Name: で小動物の筋肉の生着のダイナミクスの追跡インビボでの蛍光イメージング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-09-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: 学ぶマウスの筋肉再生における移植筋肉幹細胞の生着ダイナミクスを蛍光イメージングで追跡する手法。GFP標識細胞を用いた非侵襲的な縦断観察により、再生医療研究の正確なデータ収集が可能となる。

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ZヤンとY王の仕事は、NIAMS / NIHからの助成金K02 AR051181、筋ジストロフィー協会とY王のためのハーバード幹細胞研究所からの補助金によって可能となった。 Q曽とX徐の作業は、ブリガムアンドウィメンズ病院から光イメージングラボに授与されたプログラムの助成金によってサポートされています。著者らは、細胞の仕事の技術的なヘルプのために麻酔科、BWH、から温劉に感謝いたします。

細胞の準備<ol><li>衛星細胞の単離<ol style="list-style-type:lower-alpha;"><li>麻酔下で、GFPトランスジェニックマウス（C57BL / KA -βactin- EGFP）の四肢筋が削除​​されます。小片に切断した後、衛星細胞は37℃で1時間2％ディスパーゼのコラゲナーゼ溶液とみじん切りの組織を培養することにより酵素的に解離して℃である</li><li>ハムのF - 10および20％FBSを含む増殖培地で酵素消化を中和する、パスツールピペットで繰り返し摩砕によって筋肉を解離する。細胞は、細胞ストレーナー（Ø70 -100μmの）を通して濾過し、次いで37℃で1時間、ノンコーティングディッシュ℃の上にメッキされています</li><li>静かにコラーゲンコートしたディッシュ上清とプレートそれらを削除します。筋芽細胞を浄化するために、このステップ1時間後に繰り返します。 （プレプレート） </li><li>時間内にメディアとプレートのセルを変更する。最終精製筋芽細胞は、37を含有する培地ハムF - 10、20％FBS、100 U / mlペニシリン、および100μg/ mlのストレプトマイシン（増殖培地）で培養されている℃、5％CO2、95％空気とC。 </li></ol> </li><li>文化とは10 ng / mlの塩基性FGFの添加によって増殖培地中で一次筋芽細胞を展開します。 </li><li> in vivo実験すべてでは、TAの筋あたり5 × 10 5細胞を注入する。 </li><li>筋芽細胞を収穫するとき、我々は、0.25％トリプシン/ EDTAを用いて細胞を剥離し、PBSで2回それらを洗う。細胞数を、血球計でカウントされ、細胞を5 × 10 4細胞/μlの濃度でHBSSに再懸濁する。 HBSSで集中細胞を氷の上に置き、収集後1時間以内に注入される。 </li></ol> 生体内撮像<ol><li> 4-6週間の年齢で雄のmdxマウスは、ジャクソン研究所から購入し、動物飼育設備で維持されています。 </li><li>環境への宿泊施設の約一週間後、マウスは、培養細胞を移植する準備が整いました。 </li><li>細胞移植の前に、マウスは、ケタミン（100 mg / kg体重）及びキシラジン（10 mg / kg）の混合物の腹腔内（ip）注射による麻酔です。その後、TAの筋面積約毛が足にNairさんを適用し、それを蒸留水できれいに拭くために30秒待つことによって削除されます。 </li><li>マウスは、麻酔下に入れたまま、10μlのHBSSで5 × 10 5細胞は徐々に30ゲージの針を使用して3点でそれぞれのTAの筋肉に注入されています。 </li><li>ステップ4の後、マウスは、定期的に生体内蛍光イメージングで撮像することができます。高感度電荷結合カメラを装備した蛍光イメージング駅NightOwl LB981（Berthold社Technologies社）は、マウスの妨げに足から画像を取得するために使用されます。 </li><li> in vivoイメージングの日には、まずTAの筋で発毛を確認してください。必要に応じて、我々は、ケタミンとキシラジンの混合物で、マウスを麻酔した後、上記のような毛を削除するNairさんを再適用します。 </li><li>マウスは麻酔がかかっているとき、我々は、黒以外の蛍光紙（ストラスモアから黒Artagain紙）上に腹臥位にマウスを置きます。完全に良くイメージングのためのTA筋肉を公開するには、我々は紙に後肢をテープ。 </li><li>我々は、イメージングチャンバーと位置、カメラの視野の中心に撮像される後肢にマウスを置きます。我々は最初の5秒間の露光時間で足の伝統的なグレースケールの写真撮影をするために発光フィルターを切り替える。マウスの位置を再調整し、必要に応じてカメラの焦点。露光時間（1,250ミリ）、試料の高さ（0.9センチ）などを含む撮像パラメータは、実験過程で一定に保たれる。 </li><li>私たちは、その後、緑色蛍光タンパク質の波長のために適切な排出のフィルタに切り替える。我々は1,250ミリ秒と1のビニング数の露光時間で蛍光画像を取る。イメージング後、マウスは回復を待つためにケージにイメージングチャンバーから除去される。 </li><li>分析のために、我々は、毎秒の光子の面で彼らの強度を測定する蛍光シグナルを介して関心領域（ROI）を描く。我々はまた別の定量値として画素数の点ではROIの大きさを測定する。縦断的データを取得するために、必要に応じてイメージング実験は、数か月にわたって、より頻繁に毎週繰り返すか、することができます。 </li></ol>実験の終了時に、マウスを安楽死されており、TAの筋は組織学の分析のために収穫される。

