Name: 多孔質媒体中の微生物トランスポート研究のためのシンプルなマイクロ流体システム：マイクロワールドでのウィンドウ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-03T16:11:00.000+00:00
Duration: 14 min 25 s
Description: 学ぶ多孔質媒体中の微生物トランスポートのためのマイクロ流体システム構築法。GFP発現Vibrio細菌を用いた輸送実験で生息地構造と流動条件の影響を可視化し、環境修復への応用基盤を提供する。

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この研究は、統合バイオシステム研究と教育のためのヴァンダービルト大学（VIIBRE）によって、およびサールシステムバイオロジーとバイオエンジニアリング学部研究経験（サールSyBBURE）で、国立科学財団から＃0649883助成金によって支えられている。

I.マイクロ流体デバイスの作製<ol><li>マイクロ流体デバイスを作成する最初のステップは、コンピュータ支援図面（CAD）プログラムで、デバイスの2次元レイアウトを描画することです。このようなCleWinまたはFreehand、CorelDRAWーなどの、私たちはAutoCADを使用しているが、他の描画プログラムもご用意しています。 </li><li>次のステップは、フォトリソグラフィマスクを製造することです。デバイスの寸法、必要な分解​​能と予算に応じて、これらのマスクは直接、高解像度のプリンタを使用してオーバーヘッドが透明に写真フィルム上に作成された、あるいは印刷された、クロム（最高解像度、高コスト）で作製することができます。ここでは、アドバンス模本（株）、マサチューセッツ州ノースアンドーバー製のCrマスクを使用している。 </li><li>次のステップは発生レリーフ型を作成するために感光性エポキシの上にマスクからパターンを転送することです。 <ol><li>最初に、負のSU8フォトレジストの層が所望の厚さのシリコンウエハー上にスピンし、過剰の溶媒を揮発させる焼成する。フォトレジスト製剤およびスピン速度は堆積層の厚さを制御します。 </li><li>その後、パターンは、マスクを通してUV光の予め決められた用量にさらされています。ポスト露光ベーク架橋それらを不溶性フォトレジストコーティングの光にさらされる領域を、。 </li><li>次は、未露光レジスト開発のステップは、正の発生レリーフ構造マスターと呼ばれるがままに、化学物質の開発者で除去されています。 </li><li>第三ベーキングステップは、ハードベーク工程は、さらに構造を修正するためのオプションと呼ばれる。 </li></ol></li><li> PDMSモールド<ol><li>我々は、マイクロ流体デバイス1のレプリカの成形用のシリコーンエラストマー、ポリ（ジメチルシロキサン）を使用してください。最初に、基材は、硬化剤で10:1の重量比で混合し、このようなペトリ皿などの浅い容器にカビに注ぎ、そしてすべての目に見える泡がなくなるまで、真空下で脱気する。 </li><li>未硬化PDMSとマスターを65で4時間以上のために慎重に水平にオーブンで発生するポリマーの架橋のためのCに配置されます。 </li><li> PDMSを固化された後、成形されたセクションは、ペトリ皿から切り出しています。穴が完成したデバイスのマイクロ流体空間をアクセスするために、デバイスの上部からパンチされています。 </li></ol></li><li>ガラスへの添付<ol><li>クリーンPDMSは、不可逆的に酸素プラズマに暴露することによりガラスをきれいに接着されている。最初に、成形し、パンチPDMSときれいなガラスのスライドは、プラズマクリーナーに接着面を上に配置されます。我々は、PDC - 32G Harrickプラズマクリーナーを使用。 </li><li>チャンバーを閉じた後、オペレータは、無線周波数またはRFソースして真空ポンプをオンにして。プラズマは、自己室でわずかに紫色の輝きによって明らかなように、チャンバ内に点火されます。 </li><li> 30秒間プラズマに暴露した後、RF信号源とし、真空ポンプがオフになっています。 </li><li>迅速に、スライドガラスとPDMS装置は、チャンバーから取り外し、直接接触（ダウン成形PDMSの表面側）に取り込まれます。これは不可逆的な結合を形成し、また、表面特性を親水性になります。 </li><li>必要に応じて、異なる表面化学を吸着または共有結合によって表面上のタンパク質の固定化によってPDMSを達成することができます。 </li><li>デバイスは、その後脱イオン水、増殖培地、または毛管力や注射器を持つ穏やかな圧力を使用することにより、人工的な地下水などの流体を充填することができる。 </li></ol></li></ol> II。重量分析によるマイクロ流体デバイスのフローの定量化<ol><li>デバイス内の圧力駆動流のキャリブレーションを行うには、微細構造のフローセルは、最初にDI水でプリロードされた。 </li><li>このようなプラスチック製注射器またはフローモジュールとして液体を含むリザーバは、（図1に示す）も上流の吸気口に接続されていて、貯水池内の流体の高さは十分下流での高さ以上に維持される。 </li><li>サンプルは定期的にも廃棄物を回収し、化学天秤で秤量する。 </li><li>合計時間と合計量をプロットする曲線の傾きは、平均体積流量（図2）を与える。我々は、圧力ヘッドの幅広いと異なる圧力維持システムのための再現性、線形平均速度を発見した。 </li></ol> III。流れの可視化、速度のマッピング、および疎水性/親水性相互作用<ol><li>モデルのキャリブレーションの場合は、両方カルボキシYGと平野YG表面に3μmの蛍光ラテックスビーズはPolysciences社から入手した、0.01％の固形分の濃度に純水で希釈した。 </li><li>生息地を流れるビーズはMightex BCE - B013 - Uモノクロカメラを搭載したツァイスAxiovert 25蛍光顕微鏡で可視化した。 </li><li>個々のフレームは、矢継ぎ早に取り込まれ、ImageJのソフトウェアパッケージ（図3）と映画に組み立てられた。 </li></ol> IV。細菌の増殖とトランスポートのモデリングのためのマイクロ流体デバイス（EcoChip） <ol><li> ビブリオ 。 GFP館は、非病原性緑色蛍光タンパク質を発現する生物は約10 9細胞/ mlの濃度にルリア-ベルターニ培地で14時間増殖させた。 </li><li>増殖培地中の細菌は、EcoChipデバイスに導入し、デバイスを植民地化し、19時間一晩フロックと映画を確立させた。 </li><li>その後、増殖培地をウェルから除去し、生息地のすべては、細菌の密度が異なるが、異なる生息地に残っていたように（ASWのレシピのためにWangら2を参照してください）人工海水でフラッシュした。 </li><li>遅い流れの条件を3他の生息地内で維持されたまま一生息地は、フロー制御なしで密閉保管した。 </li><li>細菌増殖の蛍光灯や白色光の画像は数日の期間（図4）ごとに15〜20時間を取られました。 </li></ol> V.代表の結果フローモジュールは、複数の生息地を介してフローを規制し、配布するための簡単​​な手段を提供します。重量分析は、生息地と、入力と出力の井戸との間の圧力差の油圧抵抗に依存して生息地の構造、フロースルー率を決定するために簡単で直接的な方法であることが判明した。ビーズ流動実験のために我々はuncarboxylatedビーズ（図2）については、デバイスの面ではるかに大きいビーズ蓄積を観察している。さらに、大径のビーズ、6と10 mmは、はるかに小さい孔の開口部に運びとなり、デバイスに蓄積し始める可能性が高かった。速い流速は粒子保持と同調して減少。 細菌増殖の実験中に、流れの条件の影響は明らかである。連続的な剪断力は、細菌が一緒に集約し、フォームのフロックの原因、および個々の細胞として記載されていない。大規模な細菌フロックの輸送は、巨視的な系で勉強することは極めて困難である重要な環境プロセスです。 <img src="/files/ftp_upload/1741/1741fig1.jpg" alt="図1"> 図1。フローモジュールの機能と動作を示す回路図。 <img src="/files/ftp_upload/1741/1741fig2.jpg" alt="図2"> 図2。異なるカラムの高さの重量分析により決定される構造化された生息地を通過する流れの速度。列の高さの比率：60 / 40 = 1.5、決定した流量比：1.04 / 0.71 = 1.46。 H = 40 mmの結果、流速はV = 0.71μL/分であり、Hのために= 60 mmはV = 1.04、μL / minです。推定平均線速度3.1 mm / sにし、それぞれ4.6 mm / sになります。 <img src="/files/ftp_upload/1741/1741fig3.jpg" alt="図3"> 図3とし、カルボキシル化は、構造化された生息地を流れることなく、3umラテックスビーズの輸送。 <img src="/files/ftp_upload/1741/1741fig4.jpg" alt="図4"> 図4。細菌の増殖と遅い流れの存在下で種の密度の関数としてのバイオフィルム形成の変化。

