Name: 調製と細針吸引生検を実施するためにファントム病変を使用して (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-09-29T21:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: 学ぶ細胞診学の細針吸引生検技術。バナナとコーキング材で作るファントム病変を用いて、研修医が安全にFNAB手技を練習する方法です。簡単な材料で実践的なスキル習得が可能です。

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<ol style="list-style-type:upper-alpha;"><li> ファントム病変の準備（事前FNA能力の実際の練習セッション（図1）は38〜48時間程度ファントムを準備したり、FNAのソース、米国から&quot;AVファントム&quot;を使用する準備に活用。ファントム病変（凍結せずに冷蔵で保存されている）5月セッションを練習するにも3〜4日間前に準備保持する。 </li><li> FNA能力を実践：私たちはShidhamのTHFVを（機能バルブ付きティッシュハーベスター）（FNAのソース、米国）を使用して手順を実証しているが、他のFNAのシステムは（図2）練習のために使用されることがあります。 </li><li>ガラススライド（図3）に吸引を拡散して処理する。 </li></ol>必要な材料<ol style="list-style-type:lower-alpha;"><li>透明なシリコーンゴムコーキング - 利用可能な多くの建設/ホーム改善の店で。多くのブランドがGETM、DAP、レッドデビル、ホワイトライトニング、およびローカルチェーンのブランドを含めて利用可能です。我々は、透明なシリコーンゴム、ホワイトライトニング製品、クリーブランド、オハイオ州、米国、使用<a href="http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html">http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.htmlを</a> ） </li><li>コー​​キングガン</li><li>ラップシートの部分（我々はサランがプラスラップ、SCジョンソン＆サン社、ラシーン、ウィスコンシン、米国しがみつく使用<a href="http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp">http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.aspを</a> </li><li>ゴム手袋</li><li>広い直径のバナナやソーセージ。 </li><li>厚いカードボード、アクリル板、または他の製のしっかりと平らなベースプレート（約6インチx 6インチ）。 </li><li> FNAは設備を行って<ul><li> 25ゲージの注射針</li><li> ShidhamのTHFV（またはFNAを実施するための他のコンポーネント） </li><li>スライドガラス</li><li>染色キット</li></ul></li></ol>ステップバイステップの詳細ファントムの病変のA.準備 （FNA能力を（図2）練習前に1〜2日ファントムを準備したり、FNAのソース、米国から&quot;AVファントム&quot;を使用する準備ができて活用。 <ol><li>ボードをサポートしているの6 × 6インチサイズのカット。 </li><li> &quot;ファントム病変のコア&quot;（バナナやソーセージ）の2.5インチ長いセグメントをカット。 </li><li>ベースプレート上にコーキングの0.5インチ厚さの層を排出する。 </li><li>コーキングのこの層に軽く&quot;ファントム病変コア&quot;を押してください 。 </li><li>それは完全にコーキングのマウンドに埋め込 ​​まれているように、気泡をトラップすることなく、&quot;ファントム病変のコア&quot;を介してより多くのコーキングを追加。 </li><li>手袋をはめた手で&quot;ファントム病変のコア&quot;以上のコーキングを調整し、形作る。 </li><li>ラップの6 × 6インチサイズのピースを取るとコーキングのマウンドをカバーし、きれいな、手袋をはめた手で滑らかな凸形状に古墳の表面を調整する。 </li><li>暖かい場所で、製品の指示の下で述べたように硬化時間よりも長い6-8時間、（通常は24時間）のためのコーキングのマウンドの治療を、してみましょう。 </li><li>硬化後は、コーキングがしっかりしてください、そしてラップが容易に剥離することができる。 </li><li> FNAファントムの病変は、コーキングの全体のマウンドは、完全に&quot;幻の病変のコア&quot;（バナナやソーセージ）を含む中央に硬化した約8時間後にFNAの手順を実施するために使用できるようになります。 </li></ol> B.は、AVファントムの病変でFNA能力を練習する。 高い品質を得るためのいかなるアプローチ、良い品質、直接細胞診塗抹標本で十分なFNAの吸引は、次の重要なポイントを、対処する必要があります<ol style="list-style-type:upper-roman;"><li>針のゲージのような手順のタイトルに暗示、細かい針が（より高いゲージの番号）最小限の血液希釈とのより良い吸引をもたらす。利点と制限事項の重要なバランスのために、22〜25ゲージの針は、FNAの吸引の品質に影響を与えることなく、針の最適な機械的安定性のために好ましい。 </li><li> FNAの間に真空のアプリケーションとリリースの適切なシーケンスを制御する手順 - これは、針ハブに向かって、針の各ストロークでサンプリングされた細胞を進めるために重要です。しかし、吸引材料をシリンジと針吸引アセンブリの領域に到達できないようにする必要があります。これが防止されていない場合、材料は、 塗抹標本を （この材料が、しかし、セルブロックの準備のためにまたはそのようなサイトスピン、フィルタメソッド、または最近の液体ベースの細胞診の製剤として濃縮メソッドに対して使用される）を作るために取得することが困難な場合があります 。 </li><li> 直接塗抹標本を含めて、吸引検体の処理に適切なスキルを開発し、そのようなリンパ球増殖性病変の免疫表現型検査のための選択科目免疫細胞化学、選択科目フローサイトメトリー用セルブロックの準備などの補助的なテストのための適切なトリアージとオンサイトの妥当性評価 、微生物学のための滅菌パスを提出研究、およびメイト分子試験（細胞遺伝学、等）のためのリアル。 </li></ol> 巴 FNAの手順（ShidhamのTHFVで示すように、[1]（FNAのソース、米国が）、しかし、他のFNAのシステムが練習のために使用されることがあります）実行します （図3,4,5）。 <ol><li>バルブを閉じた状態でFNAのアセンブリを準備します。 </li><li>病変の位置を確認し、病変に針の先端を挿入する。 </li><li>各へと病変への往復ストロークで病変の代表的な細胞成分を吸引するために、その先端に針を介して、真空を接続するためのバルブを開きます。 </li><li>異なる方向の病変に針を挿入して病変の真空とサンプルさまざまな領域を維持する。 </li><li>針の内腔に真空を切断するためにバルブを閉じます。 </li><li>周囲条件（一瞬針からシリンジバルブを切断することによって、例えばこのような&quot;THFV&quot;として作り付けのステップ、との特別な装置が使用されている場合と再接続。、これとBA1からBA6を介して他のステップは、協調的なもので圧力を均等化自動的にバルブのシステムで別の手順に従って）[1]。 </li><li>バルブを閉じた状態でのハブ端にわずかに負圧がない限り、病変に毛管現象によって試料の損失を防ぐために、病変から針を​​外します。 </li><li>直接塗抹（下記参照）（図6）を準備するためにスライドガラス上に吸気コンテンツを押しのける。 </li></ol>適切なトリアージと吸引標本のBB。処理 スライドガラス上に吸引を拡散し、適切な染色とトリアージ（図7,8）に続いて、良質の直接塗抹標本（図6）を準備。 <ol><li>スライドガラス上に外れる吸引の低下は図に示すように、様々なアプローチ（図6）[2]によって広がっている。通常のアプローチは&#39;&#39;です。しかし、標本がいくつかmicrofragmentsで希釈した血液であれば、過剰な血液を傾けることによって離れてスライドを排出される、とmicrofragmentsは、このスライドと&#39;に似た第2のガラススライドの間に広がっている。吸引は、主にリンパ球増殖性病変からのようなmicrofragments、なしの懸濁液である場合、それは&#39;b&#39;または&#39;c&#39;に似て広がっている。 </li><li>塗抹標本は、オンサイトの妥当性の評価中に別の染色法のためのさまざまな方法で処理し、固定することができる。しかし、最善のアプローチは、空気乾燥全スメアすることです。空気乾燥塗抹標本を5で生理食塩水、水和と後固定（95％エタノールでまたは好ましくは95％エタノールで後染色メタノール固定後またはPAPでロマノフスキの汚れ（例えばDifff - Quikの汚れのような、ライト染色）で染色することができます％酢酸）[3]。不明瞭血に起因する干渉の排除は大きな利点[3]です。 </li><li>オンサイトの妥当性の評価中に初期cytomorphologic調査結果に応じて、追加のトリアージは、（そのような選択科目のセルブロック、電子顕微鏡、微生物培養、フローサイトメトリー、分子テスト - 細胞遺伝学など）として示されることをお勧めします。 </li></ol>代表的な結果： <img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig1tmb.jpg" alt="図1" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig1.jpg">図1の拡大版をご覧いただくにはこちらをクリックしてください</a> 。 FNA能力を実践するためのAVファントムを準備するために必要な図1。材（コーキングの完全な硬化後に除去しつつ*我々は、終わりにコーキングに付着していないサランプラスチックのラップを使用する。） <hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig2tmb.jpg" alt="図2" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig2.jpg">図2の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図2。準備AVファントムの病変<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig3tmb.jpg" alt="図3" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig3.jpg">図3の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図3。FNAの手順で重要なステップ。 <hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig4tmb.jpg" alt="図4" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig4.jpg">図4の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図4重要なステップのEUS - FNA -サマリ*（図3参照） <hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig5tmb.jpg" alt="図5" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig5.jpg">図5の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図5。FNA proc内の重要なステップに関連する落とし穴edure。 <hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig6tmb.jpg" alt="図6" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig6.jpg">図6の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図6二つのスライド間でFNA検体の直接塗抹標本の調製。 <hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig7tmb.jpg" alt="図7" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig7.jpg">図7の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図7。空気乾燥塗抹標本と固定ウェット。 <hr style="border-bottom:1px dotted #999999;" /><img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig8tmb.jpg" alt="図8" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig8.jpg">図8の拡大バージョンをご覧いただくにはこちらをクリックしてください。</a> 図8。空気乾燥塗抹標本と固定ウェット。