<ol><li>Ballou, B., Ernst, L. A., Waggoner, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+imaging+of+tumors+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescence imaging of tumors in vivo.</a> Curr Med Chem. 12, 795-805 (2005).</li>
<li>Green, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((fluorescent+protein+as+a+marker+for+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">fluorescent protein as a marker for gene expression.</a> Science. 263, 802-805 (1994).</li>
<li>Godavarty, A., Sevick-Muraca, E. M., Eppstein, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+fluorescence+lifetime+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Phys%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional fluorescence lifetime tomography.</a> Med Phys. 32, 992-1000 (2005).</li>
<li>Graves, E. E., Weissleder, R., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+molecular+imaging+of+small+animal+tumor+models%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Fluorescence molecular imaging of small animal tumor models.</a> Curr Mol Med. 4, 419-430 (2004).</li>
<li>Graves, E. E., Yessayan, D., Turner, G., Weissleder, R., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+in+vivo+fluorochrome+concentrations+measured+using+fluorescence+molecular+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Validation of in vivo fluorochrome concentrations measured using fluorescence molecular tomography.</a> J Biomed Opt. 10, 44019-44 (2005).</li>
<li>Gurfinkel, M., Ke, S., Wen, X., Li, C., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+fluorescence+optical+imaging+and+tomography.+Dis+Markers%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Near-infrared fluorescence optical imaging and tomography. Dis Markers.</a> , 107-121 Forthcoming.</li>
<li>Lee, J., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+fluorescence+enhanced+optical+tomography+using+referenced+frequency-domain+photon+migration+measurements+at+emission+and+excitation+wavelengths%5BTitle%5D)+AND+%22J+Opt+Soc+Am+A+Opt+Image+Sci+Vis%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional fluorescence enhanced optical tomography using referenced frequency-domain photon migration measurements at emission and excitation wavelengths.</a> J Opt Soc Am A Opt Image Sci Vis. 19, 759-771 (2002).</li>
<li>In vivo fluorescence imaging of muscle regeneration by transplanted eGFP-labeled myoblasts. Xu, X., Yang, Z., Liu, Q., Wang, Y. Annual Meeting of American Society of Gene Therapy, 2008 May 28-June 1, Boston, Ma, , American Society of Gene & Cell Therapy. Milwaukee, WI. (1985).</li>
<li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+cell+biology+of+cancer+cells+visualized+with+fluorescent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo cell biology of cancer cells visualized with fluorescent proteins.</a> Curr Top Dev Biol. 70, 121-144 (2005).</li>
<li>Coulton, G. R., Morgan, J. E., Partridge, T. A., Sloper, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mdx+mouse+skeletal+muscle+myopathy%3A+I.+A+histological%2C+morphometric+and+biochemical+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropathol+Appl+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The mdx mouse skeletal muscle myopathy: I. A histological, morphometric and biochemical investigation.</a> Neuropathol Appl Neurobiol. 14, 53-70 (1988).</li>
<li>Morgan, J. E., Partridge, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Muscle satellite cells.</a> Int J Biochem Cell Biol. 35, 1151-116 (2003).</li>
<li>Mendell, J. R., Kissel, J. T., Amato, A. A., King, W., Signore, L., Prior, T. W., Sahenk, Z., Benson, S., McAndrew, P. E., Rice, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myoblast+transfer+in+the+treatment+of+Duchenne%27s+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myoblast transfer in the treatment of Duchenne's muscular dystrophy.</a> N Engl J Med. 333, 832-838 (1995).</li>
<li>Bogdanovich, S., Perkins, K. J., Krag, T. O., Khurana, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutics+for+Duchenne+muscular+dystrophy%3A+current+approaches+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Therapeutics for Duchenne muscular dystrophy: current approaches and future directions.</a> J Mol Med. 82, 102-115 (2004).</li>
<li>Morgan, J. E., Coulton, G. R., Partridge, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mdx+muscle+grafts+retain+the+mdx+phenotype+in+normal+hosts%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Mdx muscle grafts retain the mdx phenotype in normal hosts.</a> Muscle Nerve. 12, 401-409 (1989).</li>
<li>Sherwood, R. I., Christensen, J. L., Weissman, I. L., Wagers, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determinants+of+skeletal+muscle+contributions+from+circulating+cells%2C+bone+marrow+cells%2C+and+hematopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Determinants of skeletal muscle contributions from circulating cells, bone marrow cells, and hematopoietic stem cells.</a> Stem Cells. 22, 1292-1304 (2004).</li>
<li>Cerletti, M., Jurga, S., Witczak, C. A., Hirshman, M. F., Shadrach, J. L., Goodyear, L. J., Wagers, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+efficient%2C+functional+engraftment+of+skeletal+muscle+stem+cells+in+dystrophic+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Highly efficient, functional engraftment of skeletal muscle stem cells in dystrophic muscles.</a> Cell. 134, 37-47 (2008).</li>
</ol>