<ol><li>Whitesides, G., Ostuni, E., Takayama, S., Jiang, X., Ingber, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soft+lithography+in+biology+and+biochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Soft lithography in biology and biochemistry.</a> Annual Review of Biomedical Engineering. 3, 335-373 (2001).</li>
<li>Wang, W., Shor, L. M., LeBoeuf, E. J., Wikswo, J. P., Kosson, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mobility+of+protozoa+through+narrow+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+and+Environmental+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Mobility of protozoa through narrow channels.</a> Applied and Environmental Microbiology. 71, 4628-4637 (2005).</li>
</ol>

EcoChipシステムは、個々の実験のニーズに適応可能です。新しいマスターは、比較的容易に作成することができます、とマスターが作製されれば、必要に応じて、追加の正確に複製されたデバイスは、キャストすることができます。フローモジュールは、使用が簡単で、特別な装置や複雑な接続を必要とせず、シンプルな立ちヘッド圧力駆動流のシステムとしてモデル化することができます。この作品への追加の拡張が進行中であり、フミン酸のコーティングされたチャネルを作成し、体系的に流れる流体の水化学を変化させることが含まれます。このアプローチを使用して、多孔質媒体の表面と成長と輸送現象と細菌のミクロスケールの相互作用を直接観察し、体系的に検討することができる。

<table><tbody><tr><td>PDMS</td><td>Dow Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SU8-2025</td><td>MicroChem Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>蛍光ビーズ</td><td>Polysciences, Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

多孔質媒体中の微生物トランスポート研究のためのシンプルなマイクロ流体システム：マイクロワールドでのウィンドウ

Window on a Microworld: Simple Microfluidic Systems for Studying Microbial Transport in Porous Media

多孔質媒体中の微生物の増殖とトランスポートは、地下水および地表水、環境での栄養素のリサイクルだけでなく、直接のための飲料水に病原体の伝播の品質にとって重要な意味を持っている。天然多孔質媒体は複雑な物理トポロジ、様々な表面化学、栄養素と電子受容体の動的な勾配、および微生物の斑状分布で構成されています。これらの機能は、解釈が難しい微生物移動のマクロスケールの調査の結果を作る、ミクロンの長さスケールにより大きく変化すること、および機構モデルの検証は困難。ここでは、シンプルなマイクロ流体デバイスは、微細構造の生息地、微生物の相互作用を可視化するために観測された現象に影響を与える主要なプロセスを識別するために、そして体系的に予測モデルを検証するために使用することができる方法を示します。シンプルで使いやすいフローの細胞が透明な、生体適合性と酸素透過性材料ポリ（ジメチルシロキサン）で作られました。フォトリソグラフィーの標準的な方法は、微細構造のマスターを作るために使用され、レプリカの成形は、マスターから微細構造フローセ​​ルをキャストするために使用されました。フローセル室の物理的な設計は、実験的な要件に適応できる：マイクロチャネルは、単純な線形の接続から、複雑に変化することが2μmと小さいフィーチャサイズとトポロジ。私たちのモジュラーEcoChipフローセル配列は、重力駆動型フローモジュールで同一のチャンバーとフロー制御の数十しています。我々は、表面化学、流体特性、または微生物集団の特性の影響を調査している間EcoChipデバイスを使用することで、物理的な構造と圧力ヘッドは一定に保たまたは体系的に変えることができることを示している。非病原性を用いた輸送実験を通じ、緑の蛍光タンパク質発現<em&gt;ビブリオ</em&gt;細菌株、我々は、生息地の構造、フローの条件、および基本的な輸送現象に関するinoculumsのサイズの重要性を示し、そしてリアルタイムの粒子スケールの観測と、マイクロフルイディクスは、隠された世界の魅力的なビューを提供することを示している。

マイクロ流体デバイスは、リアルタイムでかつ適切な物理的なスケールで複雑な自然のプロセスを可視化するために使用することができます。我々は地下で細菌の増殖と輸送を研究するための自​​然な多孔質媒体の主要な機能を模倣する簡単なマイクロ流体デバイスを開発しました。

