Name: アミロイドのための前方脂肪パッドのFNAの実行と処理 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-30T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: 学ぶ前方脂肪パッドの細針吸引生検と検体処理法。局所麻酔を用いて最小侵襲でアミロイド症を診断する信頼性の高い手法です。正確な診断のための標本処理手順も解説します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

我々は、FNABの手順のデモをグラフ化する映像の間に援助のために氏ボニーPhetteplace、RNに感謝。

はじめ全身性アミロイドーシスは、総称してアミロイドと呼ばれる様々なタンパク質の細胞外沈着を参照している非常に可変性疾患です。 βプリーツ構成でこれらのアミロイド線維の沈着が関与する臓器に応じて様々な臨床症状につながる。このような心臓、肝臓、および/または腎臓などの重要臓器の関与がある場合に全身性アミロイドーシスの臨床的に最も関連する症状が記載されています。歴史的に、これらの浸潤臓器は、アミロイドの存在を実証するために生検される。これらの適度侵襲的処置は出血を含む重大なリスクを運んだ。脂肪パッドの吸引は、以来、全身性アミロイドーシス1のアミロイドの検出のための信頼性と非侵襲的方法を提供することが示されている。この手順では、小さな血管の壁2に乏しいアミロイドの沈着を評価するための線維脂肪の組織を取得するために局所麻酔下で前腹壁の皮下脂肪の脂肪吸引に本質的に同等です。 組織におけるアミロイドの同定のための最も頻繁に使用方法は、コンゴレッド染色した切片は、偏光顕微鏡3で視覚化するときに見られる特徴的な青リンゴ色の複屈折パターンのまま。脂肪パッドの吸引が行われるときは、コンゴレッド染色は、直接塗抹スライドまたは吸引脂肪組織の細胞ブロック標本のどちらかで行うことができます。しかし、アミロイドーシスの初期段階で患者が大幅に4,5コンゴ赤染色細胞のブロックのセクションの感度を減少させるわずかなアミロイド沈着を、持っている。電子顕微鏡による脂肪パッドの吸引の超微細構造評価は、より良い再現性と感度の向上4とを有している。したがって、セルブロックの両方を調製するため、電子顕微鏡2を実行するためのすべての脂肪パッドの吸引を提出することをお勧めします。 脂肪パッドの吸引は、比較的低コストおよび全身性アミロイドーシスの診断に組織を得るための非侵襲的方法である。この記事では、電子顕微鏡によるコンゴレッド染色と微細構造評価の両方に検体を提出するサンプルの処理についての詳細と一緒に脂肪パッドの吸引の手順を説明します。このビデオでは、我々は最適な診断材料を取得するために、この再現性と簡単な手順を示しています。 1。前歯部脂肪パッドのFNAの実行ローカルエリアのA.の麻酔（図1＆2） <ol><li>アルコール綿棒または特定の機関によって好ま皮膚洗浄剤を使用して、正中線と臍下（図1）の外側腹部の下腹部の領域で皮膚を洗浄。 </li><li>としてマーキングペンで図1に示す2 × 2インチ約菱形形状の領域をマークします。 </li><li> 1％の吸引約10 mLを18G針でリドカイン。 25G 1を取り付けます½シリンジにインチ針を。液体を分配しても気泡が存在しないされるまでプランジャーを押しながら直立シリンジをタップして、任意の閉じ込められた空気を削除します。 </li><li>図2に示すように、既にマーク菱形領域の境界に沿って麻酔する。ちょうどポイントで皮膚の下に25G針を挿入して起動し、慎重にX.を使用すると、容器内にないことを保証するために注射器のプランジャーを後方に引いて指すように、皮下針を押してください。その後徐々に針は、針がポイント（図2A3）で皮膚から出てくるさせることなく参照するように撤退しながらリドカインの2.5mLの（10 mLシリンジのリドカインの¼約）まで潜入するためにプランジャーを押してください。針でも、皮膚の下に点Y（図2A4）に向かって方向を変更するとポイントY（図2B1）に皮下針を押してください。以前と同じようにゆっくりとポイントを介して針を引き出しながら、針が血管内にないことを確認し、リドカインの約2.5 mLを分注する（2B4〜図2B3）。 YにXとB（2D4〜図2C1）に点Bから点Bと調剤リドカイン皮下から始まる同様の手順を繰り返します。呵責からの出血を防ぎ、無菌ゲージピースの会社のアプリケーションによるB。 </li><li>これで、面積は軽く、隣接する無麻酔皮膚と比較することによって、先端/綿のガーゼ片のコーナーで麻酔菱形の中で皮膚に触れることによって麻酔であることを確認することができます。 </li></ol> B.は、脂肪パッドの吸引（図3）の実行 （前の脂肪パッドの吸引のパフォーマンスへの局所麻酔の適用は、地域や個人の好みに応じて、バイパスされる可能性があります。前方脂肪パッドの吸引のための適切に行わFNABの手順が1つの刺し傷で完了することができます。しかし、個々の患者の痛みのしきい値に応じて、皮下脂肪組織に前後に18G針を操縦するのは比較的distresです歌う。ここで説明する麻酔の方法は、25G針で2つだけの呵責に効果を発揮し、手順に耐性が向上して痛みをaverts。） <ol><li> 10mLのシリンジに18G 1 ½インチの針を組み立てます。