我々はこの研究ではホスト骨格筋に蛍光標識された移植細胞を追跡するために信頼性と安定したイメージングプラットフォームを設定します。 GFPトランスジェニックマウスからGFP -標識筋芽細胞は、将来の細胞治療の候補となる成体幹細胞の種類を表しています。細胞数、細胞の注入、明確な背景、結像位置とマシンのパラメータを含む一定の操作は、高品質な画像を得るために、特に定量的な分析のために重要です。 蛍光イメージングは​​、使用する非侵襲的、容易であるので、生物医学研究における多くのアプリケーションがあり、高スループットを持っています。さらに、蛍光イメージングは​​、散乱、減衰と吸収のためにも、光子のカウントに基づいて定量的な測定を提供することができる、光のテクニックの欠点である組織に大きな距離を、侵入することはできません。努力は、光の侵入深さを高めるために赤や近赤外レポーターを使用するために進められている。 蛍光イメージングのもう一つの利点は、特定の蛍光レポーターが人間の使用が承認されている場合、それが診療所への翻訳であるということです。 MRI、CT、およびPETと比較して、蛍光イメージングは​​、高価なハードウェアおよび造影剤を必要としない高い柔軟性を備えています。一例としては、診療所で使用されている蛍光ベースの内視鏡とマイクロ内視鏡です。他のモダリティとの蛍光イメージングを組み合わせることで、我々は、基礎となる生物学的プロセスについての解剖学的および機能的な情報の両方を取得する能力を達成できる見込み。

<table><tbody><tr><td>NightOwl LB981</td><td>Berthold Technologies</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

で小動物の筋肉の生着のダイナミクスの追跡インビボでの蛍光イメージング

Tracking Dynamics of Muscle Engraftment in Small Animals by In Vivo Fluorescent Imaging