<ol><li>Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Harvester+with+Functional+Valve+%28THFV%29%3A+Shidham%27s+device+for+reproducibly+higher+specimen+yield+by+fine+needle+aspiration+biopsy+with+easy+to+perform+steps%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Clinical+Pathology%22%5BJournal%5D)">Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps.</a> BMC Clinical Pathology. 7 (2), (2007).</li>
<li>Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).</li>
<li>Shidham, V., Kampalath, B., England, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Routine+air+drying+of+all+the+smears+prepared+during+fine+needle+aspiration+and+intraoperative+cytology+studies%3A+An+opportunity+to+practice+a+unified+protocol%2C+offering+the+flexibility+of+choosing+variety+of+staining+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cytologica%22%5BJournal%5D)">Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods.</a> Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).</li>
</ol>

細針吸引生検（FNAB）が広く、経済的で安全、そして様々な腫瘍や病変の組織診断のための急速な低侵襲法として実行されます。この手順は18〜27ゲージの針を病変に挿入される、唯一の毛細管現象の形で、最小限から約10 mLの範囲変数の強度の制御さ​​れた真空（吸引）の下に病変のさまざまな分野で前後に複数回移動さ診断組織材料を取得するために注射器で真空。大きい番号の細かいゲージの針を直接塗抹標本を準備をするためには、良い細胞診の材料を取得することが好ましい。 18G取得セルブロック、フローサイトメトリー、電子顕微鏡、細胞遺伝学、微生物学の文化等の手順はシンプルですが、協調して適切な手順で真空の適切なアプリケーションとリリースのさまざまなステップを制御することが極めて重要であるのに適した多くのサンプルの広いゲージの針最適な結果を得るために。 特別に設計された高収量の針、従来の皮下注射針またはそれらの変更の非可用性のためにこの手順を実行するために使用されます。従来の方法で使用されている場合は、注射針は、試料の低収率につながる多くの制限があります。特殊な注射器のグリップの要件は通常、手順の複雑さに追加されます。従って、市販の適切なFNABの針装置が不足しているため、この汎用性の高い手順は、不十分な標本の検索では頻繁に問題に苦しんでいる。最近では、再現性と収量を増加させる装置は、[1]を報告されている。 さらに、現在は住民や仲間を含む訓練で医療従事者によってFNABを行うの習熟度を実施するのに適したモデルが不足している。我々は、新鮮な牛の肝臓の一部で標準化されたモデルは、FNABの能力を実践するためのラテックス手袋でぬいぐるみだった。しかし、このモデルは、短期間で整理することは困難です。新鮮な牛の肝臓の調達は、通常、制限苦境です。さらに、肝臓の処理はバックかなりのドローなどの汚染に関連する要因を導入することがあります。いくつかの針の呵責後にリークしているようにラテックスの手袋のための傾向は、練習セッションの間に潜在的な混乱につながる。 我々は小説ですが、市販のシリコーンゴムのコーキングや他の容易に利用できる材料でバナナの小片（またはソーセージ）を埋め込む簡単な方法を報告し、説明します。 FNABファントムは、このように臨床の現場での病変の実際のFNABの手順に相当する組み込み試料から物質の吸引を可能にする真空シールを保持します。このビデオでは、我々はFNABファントムの病変を作り、FNABの手順を練習の手順を示しています。また、塗抹標本と染色を含む取得した検体についての簡単な処理では[2,3]を示しています。 コー​​キングが硬化に時間がかかるので、ファントムの病変は、前の練習セッションに24〜48時間程度を事前に準備する必要があります。ファントム病変を使用する準備匹敵するが、商業のソース（FNAのソース、米国）から入手することができる。 FNAB技能を練習するためのファントム病変は、前臨床の現場で患者のFNAB性能の先頭に住民や仲間を訓練するために使用されることがあります。