適切なアプリケーションと真空のリリースのための注射器のグリップ（"FNABグリップ/銃"）で注射針を装着してください。 </li><li>クレンジングと麻酔菱形の領域（図3a）内に皮下脂肪に針の先端を挿入します。 </li><li>完全真空（図3b）を生成するために皮下組織に挿入された針と注射器のプランジャーを引っ込める。 </li><li>真空を維持し、皮下脂肪（3iの〜図3C）への様々な方向に前後に針を操縦。各ストロークは、針が皮膚から出てくるさせることなく、選択された針の長さをできるだけ長くしてください。最大のサンプリングは、各ストローク方向（図3iを）変えることによって実現される。漿膜への接線と腹腔のパンクチャを避けるために皮膚表面に平行な針の方向を維持することが重要です。 </li><li>線維脂肪の組織は、注射器内に蓄積する。一度十分な線維脂肪の組織の断片（フラグメントを豊富に含む血液の混合試料の最大1​​ mL）を取得され、完全に真空を解放し、針（3K図）を取り外します。 </li><li>患者またはアシスタントが血液の溢出を防止するためのガーゼのパッドを持つプロシージャの領域でしっかり圧力を適用しています。 </li></ol> 2。検体処理<ol><li>電子顕微鏡のためのグルタルアルデヒド溶液（図4B）で線維脂肪の組織の少なくとも5から6の断片を配置。 </li><li>制度的なプロトコルに応じて、線維脂肪の組織の断片のいくつかの塗抹標本は、2つのスライド（図4A）との間で、それらを拡散させることによって調製することができる。 </li><li>残りの材料は、シリンジ内の血栓（これが凝固時間に応じて、5〜7分かかる場合があります）（図4C）に許可されています。 </li><li>凝固した線維脂肪の組織の材料が注射器とフリーフローティング（図4C2）の壁から外れているように注射器で10％ホルマリンを吸引除去する。注射器（図4C3）からプランジャーを取り外し、ノズルの端（図4C4）反対側のシリンジの開放端から10％ホルマリン容器にクロテッド線維脂肪の組織を移す。 </li><li>適切な容器にラベルを付け、電子顕微鏡のためのグルタルアルデヒドを提出し、H＆Eセクションとコンゴレッドのためのホルマリンは、偏光顕微鏡下で評価するために染色。塗抹標本が準備されている場合、それらは個々の実験室のプロトコルに従って処理される可能性があります。 </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig1.jpg" alt="図1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図1"> 図1。前脂肪パッドのFNABのために麻酔になるエリア。 <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig2.jpg" alt="図2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> 図2。ローカルエリアの麻酔。 <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig3.jpg" alt="図3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図3"> 図3。前脂肪パッドのFNABを実行。 <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig4.jpg" alt="図4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図4"> 図4。前脂肪パッドの処理は、アミロイド沈着を検出するための実験室に提出する吸引。 3。代表的な結果<img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig5.jpg" alt="図5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図5"> 図5。線維脂肪の組織フラグメントの小血管の壁にアミロイド。線維脂肪の組織はホルマリン加工、パラフィンコンゴレッドで染色し、埋め込 ​​み、および光学顕微鏡を偏光により調べた。小血管の壁にアミロイドは、アップルグリーン複屈折（白い矢印）を示しています。 <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig6.jpg" alt="図6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図6"> 図6。アミロイドーシスを欠いている組織は。青リンゴ色の複屈折は、アミロイドーシスのない別の患者の組織中に存在しない。コラーゲン線維の青の複屈折は（白矢印）、ほぼすべての標本で、通常は存在する。 <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig7.jpg" alt="図7" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図7"> 図7。血管壁にアミロイドと一致して線維。血管壁にアミロイドが形成されたストレート、非分岐、ランダムに散らばって80〜10 nmの直径の線維の電子顕微鏡写真。