筋ジストロフィーは、収縮筋細胞の進行性の喪失によって特徴付け変性筋疾患のグループです。現在、利用可能な治療法はありません。幹細胞生物学における最近の進歩はこれらの疾患を治療する効果的な細胞ベースの治療法の開発のための新たな希望を生成している。ジストロフィーモデル動物の筋肉への蛍光タンパク質で標識された幹細胞の様々なタイプの移植分野で広く使用されています。移植細胞の運命を追跡する機能を持つ非侵襲的方法は、長手方向に、より正確かつ効率的に移植された細胞が筋肉の生着を評価するために我々の能力をさらにすることができます。 本研究では、我々 は 、in vivo蛍光イメージングに移植GFP（緑色蛍光タンパク質）で標識したマウス骨格筋の細胞を追跡するための高感度かつ信頼性の高い方法であることを示している。蛍光タンパク質の励起に必要な外光の使用に起因するバックグラウンドについての懸念にもかかわらず、我々はどちらかヌードマウスを使用するか、この問題の多くの脱毛の試薬で髪を排除することによって排除されることがわかった。 CCDカメラを使用して、蛍光シグナルは、GFPトランスジェニックマウスまたはeGFPのが筋芽細胞の培養、形質導入のいずれかから5 × 10 5細胞を注入した後、前脛骨筋（TA）筋肉で検出することができます。このような指伸筋の筋（EDL）として、より表面的な筋肉のために、より少ない細胞の注入は、検出可能なシグナルを生成します。信号強度は、関心領域（ROI）で毎秒放出されるフォトンの数として測定して定量することができる。取得した画像が移植された領域を画定明確な境界を示しているため、ROIの大きさも同様に測定することができます。足が一貫してたびに配置されている場合、筋肉とROIの大きさごとに毎秒の光子の総数の変化は、移植細胞数の変化と移植された領域の大きさを反映している。したがって、時間をかけて、同じ筋肉の変化が定量化可能である。 生体内蛍光イメージング技術では tumorogenic細胞の成長を追跡するために主に使用されている、我々の研究は、それが移植された幹細胞の運命を追跡するために私達を可能にする強力なツールであることを示しています。

我々は、説明<em&gt; in vivoで</em健康と栄養障害性両方のマウスの骨格筋に移植後のGFP標識された筋芽細胞による筋肉の再生を監視する&gt;蛍光イメージングプロトコル。このプロトコルは、細胞の他のタイプの移植によって、他の筋肉の条件で同様に筋肉の再生を研究するために適応させることができます。

筋ジストロフィーは、収縮性筋細胞の進行的な喪失を特徴とする、一群の変性性筋疾患である。現在、...