調製と細針吸引生検を実施するためにファントム病変を使用して

Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies

現在、住民や仲間を含む医療従事者は、細針吸引生検（FNAB）の手順を練習するのに適したファントムのモデルを持っていない。 FNABを実施するための新鮮な牛の肝臓を含むラテックス手袋で構成されるモデルは過去に、我々は標準化された。しかし、このモデルでは、新鮮な牛の肝臓の調達が最も困難な側面であると、整理し、短期間で準備することは困難である。汚染関連の問題で肝臓の処理は、バックもかなりのドローです。さらに、いくつかの針の後の手袋材料漏れが混乱を生じると、渡します。 我々は、市販のシリコーンゴムのコーキングでソーセージやバナナの小片を埋め込む新たな単純な手法を確立した。このモデルは、臨床腫瘤病変の実際のFNABの手順に似て、埋め込まれた試料からの物質の真空シールと誤嚥の保持が可能になります。 針ハブに吸引された物質は、塗抹標本と染色で追加の能力を促進する、実際のFNABの手順の実行中に調達標本に似て処理することができます。

研修生による細針吸引生検（FNAB）の練習は、簡単に利用できる、適切な病変の不足のため、比較的困難です。 FNABの手順を実施するためのAVファントムの病変とマスタリングの能力の調製は比較的容易である。

現在、レジデントやフェローを含む医療従事者は、細針吸引細胞診（FNAB）を練習するための適切なファントムモデルを利用できていません...