多孔質媒体における微生物の増殖および輸送は、地下水および地表水の水質、ならびに栄養塩の循環において重要な意味を持ちます。

エコチップデバイスを用いることで、物理的構造および圧力水頭を一定に保持、あるいは変化させられることを実証します。非病原性の緑色蛍光タンパク質発現VIO細菌株を用いた輸送実験を通じて、表面化学、流体特性、あるいは粒子や微生物の特性による影響を系統的に調査する一方で、基本的な輸送現象における生息地構造、流動条件、および接種量の重要性を明らかにします。マイクロ流体ソフトウェアにより、隠れた世界の説得力ある視覚化を実現します。こんにちは。ヴァンダービルト大学、ヴァンダービルト統合バイオシステム復元教育研究所のディミトリ・マーカーです。そして、Viro Laboratoriesの研究開発エンジニアのデビッド・シェイファーです。こんにちは。コネチカット大学、環境科学・工学センター、化学材料・バイオ分子工学科のレスリー・ショウです。そして、Zebraのアディド・ディコットです。本日は、基礎的な環境科学および工学研究のためのモジュール式マイクロ流体ハビタットアレイを作製する手順をご紹介します。当研究室ではこの手法を用いて、森林媒体における微生物の輸送相互作用にマイクロメートルスケールの構造が及ぼす影響を調査しています。それでは始めていきましょう。マイクロ流体デバイス作製の最初のステップは、コンピュータ支援設計（CAD）プログラムを用いて、デバイスの二次元レイアウトを作成することです。本手順ではAutoCADを使用しましたが、Clue-inやCorelDRAWなどの他の作図プログラムも利用可能です。このソフトウェアを使用することで、個々の機能部位を5 µm未満の解像度で定義しながら、マクロスケールの領域全体にわたって物理構造を忠実に再現することができます。CAD図面からフォトマスクを作成します。ここでは、マサチューセッツ州北端のAdvanced Reproductions Corporation社製のクロムマスクを使用します。マイクロ流体デバイス製作の次の数ステップは、マスターを作成するためにクリーンルーム内で行います。クリーンなシリコンウェハーに、スピンコーターを用いてフォトレジストを塗布します。まず、ウェハーをスピンコーターのプラットフォームに固定し、数グラムのSU 8 20 25フォトレジストをウェハーの中央に滴下します。次に、ウェハーを500 RPMで15秒間の初期展開サイクルで回転させ、続いて4, 000 RPMで35秒間の薄膜コーティングサイクルを行います。スピンコート後、ウェハーを95 °Cのホットプレートに10分間置き、過剰な溶媒を揮発させます。ウェハー準備の最終ステップは、エッジビードの除去です。これは、ウェハーを再びスピンコーターに戻し、コーティングされたウェハーの外縁にSUAエッジビード除去剤を絶えず塗布することで行います。次のステップは、UV光への選択的な露光によりフォトレジストにパターンを形成することです。まず、コーティングしたウェハーを平らな面に置き、その上にクロムマスクを直接重ねます。ルビリス赤色マスキングフィルムにより、目的の領域外へのパターンの転写が遮断されます。次に、スポット照射システムを用いて、マスクを通してコーティングされたウェハーに300 mJ/cm²のUV光を照射します。最後に、ウェハーを95 °Cで15分間ベークし、光照射されたフォトレジスト領域を架橋させて不溶化させます。マスター作成の最終ステップは、架橋されていないフォトレジスト領域を除去し、隆起したリリーフ構造を残すことです。まず、ウェハーを再度スピンコーターに戻し、現像液を塗布します。現像液をコーティングしたウェハー上に約5分間放置した後、スピンオフさせることで、ウェハー上に明確なパターンを形成させます。残っている残渣は、回転しているウェハーにイソプロピルアルコールを噴射して洗浄し、取り除きます。この工程では、2200 RPMの回転速度で約5～10秒間スピンさせます。最後に、完成したマスターを窒素ガス流で乾燥させ、デバイスの成形に使用するまでディッシュに保存します。マイクロ流体デバイスの作製には、シリコーンエラストマーのポリジメチルシロキサンを使用します。まず、ベース材料と硬化剤を重量比10:1でプラスチックカップに入れます。