こんにちは。ボストンのバーガム女性病院麻酔科のJuwan Maです。本日は、マウスの筋肉再生の経過をモニタリングするための、生体内（in vivo）蛍光画像取得の手法をご紹介します。当研究室では、移植した筋肉幹細胞の生着を研究するためにこの手順を用いています。それでは始めましょう。移植に用いるGFP標識細胞を、GFPトランスジェニックマウスから単離し、培養します。操作を続ける前に、足指をつまんでマウスが完全に麻酔状態にあることを確認します。その後、後肢の筋肉を摘出します。無菌条件下で、この筋肉を摩砕します。微小切片を2% collagenase溶液中で37 °Cで1時間インキュベートし、サテライト細胞を解離させます。インキュベーション後、Ham's F10および20% FBSを含む増殖培地を加え、酵素消化を停止させます。その後、パステールピペットを用いて繰り返しトリチュレーション（pipetting）を行い、筋肉組織を解離させます。次に、細胞をセルストレーナーでろ過し、未コーティングの培養皿に播種します。この皿を標準的な細胞培養インキュベーターに1時間置きます。接着性のより強い他の細胞集団からサテライト細胞を分離するため、上清をコラーゲンコーティング皿にデカンテーションし、さらに1時間インキュベートします。このインキュベーション後、得られたサテライト細胞濃縮上澄み液を再び回収し、新しいコラーゲンコートプレートに播種して、筋芽細胞コロニーが観察されるまで培養します。このプロセスはプレプラッティングと呼ばれます。細胞が60〜70%のコンフルエンスに達した時点で継代を行います。細胞の一部を用いて免疫細胞化学染色を行い、筋原性細胞マーカーで染色することで、培養液中の筋細胞の純度を確認します。筋原性細胞の純度が確認された後、細胞を同一の培養条件下で増殖させます。細胞移植に先立つ移植条件として、0.25% Trypsin-EDTAを用いて細胞を剥離させます。細胞を2回洗浄し、HBSSで5 × 10⁷ cells/mLの濃度に再懸濁し、前脛骨筋（TA筋）1本につき細胞懸濁液10 µLを注入します。in vivoイメージングのため、まずGFP標識した筋芽細胞を4〜6週齢の雄マウスに移植します。ケタミン・キシラジンでマウスを麻酔し、麻酔状態を確認した後に処置を開始します。背景ノイズを低減させるため、両後肢に除毛剤を塗布し、30秒待機してから拭き取り、後肢の除毛を行います。綿棒を使用した後、蒸留水に浸した新しい綿棒で脚を再度拭き、マウスに細胞を移植する際に妨げとなる汚れや毛を除去します。まず、10 µLのHBSSに懸濁した10⁵個の細胞を5回分、ハミルトンシリンジに吸い上げます。30ゲージの針を用い、TA筋の長軸に沿った3箇所（上側内側、および下部）に、それぞれ同数の細胞を注入します。各注入後、針に沿った漏出を防ぐため、針を抜く前に2分間保持します。待機時間中に、同量の細胞を別のシリンジに吸引し、対側のTA筋肉に同様に注入します。細胞注入後、マウスを直ちに黒色の非蛍光紙の上に腹臥位で配置し、両足を足底が下になるように紙に固定して、脚を90度に開かせます。その後、マウスをNight Owl LB 981 蛍光イメージングステーションのチャンバー内に配置します。高感度の電荷結合素子（CCD）カメラを装備し、後肢の1本をカメラの視野の中央に配置します。まず、肢の従来のグレースケール写真を撮影します。次に、イメージングを開始するために、緑色蛍光タンパク質に特異的な波長を持つ適切なエミッションフィルターを選択します。露光時間を1,250 millisecondsに設定して1枚撮影し、続いて500 millisecondsで別の1枚を撮影します。露光時間を長くすると弱い信号の検出が可能になり、短くするとより詳細な構造が明らかになることがわかります。片側の後肢の撮像が完了したら、もう一方の後肢をカメラの視野の中心に配置し、前述と同様の手順で撮像します。結果の比較可能性を確保するため、検体の高さは一定に維持してください。イメージング後、マウスをケージに戻し、麻酔からの回復状態を観察します。解析では、蛍光信号の上に関心領域（ROI）を設定し、1秒あたりの光子数を測定します。また、縦断的なデータを取得するための追加の定量的数値として、関心領域（ROI）のサイズをピクセル数で測定します。イメージング実験は、必要に応じて異なる日または週に繰り返すことができます。本実験において、GFP標識細胞を注入した当日に撮影したマウス後肢の蛍光画像では、高い信号強度が見られました。信号強度は2日目に低下し、その後、7日、14日、21日までに安定したレベルまで上昇しました。これらの蛍光変化を、信号強度を1秒あたりの光子数として測定して定量化したところ、注入の1日後に信号強度の著しい低下が観察され、これはGFP陽性細胞数の減少を反映していました。しかし、7日目、14日目、および21日目までには、信号強度が安定したレベルまで増加し、筋肉の再生が起こったことが示されました。以上で、GFP標識細胞の注入後にin vivo蛍光イメージングを用いて再生筋肉の経過をモニタリングする方法について説明しました。この手法を用いることで、あらゆる種類の蛍光標識細胞を注入した後の筋肉再生のダイナミクスを研究することが可能になります。指定の間隔で非侵襲的に画像を撮影できるため、より少ない動物数と軽減されたワークロードで、より正確な縦断的データを収集することが可能です。測定パラメータを固定して使用すれば、同一個体から経時的に得られた画像は定量的に比較可能です。背景ノイズを低減させるためには、筋肉上の皮膚表面を清潔に保つことが極めて重要であり、脚部を覆うすべての毛を除去し、綿棒やパッドで当該領域を十分に拭き取ることが不可欠です。また、すべての測定間で一貫性を確保するため、常に同じパラメータセットを使用することを忘れないでください。以上で説明を終わります。ご視聴ありがとうございました。実験の成功をお祈りいたします。

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生物学

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