などのような非婦人科標本に適用することができます。

個々に散在する細胞と小細胞群を含む細胞診標本からAV -マーカー付きセルブロックの調製のためのShidhamの方法。

このビデオでは、個別の細胞を含む液状ベースの子宮頸管・腟細胞診検体からセルブロックを調製するためのShidham法を実演します。

セルブロックの調製は、濃縮した検体細胞を、より大きなチューブの中に保持された平底ガラスチューブに移すことから始まります。次に、遠心分離により細胞を底面に層状に集積させ、AVマーカーと溶解したHistoGelを添加します。キャリアガラスチューブに温水を加えることで、HistoGelが液状に保たれます。その後の遠心分離により、AVマーカーがゲルを通過し、細胞がセルブロックの切断面に近い層に濃縮されます。ゲルボタンが凝固した後、それを取り出してパラフィン埋包処理を行うことができます。こんにちは。私はウィスコンシン州ミルウォーキーにあるウィスコンシン医科大学病理学部の細胞診セクションのGeorge Varszegi博士です。私はDr.Vsamです。ウィスコンシン医科大学（ミルウォーキー）病理学教室の細胞病理学セクションに所属しております。本日は、個々の細胞が散在している細胞診検体からセルブロックを調製する手順をご紹介します。この手法を用いることで、セルブロック切片における散在細胞の免疫表現型を解析し、またこれらの切片に対して特殊染色による評価を行うことが可能になります。それでは、始めていきましょう。この手順を開始するには、濃縮することが望ましい試料を約0.5 milliliters、長さ45 millimeters、直径15 millimeterの平底ガラスチューブに移します。次に、そのガラスチューブを大型の平底プラスチックキャリアチューブに入れ、室温で1800 Gsで5分間遠心分離します。遠心分離後、プラスチック製のキャリアチューブから平底ガラスチューブを取り出し、上清を捨てます。この際、底部の細胞沈殿の平坦な層を乱さないように注意してください。目印として、ダークビーコン（Johnny VenaまたはAVマーカー）を細胞に加えます。細胞を包埋した後、AVマーカーを使用して、パラフィンブロック内の細胞が集中しているレベルを特定します。専用のピペットを使用して、あらかじめ準備したAVマーカーの平らな表面のキューブをチューブ内の細胞に加えます。次に、ゲルの添加プロセスを開始します。HistoGel（またはHG）の分注量を、電子レンジの中出力で10秒間加熱して液状にするか、製造元の指示に従ってください。溶融したHGを0.5 milliliters、細胞が沈殿したチューブに加えます。素早く混ぜ合わせ、チューブの蓋を閉めます。直ちに、45 degrees Celsiusに温めた水を約2.5 milliliters、キャリアプラスチックチューブに加えてください。次に、細胞、AVマーカー、およびHistoGelを含むCAPAsチューブを挿入します。後続のステップでゲルが凝固するのを防ぐため、温水を用いて迅速に作業してください。続いて遠心分離を行い、AVマーカーをゲルの中に押し込み、細胞を最終的なパラフィン包埋細胞ブロックの切断面に近い層に濃縮させます。細胞がガラスチューブの平底に対して垂直に濃縮されるよう、固定角カップではなくスイングチューブ（スイング式カップ）を使用し、室温で1800 Gsで5分間遠心分離します。遠心分離が完了したら、底部の細胞の薄い沈殿層を乱さないように注意しながら、チューブをゆっくりと垂直に遠心機から取り出します。ピンセットを用いて、試料細胞の沈殿層を乱さないように、内側の小さなガラスチューブを垂直に取り出します。最後に、小さなガラスチューブを垂直に立てた状態で15分間冷蔵し、ゲルを冷却・凝固させます。15分後、細胞を含むゲルをガラスチューブから取り出し、凝固したHGディスクを脱落させます。このディスクの底部には、濃縮された検体層と暗色のAVマーカーが含まれています。10% formalinを満たしたシリンジに取り付けた23ゲージの針を使用してください。まず、凝固したHGディスクの周辺部のチューブ側面に沿って針を挿入します。次に、シリンジからFormin溶液をゆっくりと注入しながら、針をチューブの側面に沿って回転させます。HGボタンがガラスチューブの平らな底面から分離することを確認してください。濃色のビーコンAVマーカーと濃縮された検体を含む分離されたゲルのボタンはセルブロックと呼ばれます。セルブロックをラベル付きのカセットに入れ、組織処理に回してパラフィン包埋セルブロックを作成します。セルブロックの包埋が完了したら、検体の切削に進みます。パラフィンに包埋されたセルブロックのディスクを切削し、パラフィン包埋セルブロックをミクロトームにセットします。パラフィンブロックの表面を平坦にし、濃色のAVマーカーが露出し、はっきりと見えるまで粗切断を行ってセルブロックのディスクを露出させます。濃色のAVマーカーが露出したら、厚さ3〜4 µmの切片を作成します。これらの切片には、元の検体から濃縮された細胞が含まれています。各切片をガラススライド上に回収し、染色後、顕微鏡観察を行います。ここでは、低倍率において、検体にAVインクを塗布したバナナの皮マーカーを含めたことが、これらのH&amp;E染色切片の細胞密度に与える影響を確認します。左側の画像からわかるように、このマーカーを用いることで、細胞密度が良好なレベルを得るための切片の切削深さをモニタリングすることが可能です。また、AVマーカーにより、異なる細胞の方向付け、特に他のガラススライド上の異なる連続切片における切片の追跡が可能になります。このマーカーがなければ、切削深さをモニタリングすることはできません。組織検体は、細胞密度が極めて低い切断面で採取されました。検体内の細胞密度の程度は、高倍率でより顕著に確認できます。AVマーカーが存在すれば、切断深さを容易にモニターできるため、細胞密度の低い検体の採取を簡単に避けることができます。ここでは、断片や細胞が疎らに散在する検体からセルブロックを調製する方法を示しました。細胞ブロックの処理時に添加したダークAVマーカーにより、細胞濃度が最も高い切片を選択することができます。また、これによりガラススライド上でこれらの切片を正しく方向付けることが可能になります。切断面となるフロードプラ底面ガラスチューブに沿って細胞を配向させる際、HistoGelが溶融状態でであることが重要です。ただし、この手順は、適切な変更を加えることで、トロンビンやフィブリノゲンなどのコールド法を含む他の手法にも適用可能です。以上となります。ご視聴ありがとうございました。皆様の研究がうまくいくことを願っております。ありがとうございます。

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Biology

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学ぶ Shidham法による細胞ブロック調製法。AVマーカーとHistoGelを用いて散在細胞を効率的に濃縮・包埋し、免疫組織化学染色と特殊染色の精度を向上させる病理診断技術です。

個別散在セルの優位を持つ細胞診標本からのセルブロックの準備

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