Name: のレーザーキャプチャーマイクロダイセクションショウジョウバエ末梢ニューロン (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-24T17:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 2 s
Description: 学ぶレーザーキャプチャーマイクロダイセクション法でショウジョウバエ末梢ニューロンを単離し、高品質なRNAを抽出する技術です。神経科学研究における遺伝子発現解析に応用可能です。

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我々は、博士に感謝する。 LCMの支援のために本研究で使用したフライ株式、およびバージニアEspina、博士エマニュエルPetricoinと博士ランスリオッタを提供するための塩原-ティンニン月とウェスGrueber。著者らはこの研究の支援（DNC）とジョージメイソン大学の学長のオフィス（EPRI）のためにトーマスF.とケイトミラーJeffressメモリアルトラストを認める。

<ol><li>Corty, M. M., Matthews, B. J., Grueber, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecules+and+mechanisms+of+dendrite+development+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Molecules and mechanisms of dendrite development in Drosophila.</a> Development. 136, 1049-1061 (2009).</li>
<li>Parrish, J. Z., Emoto, K., Kim,, Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+that+regulate+establishment%2C+maintenance%2C+and+remodeling+of+dendritic+fields%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mechanisms that regulate establishment, maintenance, and remodeling of dendritic fields.</a> Annu. Rev. Neurosci. 30, 399-423 (2007).</li>
<li>Wang, X., Starz-Gaiano, M., Bridges, T., Montell, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+specific+cell+populations+from+Drosophila+tissues+by+magnetic+bead+sorting%2C+for+use+in+gene+expression+profiling%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Purification of specific cell populations from Drosophila tissues by magnetic bead sorting, for use in gene expression profiling.</a> Nature Protocols. , (2008).</li>
<li>Iyer, E. P. R., Iyer, S. C., Sulkowski, M. J., Cox, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+Drosophila+peripheral+neurons+by+magnetic+bead+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of Drosophila peripheral neurons by magnetic bead sorting.</a> J Vis Exp. 34, 2912-2917 (2004).</li>
<li>Tirouvanziam, R., Davidson, C. J., Lipsick, J. S., Herzenberg, L. A., Tirouvanziam, R., Tirouvanziam, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence-activated+cell+sorting+%28FACS%29+of+Drosophila+hemocytes+reveals+important+functional+similarities+to+mammalian+leukocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fluorescence-activated cell sorting (FACS) of Drosophila hemocytes reveals important functional similarities to mammalian leukocytes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 101, 2912-2917 (2004).</li>
<li>Shigenobu, S., Arita, K., Kitadate, Y., Noda, C., Kobayashi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+germline+cells+from+Drosophila+embryos+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Growth+Differ%22%5BJournal%5D)">Isolation of germline cells from Drosophila embryos by flow cytometry.</a> Dev. Growth Differ. 48, 49-57 (2006).</li>
<li>Reeves, N., Posakony, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+programs+activated+by+proneural+proteins+in+the+developing+Drosophila+PNS%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">Genetic programs activated by proneural proteins in the developing Drosophila PNS.</a> Dev. Cell. 8, 413-425 (2005).</li>
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<li>Yang, Z., Edenberg, H. J., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+mRNA+from+specific+tissues+of+Drosophila+by+mRNA+tagging%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Isolation of mRNA from specific tissues of Drosophila by mRNA tagging.</a> Nucl. Acids Res. 33, (2005).</li>
<li>Appay, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+Gene+Expression+Profiling+of+Human+T+Cell+Subsets+Reveals+Parallel+Post-Thymic+Differentiation+for+CD4%2B+and+CD8%2B+Lineages%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Sensitive Gene Expression Profiling of Human T Cell Subsets Reveals Parallel Post-Thymic Differentiation for CD4+ and CD8+ Lineages.</a> J. Immunol. 179, 7406-7414 (2007).</li>