<ol><li>Westermark, P., Stenkvist, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+the+diagnosis+of+systemic+amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">A new method for the diagnosis of systemic amyloidosis.</a> Arch Intern Med. 132, 522-523 (1973).</li>
<li>Devata, S., Hari, P., Markelova, N., Li, R., Shidham, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detecting+AL+Amyloid+in+Abdominal+fat+pad+aspirates%3A+Is+Congo+red+sufficient%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Detecting AL Amyloid in Abdominal fat pad aspirates: Is Congo red sufficient?</a> Amyloid. , Forthcoming Forthcoming.</li>
<li>Merlini, G., Bellotti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Mechanisms+of+Amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22New+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Molecular Mechanisms of Amyloidosis.</a> New Engl J Med. 349 (6), 583-596 (2003).</li>
<li>Shidham, V. B., Kumar, N., Cihlar, K., Varsegi, G., Markelova, N., Li, R., Hari, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fine+needle+aspiration+of+abdominal+fat+pad+for+diagnosis+of+early+amyloidosis%3A+How+can+the+clinical+role+of+the+test+be+improved%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Mod+Pathol%22%5BJournal%5D)">Fine needle aspiration of abdominal fat pad for diagnosis of early amyloidosis: How can the clinical role of the test be improved?</a> Mod Pathol. 20, Suppl ement 2. 1A-380A (2007).</li>
<li>Halloush, R., Lavrovskaya, E., Mody, D., Lager, D., Truong, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+typing+of+systemic+amyloidosis%3A+The+role+of+abdominal+fat+pad+fine+needle+aspiration%5BTitle%5D)+AND+%22Cytojournal%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and typing of systemic amyloidosis: The role of abdominal fat pad fine needle aspiration.</a> Cytojournal. 6, 24-24 (2010).</li>
<li>Hazenberg, I. I., Rijswijk, C. V. an, H, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+Accuracy+of+Subcutaneous+Abdominal+Fat+Tissue+Aspiration+for+Detecting+Systemic+Amyloidosis+and+Its+Utility+in+Clinical+Practice%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Diagnostic Accuracy of Subcutaneous Abdominal Fat Tissue Aspiration for Detecting Systemic Amyloidosis and Its Utility in Clinical Practice.</a> Arthritis Rheum. , 54-546 (2006).</li>
<li>Guy, C. D., Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+fat+pad+aspiration+biopsy+for+tissue+confirmation+of+systemic+amyloidosis%3A+specificity%2C+positive+predictive+value%2C+and+diagnostic+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Diagn+Cytopathol%22%5BJournal%5D)">Abdominal fat pad aspiration biopsy for tissue confirmation of systemic amyloidosis: specificity, positive predictive value, and diagnostic pitfalls.</a> Diagn Cytopathol. 24, 181-185 (2001).</li>
<li>Westermark, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosing+Amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Rheumatol+Suppl%22%5BJournal%5D)">Diagnosing Amyloidosis.</a> Scand J Rheumatol Suppl. 24, 327-329 (1995).</li>
<li>Linke, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+Sensitive+Diagnosis+of+Amyloid+and+Various+Amyloid+Syndromes+Using+Congo+Red+Fluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Virchow+Arch%22%5BJournal%5D)">Highly Sensitive Diagnosis of Amyloid and Various Amyloid Syndromes Using Congo Red Fluorescence.</a> Virchow Arch. 436, 439-448 (2000).</li>
<li>Giorgadze, T. A., Shiina, N., Baloch, Z. W., Tomaszewski, J. E., Gupta, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+detection+of+amyloid+in+fat+pad+aspiration%3A+an+evaluation+of+Congo+red+stain+by+fluorescent+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Diagn+Cytopathol%22%5BJournal%5D)">Improved detection of amyloid in fat pad aspiration: an evaluation of Congo red stain by fluorescent microscopy.</a> Diagn Cytopathol. 31, 300-306 (2004).</li>
<li>DeMay, R. M. Fine Needle Aspiration Biopsy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDeMay%2C+RM+%22The+Art+%26+Science+of+Cytopathology%22">The Art & Science of Cytopathology</a>. , ASCP Press, American Society of Clinical Pathology. Chicago. 465-46 (1996).</li>
<li>Arbustini, E., Vrga, L., Concardi, M., Pallandini, G., Obici, L., Merlini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+and+Immuno-electron+Microscopy+of+Abdominal+Fat+Identifies+and+Characterizes+Amyloid+Fibrils+in+Suspected+Cardiac+Amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Electron and Immuno-electron Microscopy of Abdominal Fat Identifies and Characterizes Amyloid Fibrils in Suspected Cardiac Amyloidosis.</a> Amyloid. 9, 108-114 (2002).</li>
</ol>