次に、混合物を混合します。アンディはThinky AR 100コンディショニングミキサーを使用して脱泡を行いました。サイクルが完了したら、液状のPDMSをマスターの上に均一に注ぎます。次に、マスターと未硬化のPDMSが入ったディッシュを真空チャンバーに入れ、脱気させます。ポリマー内の気泡がほぼすぐに現れます。気泡がすべて消失するまで脱気させます。ポリマーの架橋を完全に進めるため、ディッシュを65 °Cに設定した水平なオーブンに少なくとも4時間入れます。その後、硬化したPDMSを再利用可能なマスターから慎重に取り出します。まず、メスを用いてパターン領域の十分外側で4つの辺を切り、ピンセットでパターンウェハからデバイスを剥がします。必要に応じて、ハサミでデバイスの端をトリミングしてください。また、成形されたPDMSデバイスの一部を、残りの部分から切り離すことも可能です。次に、PDMSにアクセスホールを穿孔します。ここでは、小さなアーバーに装着された、市販のさまざまなサイズのバイオプシーパンチを使用します。切り出されたPDMSコアは、ピンセットを用いて除去します。最後に、トリミングおよびパンチ加工を施したデバイスを、イソプロピルアルコールとフォームチップ付きポリプロピレン綿棒を用いて洗浄します。デバイスを窒素で乾燥させた後、オーブンに入れ、溶媒の残留物をすべて除去します。マイクロ流体デバイス作製の最終ステップは、PDMSをガラススライド基板に接合し、最初に液体を充填することです。PDMSデバイスとガラススライドを、接合面を上に向けてプラズマクリーナー内に配置します。本実験では、Herrick社製PDC 32 Gプラズマクリーナーを使用しています。真空状態になり、青紫色のプラズマが確認できたら、タイマーを30秒に設定します。プラズマ発生装置の電源を切ります。チャンバーを再加圧し、デバイスとスライダーをチャンバーから取り出して、接合面同士を接触させます。活性化されたコンポーネントをチャンバーから取り出す際は、表面の活性状態を維持するために、迅速に作業することが重要です。軽く圧力をかけることで、良好な接着を確保します。ピンセットで角を引っ張り、接着の質を確認します。その後、親水性の内部にバッファーなどの水溶液や脱イオン水を容易に充填できます。各ソースウェルおよび対応する微多孔流路セルに水を注入します。すべてのチャンバーが満たされたら、蒸発を抑制し無菌状態を維持するために、硬化させたPDMSの薄い層をデバイス全体に被せます。デバイス内の圧力駆動流を校正するには、微細構造流路セルに脱イオン水をプリロードし、流体供給インターフェースおよび無菌シールとして機能するフローモジュールをデバイスの上部に配置します。このフローモジュールは、単独で使用するか、プラスチック製シリンジなどの外部液体貯蔵容器に接続して使用できます。プラスチック製シリンジなどの液体貯蔵容器、またはフローモジュールを上流側の入口に接続してください。貯蔵容器内の液位が下流側の高さよりも常に高くなるように維持してください。上流のリザーバーと各下流の出口ウェルとの高さの差が、デバイスを通過する流量を定量化するための圧力駆動流の駆動力となります。下流のウェルから一定の間隔でサンプルを回収するために、鈍端の25ゲージ針を使用します。例えば、サンプル回収の間隔を15〜20分とし、サンプル回収時の実際の経過時間を正確に記録します。サンプリング前後のシリンジの重量を分析天秤で測定します。累積体積を累積時間に対してプロットし、その傾きを平均質量流量とします。入口リザーバーの断面積を出口ウェルよりも大きくすることで、流体がデバイス内を移動する際の流量の著しい変化を防いでいます。Y軸にサンプリング量を、X軸にサンプリング時間をプロットしてください。Excelのようなシンプルなグラフ作成プログラムを用いて直線の傾きを求め、その傾きを平均体積流量として使用します。流れの可視化および表面相互作用の研究には、カルボキシ基、YG、およびプレーンYG表面を持つ3 µMの蛍光ラテックスビーズの希釈溶液を使用します。まず、脱イオン水を用いて、固形分濃度0.01%のビーズ溶液を調製します。溶液を上流のウェルに注入し、フローモジュールを再び接続します。ビーズの流れを1時間にわたって観察し、MITx BCEB 0 1 3 Uモノクロカメラを搭載したZeiss AIOt 25蛍光顕微鏡を用いて、約10分ごとに記録します。