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<li>Keays, K. M., Owens, G. P., Ritchie, A. M., Gilden, D. H., Burgoon, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+capture+microdissection+and+single-cell+RT-PCR+without+RNA+purification%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Laser capture microdissection and single-cell RT-PCR without RNA purification.</a> J. Immunol. Methods. 302, 90-98 (2005).</li>
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<li>Xiao, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+profiling+in+embryonic+mouse+lenses%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Vis%22%5BJournal%5D)">Gene expression profiling in embryonic mouse lenses.</a> Mol. Vis. 12, 1692-1698 (2006).</li>
<li>Scharschmidt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+human+osteoarthritic+connective+tissue+by+laser+capture+microdissection+and+QRT-PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Connect.+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Analysis of human osteoarthritic connective tissue by laser capture microdissection and QRT-PCR.</a> Connect. Tissue Res. 48, 316-323 (2007).</li>
<li>Spletter, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((regulates+Drosophila+olfactory+projection+neuron+identity+and+targeting+specificity%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Dev%22%5BJournal%5D)">regulates Drosophila olfactory projection neuron identity and targeting specificity.</a> Neural Dev. 2, 14-14 (2007).</li>
<li>Hoopfer, E. D., Penton, A., Watts, R. J., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+analysis+of+Drosophila+neuronal+remodeling%3A+a+role+for+the+RNA-binding+protein+Boule+as+a+negative+regulator+of+axon+pruning%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Genomic analysis of Drosophila neuronal remodeling: a role for the RNA-binding protein Boule as a negative regulator of axon pruning.</a> J. Neurosci. 28, 6092-6103 (2008).</li>
<li>Lee, T., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+for+studies+of+gene+function+in+neuronal+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Mosaic analysis with a repressible cell marker for studies of gene function in neuronal morphogenesis.</a> Neuron. 22, 451-461 (1999).</li>
<li>Grueber, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Projections+of+Drosophila+multidendritic+neurons+in+the+central+nervous+system%3A+links+with+peripheral+dendrite+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Projections of Drosophila multidendritic neurons in the central nervous system: links with peripheral dendrite morphology.</a> Development. 134, 55-64 (2007).</li>
<li>Song, W., Onishi, M., Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+multidendritic+sensory+neurons+are+necessary+for+rhythmic+locomotion+behavior+in+Drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Peripheral multidendritic sensory neurons are necessary for rhythmic locomotion behavior in Drosophila larvae.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 104, 5199-5204 (2007).</li>
<li>Espina, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+capture+microdissection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Prot%22%5BJournal%5D)">Laser capture microdissection.</a> Nat. Prot. 1, 586-603 (2006).</li>
<li>Livak, K. J., Schmittgen, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+relative+gene+expression+data+using+real-time+quantitative+PCR+and+the+2%28-Delta+Delta+C%28T%29%29+method%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) method.</a> Methods. 25, 402-408 (2001).</li>
</ol>