アミロイドーシスの診断は、通常、腎臓、肝臓、および/または心臓などの影響を受ける臓器の組織生検によって達成される。このアプローチは、高い診断率を持っている、しかし、侵襲的であり、出血2を含む合併症に関連付けることができます。直腸、歯肉、および骨髄生検は、1960年代6,7,8で、比較的少ない侵襲的なアプローチとして、診断のために好まれた。腹部の脂肪パッドの吸引は、全身性アミロイドーシス1の組織診断のための安全、低侵襲、シンプル、そして安価な手順として、1973年に報告された。しかし、取得された検体の処理に手順とアプローチの詳細はコヒーレント報告されていません。このビデオと記事は、ステップでの手順のステップを説明します。 脂肪パッドの吸引でアミロイドを検出するためのアプローチは、同様に、また、1,5,6,7,8を 、様々なアプローチを比較し、評価するいくつかの研究でも標準化されていません。コンゴレッド染色で前方の脂肪パッドの吸引の評価が特に乏しいのアミロイド沈着5のアミロイドーシスの早期の場合には下の観察者間の再現性と影響を受けにくいです。免疫組織化学では、ホルマリン固定パラフィン包埋細胞のブロックのセクションで行われ、細胞診塗抹標本上で実行コンゴ赤色蛍光は、診断感度9,10を改善することが報告されている。電子顕微鏡では脂肪体吸引4,5の線維脂肪の組織における微小血管の壁にわずかアミロイド線維の検出と同定を向上させます。この情報に基づいて、この記事では、セルブロックを（診断リンゴ緑色の複屈折偏光顕微鏡下でコンゴレッド染色したセルブロックセクションの評価のためとも示されている免疫組織化学としての）と電子顕微鏡を準備する試料の処理について説明します。しかしながら、アミロイドのための試料の評価のために選択されたアプローチによって、それは細胞診塗抹標本作製、セルブロックの準備、および電子顕微鏡のための処理を施すことができる。いくつかの研究室では、吸引線維脂肪の組織の断片から調製し、蛍光10を研究するためにコンゴレッドで染色した塗抹標本上でテストを実行。 一般的に遅くアミロイドーシスでは、コンゴレッド偏光顕微鏡と光学顕微鏡では十分な場合もありますが、セルブロックのセクションの偏光顕微鏡による疾患コンゴレッド染色の初期段階で脂肪パッド吸引4,5,11に対して感応性が低く、信頼性です。 。チオフラビンTを含むその他の特別な汚れは、同様の制限事項を考慮に入れて使用することができます。アミロイドを検出する他のアプローチは、コンゴレッド偏光顕微鏡と蛍光10のアミロイドのための吸引塗抹標本の評価が含まれています。我々の経験ではこの方法の方が再現可能です。電子顕微鏡によるアミロイドのための脂肪パッドの血管の評価は、これらの制限を4,11を克服しています 。アミロイドのさらなる特徴は、免疫電子顕微鏡12で報告されているが、これらのメソッドは非三次医療の設定で広く利用できない場合があります。 吸引の手順を実行するために使用する針は、（例えば、- 14G）、（21 - 25G）ファイン中間（18 - 20G）、および大規模な11にそれらのゲージサイズに応じて分類されることがあります。前方脂肪パッドの願望は、中間（18〜20G）から罰金（21〜22G）2,10まで可変ゲージを使用して実行することが報告されている。腫瘤病変のほとんどは、セルのブロックに対して追加のサンプルを取得するために、広いゲージの針（例えば18Gなど）と追加のパスと一緒に良い細胞診塗抹標本を得るために細かいゲージの針（例えば25Gなど）で吸引されています。 前脂肪パッドの吸引時には、凝集線維脂肪の組織は、細かい針でも吸引していません。セルブロックの準備と電子顕微鏡では脂肪吸引の線維脂肪の組織フラグメントの小血管壁の評価のために重要である。広いゲージの針（例えば18Gなど）の診断に十分な材料2,10を得るために推奨されています。手順は、従来のFNABに匹敵するように、脂肪パッドの吸引は、広いゲージの針が5それを実行するために使用されていてもFNABと呼ばれています。