蛍光照明および透過光照明を用いて、個々のフレームを連続的に素早くキャプチャし、Image Jなどのソフトウェアプログラムを使用して動画にまとめます。ビーズと構造体の両方が確認できます。透過光を遮断すると、明るい蛍光ビーズのみが見えます。底面に堆積した、またはコレクターに付着した静止ビーズがデバイス全体にわたって認められます。生菌を用いた実験では、Vibrio属などの非病原性緑色蛍光タンパク質発現菌などの培養物を準備します。まず、深冷凍保存していたストック培養物を解凍します。滅菌済みLB培地を入れたフラスコに、このストック培養物を接種します。使い捨ての接種ループを用いて、フラスコを振とうしながら一晩培養し、細胞濃度が約10⁹ cells/mLの定常期培養液を得ます。用途に応じて、細菌の初期濃度をより正確に定量する場合もあります。滅菌バッファーを満たしたマイクロ流体デバイスを準備します。次に、上流側のウェル内の滅菌液体を排出し、20 µLの細菌培養液に置き換えます。ピペットを用い、出力側のウェルをシリンジで緩やかに吸引しながら、細菌をデバイス内に播種します。インキュベーション後、コロニー形成後の各ウェルの蛍光強度を定量することで、ウェル内の細菌量を決定できます。上流の入口ウェルを前述と同様に排出し、25 pptの塩濃度でフラッシュしたバッファーに置き換えます。シリンジを用いて上流のウェルに人工海水を緩やかに加圧し、各フローセルを20から40 µLの緩衝液で洗浄します。これは、初回洗浄後のフローセルの微小流体土壌部分の空隙容量の約100から200倍に相当します。多孔質媒体への細菌の長期灌流は、前述と同様にフローモジュールを使用して行います。細菌の増殖と輸送の蛍光画像および白色光画像を、経時的に測定することができます。本実験では、Q imaging ink社製のカラー5冷却CCDカメラを用い、7日間にわたり15〜20時間ごとに画像を撮影しました。当装置は、物理的な生息域構造が、原生動物による捕食から細菌を保護する避難所としてどのように機能するかという影響を調べるためにも利用可能です。こちらは、微多孔流路セル内の細菌と、その細菌を捕食している、より大型の繊毛原生動物であるeuloがデバイス内で確認できる様子です。マイクロ流体デバイス内の流体フローを解析した結果、40 millimeterの圧力水頭における平均流速は0.71 microliters per minuteであることがわかりました。圧力水頭を60 millimetersに増加させると、流速は比例して1.04 microliters per minuteまで増加しました。さまざまな表面化学特性を持つビーズをデバイスに使用した際、カルボキシ化されていないビーズがデバイス表面に多く蓄積することが観察されました。一方で、直径6〜10 mmのビーズは、より小さなポア開口部に捕捉されやすくなる傾向がありました。より高い静水圧によって流速が速くなると、ビーズの保持率と捕捉率が低下しました。これは、eco chippマイクロ流体デバイスを用いて細菌の増殖を解析する場合に予想される結果と一致しています。デバイスの異なるセクターにおいて、画像強度の定性的な差が認められます。蛍光強度は、チャネル内の微生物バイオマスの指標として定量化することが可能です。現在進行中の実験では、低流量条件下での連続的なせん断力が、これらの画像で明らかなように、細菌の凝集およびフロック形成を引き起こしていると考えられます。ここまで、シンプルなマイクロ流体デバイスを作製し、粒子サイズの測定、多孔質媒体中の衝突輸送の解析、あるいは微細構造生息地における微生物相互作用の調査に活用する方法について説明しました。フローセルを用いた研究を行う際は、ビーズの浮力ならびにコロイドおよびコレクターの表面化学を考慮することが重要です。マイクロ流体領域にスケールダウンすると、表面効果が観察される現象を支配することがあります。実質的に、あらゆる物理的構造をマイクロ流体フローセルの設計に組み込むことが可能です。以上です。ご視聴ありがとうございました。皆様の実験の成功をお祈りいたします。

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