利害の衝突は宣言されません。

本明細書において提示されるプロトコルは、LCMを経由してショウジョウバエ末梢神経細胞の単離のための私達の最適化方法を説明します。このLCMプロトコルが開発の三齢幼虫の段階から、単一の、クラス固有のまたは複数のショウジョウバエ DAニューロンの特定の単離のために設計されたものですが、プロトコルのマイナーな修正は、容易に全ての発生から他のショウジョウバエの細胞型のキャプチャのために適合させることができる細胞のタイプや金利の種類のラベルの異なるGAL4、UAS - mCD8 - GFPレポーター導入遺伝子を使用してステージ。我々の結果は、レーザーキャプチャーマイクロ解剖DAニューロンから得られたRNAは定量RT - PCRやマイクロアレイベースの分析では潜在的な直接使用を可能にする非常に高品質であることを示している。 LCMは、機能喪失（UAS - RNAi）をおよび/ ​​またはGAL4を採用した機能獲得型研究と組み合わせて使用することができる場所、ここで説明したようにこのプロトコルのアプリケーションは、興味のある野生型細胞の捕獲を越...

設備： <ul><li>クライオスタット</li><li>スライド固定、洗浄、トリプシン処理、エタノール/キシレン脱水の場合は50 mlコニカルチューブ</li><li> -80℃の冷凍庫</li><li>インキュベーター</li><li> PixCell IIE LCMのインストゥルメントは、フルーアで300落射蛍光光学系は、EGFP（モレキュラーデバイス分子デバイス）用に最適化</li></ul>

のレーザーキャプチャーマイクロダイセクションショウジョウバエ末梢ニューロン

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

ショウジョウバエ末梢神経系（PNS）の樹状分枝（DA）ニューロンはクラス特有の樹状突起の形態形成の1,2の分子メカニズムを調査するための優れたモデルシステムを提供しています。クラス固有のDAニューロンの発達の分子解析を容易にするために、それは純粋な集団で、これらの細胞を得ることが不可欠です。異なる細胞、および組織特異的なRNAの分離技術の範囲は、磁気ビーズをベースセル精製3,4、蛍光活性化細胞選別（FACS）5-8、およびRNA結合タンパク質に基づいて戦略を9日のなしを含むショウジョウバエの細胞にもありますが、これらのメソッドは、容易に空間的な精度の高い単一または複数のクラス固有のショウジョウバエ DAニューロンを単離するために利用することができます。レーザーキャプチャーマイクロダイセクション（LCM）は、空間分解能と高精度に組織切片から特定の細胞型を分離するために使用できる非常に強力なツールとして登場しました。単離された細胞から得られたRNAは、その後、定量RT - PCRおよび特定の細胞型10月16日内マイクロアレイの発現プロファイリングを含む、解析に使用することができます。日付に、LCMは広く開発の三齢幼虫期におけるDAニューロンを含むショウジョウバエの組織や細胞17,18、の分析に適用されていない。 ここでは、LCMの赤外線（IR）クラスを使用してショウジョウバエの DAニューロンの単離のために私達の最適化されたプロトコルを提示する。このメソッドは、高い特異性と空間分解能を持つ単一の、クラス固有のまたは複数のDAニューロンのキャプチャが可能になります。年齢をマッチさせたUAS - mCD8を表現する三齢幼虫：：クラスIV DAニューロンの特定のPPK - GAL4 20ドライバーまたはパン- DAニューロン固有のどちらの制御下にGFP 19遺伝子21 - 7 - GAL4 21ドライバは、これらのために使用された実験。孤立したDAニューロンから得られたRNAは非常に高品質のものであり、直接定量RT - PCRやマイクロアレイ解析などのダウンストリームアプリケーションに使用できます。さらに、このLCMプロトコルが容易にGFPの細胞型特異的、GAL4 -ドリブン発現パターンに応じて、さまざまな開発段階に依存する他のショウジョウバエの細胞タイプをキャプチャするために適応させることができます。

このビデオ、記事では、単一または複数単離するための方法を提示<em&gt;ショウジョウバエ</em赤外線キャプチャ（IR）レーザーキャプチャーマイクロダイセクション（LCM）のクラスを使用して、三齢幼虫から&gt; DAニューロン。分離された神経細胞から得られたRNAは、容易に定量RT - PCRやマイクロアレイ解析などのダウンストリームアプリケーションに使用することができます。

ショウジョウバエ（Drosophila）の末梢神経系（PNS）における樹状分枝（dendritic arborization; da）ニューロンは、...を研究するための優れたモデルシステムとなります。