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/index/details.stp?id=1747">Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid</a>. There was an error with an author's name. The author's last name had a typo and was corrected to:
Safwan S. Jaradeh
instead of:
Safwan S. Jardeh

Erratum: Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid

アルコール綿棒、ガーゼパッド、マーキングペン、10 mLの注射器× 2、1％リドカイン（局所麻酔薬、場合リドカインを単独で使用され、それは点眼後、最初の灼熱感を引き起こします。この1％の1:1混合物を使用することによって防ぐことができるリドカインと1％ナトリウム - ビ - 炭酸塩）、18ゲージ（G）1 ½インチの針× 2（FNABを実行するための）、25G 1 ½インチ針（局所麻​​酔薬を注入するため）、FNAのシリンジホルダー（&quot;ガン&quot;）、包帯、グルタルアルデヒドのバイアル（電子顕微鏡用）、および10％ホルマリンの容器を生検。

アミロイドのための前方脂肪パッドのfnaの実行と処理

Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid

歴史的に、心臓、肝臓、および腎臓の生検はアミロイドーシスにおけるアミロイド沈着を証明するために行われた。この疾患の臨床症状は非常に可変と非特異的であるため、これらの生検のリスクは診断率のために余りに大きいです。このような皮膚や歯肉などの低生検のリスクを持っている他のサイトでは、、また、比較的侵襲的で高価です。さらに、これらの生検は常に診断を確立するために十分なアミロイド沈着を持っていない可能性があります。脂肪パッドの吸引は、低コストと最小限の罹患率との良好な臨床的相関関係を実証してきました。しかし、この手順を実行したり、変数やnonreproducible結果につながる吸引標本を、処理するための標準プロトコルはありません。組織でアミロイドを検出するための最も頻繁に利用さモダリティは、偏光顕微鏡を使用してコンゴレッド染色した切片上に青リンゴ色の複屈折である。この手法は、吸引材料のセルブロックの準備が必要です。残念なことに、アミロイドーシスの初期段階で受診した患者は大幅に脂肪パッドの吸引のコンゴレッド染色細胞のブロックのセクションの感度を減少させるアミロイドの最小限の量を持っている。そのため、電子顕微鏡による脂肪パッドの吸引の超微細構造の評価は、アミロイドの検出のために感度の向上を考えると、利用されるべきである。この記事では、コンゴレッドのセルブロックのセクションの染色および超微細構造識別の​​ための電子顕微鏡の両方を利用してアミロイドの検出のための前脂肪パッドの吸引を行うためのシンプルで再現性の手順を示しています。