ファントム病変を準備するために、ベースプレートとして使用する6×6インチの段ボールを切ります。ベースプレートを0.5インチの厚さのコーキング剤で覆います。次に、2.5インチの長さに切ったバナナを、コーキング剤の中にゆっくりと押し込みます。バナナをファントム病変のコアとして使用します。気泡が入らないようにして、コアをコーキング材に完全に埋め込みます。コアをラップで覆い、滑らかな山形に整えます。コーキング材が硬くなり、硬化した後は、暖かい場所でコーキングマウントをキュアさせます。プラスチックラップを剥がし、バナナの芯から検体を回収するFNA（細針吸引細胞診）の習熟トレーニングと、塗抹標本作成の練習を行います。私はウィスコンシン大学医学部病理学教室細胞病理学部門のVino博士です。そして、私は同部門の細胞病理学フェローのGeorge Varszegi博士です。本日は、入手しやすい簡単な器具と材料を用いて、FNAV（細針吸引細胞診）の手技習熟のための練習用擬似病変を調製する方法を実演します。一般的に、この手法は細胞病理学のフェローや病理学のレジデントに細針吸引生検の手順を導入するために用いられます。トレーニングが進むにつれ、フェローやレジデントは指導医の監督下で、実際に触知可能な病変に対して細針吸引を行い、技術を磨いていきます。それでは、始めていきましょう。FNAB（微細針吸引細胞診）の練習セッションの1〜2日前に、擬似病変を準備します。開始前に、段ボール、コーキングガン、皮をむいていないバナナ、およびサランラップをベンチ上に用意してください。ファントム病変を準備する最初のステップは、ベースプレートとして使用する6インチ四方の段ボールを切ることです。次に、ファントム病変のコアとして使用する、約2インチの長さのバナナの断片を切ります。ファントム病変のコアが準備できたら、コーキングガンを使用して、ベースプレート上に約0.5インチの厚さのコーキング剤を塗り広げます。ファントム病変コアを濡れたコーキング剤に軽く押し込みます。次に、ファントム病変コアの上にさらにコーキング剤を加え、完全に埋め込みます。手袋を着用し、コーキング剤の中に気泡が入らないように注意してください。コーキング剤を疑似病変コアに手で塗り広げ、完全に囲まれていることを確認します。次に、盛り上がった部分を6×6インチのプラスチックラップで覆い、滑らかな凸形状に整えます。コーキング剤の盛り上がりを暖かい場所に置き、使用したコーキング剤のブランドで推奨されている硬化時間よりも、さらに6〜8時間長く硬化させます。コーキング剤は空気にさらされることで硬化します。盛り上げた状態のまま、華氏60度以上の室温で放置するか、または37℃でインキュベートして硬化を早めることができます。硬化後、コーキング剤が固まったところで、プラスチックラップを簡単に剥がすことができます。FNAファントム病変が、FNAの手技練習に使用できる状態になりました。ファントム病変を準備し、硬化させたので、これを用いてFNABの手技を練習できます。ここでは機能性バルブ付きの組織採取器を使用していますが、基本的にはどのようなFNAシステムでも使用可能です。THFBは、検体を穿刺するための針、吸引物を回収するためのニードルハブ、デバイス内部の圧力を制御するためのシリンジ、およびニードルハブとシリンジを接続・遮断するためのバルブで構成されています。まず、ニードルハブとシリンジを接続するバルブを閉じた状態で、FNAアセンブリを準備します。次に、シリンジピストンを引いて、シリンジバレル内に真空状態を作り出します。次に、針先を病変部に挿入します。バルブを開いて、針のハブをシリンジバレル内の真空状態に接続します。真空によって、病変部から針、および針のハブへと物質が吸引されます。病変部で針を前後に動かし、細胞成分の代表的なサンプルを吸引します。真空状態を維持したまま、針を異なる方向に病変部へ挿入し、異なる領域からサンプリングを行います。サンプリングが完了したら、バルブを回転させてシリンジバレル内の真空を解除し、バルブを開いて外気圧と等しくします。次に、バルブを回転させ、外部およびシリンジバレルから切り離します。バルブを閉じた状態で、病変部から針を抜除します。バルブを閉じたままにすることで、ハブ端にわずかな陰圧が維持され、毛細管現象によって検体が病変部へ逆流することを防ぐことができます。ピペッティングの原理と同様に、組織サンプルはニードルハブ内に保持されます。ディスロッジからニードルを抜き、吸引した内容物をガラススライド上に滴下して直接塗抹標本を作成します。スライド上に吸引物を1滴滴下したら、吸引物の性質に応じてさまざまな方法で展延させますが、通常はここで示す方法を用いて2枚のスライド間でサンプルを展延させます。実際の検体において血液による希釈が見られる場合は、2枚目のスライドガラスを重ねる前に、スライドを傾けて余分な血液を排出してください。リンパ増殖性病変などの、微小断片を含まず主に懸濁液である吸引物の場合は、1枚のスライドの端を用いて別のスライド上にリブ状の塗抹を作成するリビング法（ribbing method）、または1枚のスライドを用いて2枚目のスライド上に薄層を作成する塗抹法（spreading method）で塗抹することが可能です。塗抹標本の作成後、さまざまな方法で処理および固定を行うことができます。異なる染色法を用いる場合、最も適切な方法は、すべての塗抹標本を1〜2分以内に迅速に風乾させることです。厚みがある塗抹標本や水分が多い標本の乾燥を早めるには、スライドを空気中で横に動かすか、ヘアドライヤーまたは電池式の携帯扇風機を使用することが推奨されます。扇風機を使用する際は、特に感染が疑われる病変においてエアロゾルが発生しないよう注意してください。塗抹標本が乾燥した後は、実験目的に応じて適切に染色してください。ここでは、Romanowski染色法の一つであるD quick stainを用いた、自然乾燥させた塗抹標本の染色の手順を実演します。メーカーの指示に従ってください。パパニコロウ染色された塗抹標本のこの例に示すように、自然乾燥させることで染色の鮮明度が大幅に向上することがわかっています。これらの初回染色の分析により、選択的な細胞ブロック電子顕微鏡検査や微生物培養など、追加で実施すべき検査を決定します。擬似病変での習得に成功すれば、病変組織の適切な吸引が可能になります。本例では、バナナのペースト状の植物組織を使用します。この材料をガラススライド上に広げ、塗抹および染色の練習を行うことができます。以上で、FNAB（細針吸引細胞診）の習熟トレーニングに用いるファントム病変の作製方法について説明しました。本実験を行う際は、コーキング剤が凝固するまでに時間を要するため、習熟度テストのセッションの少なくとも36時間前までにファントム病変を作製しておくことが重要です。また、FNAV（細針吸引）の手技を行う際に、最適な吸引物を採取するためには、適切な順序で真空状態を形成し、また解除することが重要なポイントとなります。以上です。ご視聴ありがとうございました。練習に励んでください。ありがとうございました。

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