脂肪パッドの吸引は、全身性アミロイドーシスの診断にアミロイドを検出するためには、他の方法に比べて優先、低侵襲、低コストのアプローチです。このビデオの記事では、最適な診断結果のための検体の適切な処理によって脂肪パッドの吸引を行うための手続きの概要を示しています。

アミロイドのための前方脂肪パッドのFNAの実行と処理

歴史的に、アミロイドーシスにおけるアミロイド沈着を証明するために、心臓、肝臓、および腎臓の生検が行われてきました。この疾患の臨床像は……

このビデオでは、細針吸引、前腹壁脂肪組織の生検、および顕微鏡観察に向けた生検検体の処理手順について解説します。正中線より外側で臍下にある腹部下四分画領域の皮膚を清浄し、マーキングペンで菱形の領域を指定します。局所麻酔を施した後、細針吸引によって前腹壁脂肪組織の生検を行います。生検用注射器から5〜6個の線維脂肪組織の断片をグルタールアルデヒド溶液に移し、残りの組織は注射器内で凝固させます。10%formalinを注射器に吸引し、プランジャーを外して、凝固した線維脂肪組織を10%formalinに移します。こんにちは、ウィスコンシン大学医療センター病理学部のHam博士です。私はDr.Parriです。ウィスコンシン医科大学の腫瘍性疾患および関連疾患部門に所属しています。本日は、AMYアミロイドーシスの研究を目的とした、脂肪パッドの細針吸引生検の手順について実演します。これは、アミロイドーシスの実演および除外診断のために、前腹壁脂肪から線維脂肪組織を採取する際に使用するプロトコルです。それでは始めましょう。適切に実施すれば、前腹壁脂肪パッド吸引のための穿刺吸引細胞診（FNAB）の手順は、一度の穿刺で完了させることができます。しかしながら、皮下脂肪組織の中で18ゲージの針を前後に動かす操作は、比較的強い苦痛を伴います。ここで述べる麻酔法では、25ゲージの針をわずか2回刺すだけで同様の効果が得られ、痛みを分散させることで処置への耐性が向上します。処置の準備として、1%lidocaineと1%sodium bicarbonatesを1対1で混合したもの、アルコール綿、ガーゼ、マーキングペン、10 mLシリンジ2本、18ゲージ1.5インチ針2本、25ゲージ1.5インチ針1本、FNAシリンジホルダーまたはガン、包帯、電子顕微鏡用のグルタラールアルデヒド瓶、および10%Fourの生検容器を含む、必要なすべての資材を揃えます。アルコール綿を使用して、腹部の下四分の一領域、正中線より外側で臍標識より下の皮膚を清浄します。マーキングペンで約2インチ四方の正方形の領域を印付けします。18ゲージの針と10 mLのシリンジを用いて、局所麻酔薬として使用する1% lidocaineおよび1% sodium bicarbonate溶液を約10 mL吸引します。1%リドカインを単独で使用することも可能ですが、炭酸水素ナトリウムを加えることで、投与初期に生じる一時的な灼熱感を防ぐことができます。挿入後、リドカイン瓶に刺さったままの18ゲージ針から、リドカインを満たしたシリンジを外します。シリンジを垂直に保持したまま、25ゲージの1.5インチ針を装着してください。プランジャーを押し、シリンジの筒を軽く叩いて、シリンジ内に溜まった空気を除去します。その後、目的領域の縁に沿って麻酔を行います。まず、点Aの皮下に25ゲージの針を挿入します。次に、針を慎重に皮下へ押し込み、皮膚表面に平行かつ接線方向に点Xに向かって進めます。点Xに到達したら、シリンジのプランジャーを逆方向に引き、針が血管内に入っていないことを確認します。次に、針を点Aまで引き戻しながら、プランジャーをゆっくりと押し、リドカインを最大2.5 milliliters浸潤させます。この際、針が皮膚から抜けないように注意してください。次に方向を変え、針を点Yまで皮下に刺入します。前回と同様に、シリンジのプランジャーを引いて針が血管内にないことを確認し、針を点Aに向かってゆっくりと引き抜きながら、最大2.5 millilitersのリドカインを投与します。針を抜いた後、滅菌ガーゼで強く圧迫して止血します。次に、点Bから開始し、点Xから点Bまでリドカインを皮下に投与するこの工程を繰り返します。その後、点Bから点Yまで同様に行います。再び、出血を防ぐためにガーゼを当てます。ここで、綿棒の先端で菱形領域内の皮膚を軽く触れ、隣接する麻酔していない皮膚と比較して、当該領域が麻酔されていることを確認します。18ゲージの1.5インチ針を10 mLシリンジに取り付けます。真空の適切な適用と解除を容易にするため、シリンジ針アセンブリをFNABグリップガンのシリンジグリップに取り付けます。洗浄および麻酔を施した菱形筋領域の皮下脂肪に針先を挿入し、シリンジのプランジャーを完全に引いて真空状態にします。真空を維持したまま、皮下脂肪内で針を前後に動かします。各ストロークは、針が皮膚から抜けない範囲で、可能な限り長く行います。ストロークごとに方向を変えることで、最大限のサンプリングが可能になります。腹腔を穿刺することを避けるため、針の方向を漿膜に対して接線方向にし、皮膚表面と平行に保つことが重要です。注射器内に約1 mLの線維脂肪組織片が蓄積したら、真空状態を解除し、針を抜きます。皮下への血液漏出を最小限に抑えるため、患者にガーゼを用いて処置部位を強く圧迫してもらいます。これで、検体をラボに提出するための処理が可能です。さらなる試験のため、注射針を取り外し、5〜6個の線維性脂肪組織の断片を注射器のノズルから2%グルタルアルデヒド溶液に転移させます。さらに少量の組織断片を注射器のノズルから、2枚のスライドガラスの間に広げたガラススライド上に分注します。塗抹標本を調製するために、残りの材料を注射器内で凝固させます。これには5〜7分かかる場合があります。次に、シリンジ内に10% formalinを吸引し、凝固した線維脂肪組織がシリンジの壁から離れて自由に浮遊するようにします。その後、シリンジからプランジャーを抜き、ノズルとは反対側の開口端から、ラベル付きの10% formalin容器に凝固した線維脂肪組織を移します。回収した検体は、電子顕微鏡観察、セルブロック作成およびパラフィン包埋、または蛍光顕微鏡観察に供することができます。本ビデオで示した手法を用いて採取・固定および処理を行った線維脂肪組織をパラフィン包埋し、コンゴレッドで染色して偏光顕微鏡で観察しました。線維脂肪組織内の小血管壁にアミロイドが認められます。黄色い矢印で示されているように、断片がアップルグリーン二色性を示しています。アミロイドーシスを伴わない別の患者の組織では、コンゴレッド染色によるアップルグリーン複屈折は見られませんでした。黄色い矢印で示されているコラーゲン線維による青色の複屈折は、通常ほぼすべての検体に見られます。我々の経験では、このコラーゲンに関連する青色の複屈折は、アミロイドのアップルグリーン複屈折と区別することが困難な場合があります。これは、偏光顕微鏡下でのコンゴーレッド染色標本の判定における重要な注意点です。この電子顕微鏡写真には、血管壁内のアミロイドに一致する、分枝のない直線状でランダムに散在した直径8～10 nmの線維が示されています。このようにして、アミロイドを確認するための前脂肪体からの細針吸引生検（FNAB）の手順を実演しました。この操作およびその他の同様のFNABの手順を行う際は、適切な順序で真空状態を適用し、解除することが非常に重要です。また、腹腔内に進入することを避けるため、針を斜めに刺してはいけません。したがって、往復ストロークの方向を皮膚に平行に、かつ線維組織の皮下平面に維持することが重要です。これらは非常に重要なポイントです。以上となります。ご視聴ありがとうございました。

performing-and-processing-fna-of-anterior-fat-pad-for-amyloid

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

このビデオでは、蛍光イメージングに発光結合オリゴチオフェン色素(ヘプタメルホルミルチオフェン酢酸、またはhFTAA)を使用して組織切片のアミロイドを染色する技術について説明しています。アミロイドは、βシートに富む異常なタンパク質の凝集体です。組織サンプル中のそれらの検出は、アミロイド関連疾患またはタンパク病の診断と治療に役立ちます。...

アミロイド沈着物のhFTAA染色:組織切片の蛍光イメージングのためのオリゴチオフェンベースの色素を用いたアミロイド線維の可視化技術

原子間力顕微鏡とバイオパニング技術を組み合わせて、低濃度であってもあらゆる生物学的材料に存在する疾患特異的タンパク質変異体に対する抗体を取得するためのネガティブおよびポジティブバイオパニングシステムを作成しました。...

筋萎縮性側索硬化症におけるTDP-43の変異体に対する形態学的試薬の分離のための新規原子間力顕微鏡ベースのバイオパニング

本研究の目的は、ラットの脂肪と砂糖の新規摂取後のドーパミン経路と端末サイトにおける同時変化を測定するために、携帯のc-fosの活性化を使用して、信頼性の高い免疫組織学的手法を描くことで報酬関連の分散型の脳のネットワークを識別することです。...

ラットにおけるナイーブ砂糖と脂肪の摂取後の中脳辺縁系と中間皮質ドーパミン報酬サイトからのc-Fosの活性化の同時検出

本研究の目的は、microfractured...

自己 Microfractured と距骨骨軟骨損傷の鏡視下手術の管理のための精製脂肪組織

高脂質含量のため従来の組織学的方法を使用して視覚化する脂肪組織にチャレンジしております。裏打ちクリアは、堅牢なラベリングと脂肪組織の高分解能体積蛍光イメージングができるテクニックをクリア組織です。ここでは、試料調製、前処理、染色、クリア、およびイメージング用取付方法をについて説明します。...

裏打ちクリア: 組織の脂肪組織の三次元イメージング法をクリア

このプロトコルは、ラット骨格筋から線維-異量体形成前駆体(FAPs)および筋原性前駆腫(MP)を単離する方法を概説する。筋肉損傷モデルにおけるラットの利用は、分析のための萎縮性筋肉からの組織の可用性の増加と、自由に動く動物の筋力と歩行を評価するための検証された方法のより大きなレパートリーを提供する。...

ラットの骨格筋における線維-刺激性前駆腫(FAPs)および筋原性前駆腫(MP)の同定、分離、および特徴付け

健康な筋肉組織を筋肉内脂肪で置き換えることは、ヒトの疾患および状態の顕著な特徴である。このプロトコルは、筋肉内脂肪を視覚化、画像化、定量化する方法を概説し、筋肉内脂肪形成の根底にあるメカニズムの厳密な研究を可能にします。...

骨格筋における筋肉内脂肪形成とその細胞起源を調べるためのガイド

このプロトコルは、パルミチン酸誘発 インビトロ...

パルミチン酸誘発 In vitro モデルにおける非アルコール性脂肪性肝疾患に対するプラチコジンDの保護効果の調査

食事誘発性非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)マウスモデルを使用して、NAFLDの進行段階を評価するための非侵襲的方法としての新しい in vivo マイクロコンピューター断層撮影イメージング技術の使用について説明します、主に肝血管ネットワークに焦点を当てます...

非アルコール性脂肪性肝疾患の進行を評価するための新しい in vivo マイクロコンピュータ断層撮影イメージング技術

このプロトコルは、凍結した非ヒト霊長類膵島から高品質の核を単離し、単一核同時RNAシーケンシングおよびATACシーケンシングで使用すると同時に、同じサンプルからのメタボローム分析のためのバルク細胞質画分を保持する手順を説明しています。...

単一核RNAシーケンシングとATACシーケンシングの組み合わせ、およびバルクメタボロミクスのための凍結非ヒト霊長類胎児膵島の調製

ここでは、自家脂肪組織を異なる物理化学的特性と機能を持つさまざまな脂肪成分物質に変換できるプロトコルを紹介します。...

脂肪を特殊な成分に変換するための革新的な脂肪組織分画

学ぶ前方脂肪パッドの細針吸引生検と検体処理法。局所麻酔を用いて最小侵襲でアミロイド症を診断する信頼性の高い手法です。正確な診断のための標本処理手順も解説します。

アミロイドのための前方脂肪パッドのFNAの実行と処理

さらに動画を探す