レーザーキャプチャーマイクロダイセクション（LCM）は、組織切片から特定の細胞型を高い空間分解能と精度で単離できる極めて強力なツールとして登場しました。本動画では、LCMを用いて3齢のDrosophila larvaeから末梢ニューロンを切り出します。3齢幼虫をクライオモールドに埋入して凍結させた後、クライオスタットを用いて連続組織切片を作成し、これをガラススライド上に配置して解凍し、70% ethanolで固定します。次に、スライドをトリプシンでインキュベートして残留した幼虫のクチクラを除去し、エタノール系列による脱水およびキシレンでの透明化を行います。続いて、組織切片にLCMキャップを配置し、パルスレーザーを用いて特定の蛍光標識ニューロン細胞を回収します。最後に、回収した細胞からRNAを単離し、定量R-T-P-C-Rやマイクロアレイ解析などのダウンストリームアプリケーションに供します。こんにちは。ジョージ・メイソン大学分子微生物学部およびクラスノウ高等研究所のDan Coxです。こんにちは。Dan Cox博士の研究室のIsh AERです。本日は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション（LCM）を用いた、単一または複数のショウジョウバエ末梢ニューロンの細胞分離およびRNA精製の手順について解説します。当研究室では、クラス特異的なDIN率形態形成を媒介する分子メカニズムを研究するために本手順を用いています。それでは、始めていきましょう。このビデオで示すすべての手順は、標準的な手順に従い、厳格なRNaseフリー条件下で実施されています。このプロトコルは、30から40匹の成熟した3齢幼虫を採取することから始めます。幼虫を二回蒸留水で洗浄してください。RNAs awayで短時間すすいだ後、さらに二回蒸留水で一度洗浄します。RNAs awayを除去するため、清潔なキムワイプを用いて余分な水分を完全に吸い取ります。次に、清潔な組織包埋用モールドを用意し、OCTを薄く一層加えます。型を氷の上に置き、0 °Cまで冷却します。ピンセットを使用して、洗浄した幼虫と冷やしたOCTを配置します。OCTの低温により、幼虫の動きを抑制することができます。包埋プロセスにおいて、幼虫を互いに平行に配置します。幼虫の配置が完了したら、幼虫を動かさないように注意しながら、型にOCTをゆっくりと満たします。次に、急速冷凍します。ドライアイスの上に配置して、型を凍結させます。これにより、幼虫を単一平面上に配置することができ、1切片あたりの細胞数を最大化できます。クライオスタットを使用します。ラベル付きの電荷なしRNAフリーガラス顕微鏡スライドに、5〜8 µmの厚さで凍結切片を作製します。スライドをドライアイスで保管し、その後、マイクロダイセクションを行うまで-80 °Cで保存します。脱水に使用するすべての溶液は、LCMのセッションごとに調製して使用してください。凍結した幼虫組織切片の完全な脱水は、マイクロダイセクションの効率を最適化するために不可欠です。-80 °Cのフリーザーから凍結幼虫組織切片を含むスライドを取り出し、ドライアイス上に置きます。スライドボックスからスライドを1枚取り出し、直ちに70% ethanolを満たした50 milliliterコニカルチューブに3〜10秒間浸します。次に、LCMキャプチャの妨げとなる組織切片上の角質を除去するため、RNAフリーの二回蒸留水を満たした50 mLコニカルチューブ内でスライドを5～10秒間すすぎます。2.5%トリプシン50 µLを組織切片上に直接静かにピペットで滴下し、室温で5～30秒間インキュベートします。その後、トリプシンおよび緩く付着している角質断片を除去するため、RNAフリーの二回蒸留水を含む50 mLコニカルチューブ内で切片を短時間すすぎます。以下の溶液にスライドを順次浸し、脱水工程を完了させます。70% ethanol、95% ethanol、100% ethanol、100% ethanol、そして100% xyleneに順次浸します。最後に、もう一度100% xyleneに浸します。脱水後、室温で緩やかな気流の下、スライドを60〜120秒間完全に乾燥させます。可能であれば、湿度の増加による効率低下を防ぐため、湿度管理された部屋でマイクロダイセクションを行ってください。まず、顕微鏡とレーザーコントロールボックスの電源を入れます。キャップホルダーアセンブリにH-S-L-C-Mキャップをロードしてください。各キャップで多数の細胞体をキャプチャすることが可能です。次に、Molecular Devices社のソフトウェアを開き、スライド番号やキャップロット番号を含む実験詳細を入力します。幼虫組織切片を載せたスライドを、マイクロダイセクション用の顕微鏡ステージに設置します。カートリッジから新しいHS LCMキャップをP cell two ELCM装置に取り付け、ジョイスティックに対して正しく配置して、キャプチャ領域に対するキャップの位置を適切に調整します。PPK GAL four U-A-S-M-C-D eight GFPまたは21 7 G four UASM CD eight GFPトランスジェニックリポーターラインにおいて、蛍光標識された細胞を特定します。末梢神経系の樹状突起、分枝、またはDAニューロンは、GFP蛍光によって容易に識別可能です。特異性を最大化するために、強力な蛍光信号を持ち、細胞の重なりが最小限である細胞を選択してください。次に、単一クラスのDAニューロンをマイクロダイセクションするための選択したレーザースポットサイズに適合する、精密なポリマー融解スポットを得られるよう、レーザーパルスの出力と持続時間のパラメータを調整します。推奨される設定は以下の通りです。スポット径 7.5 micrometers、レーザー強度 30 to 50 milliwatts、レーザー照射時間 2 to 4 milliseconds、および1細胞あたり 1 to 2 shotsです。レーザーの設定は、組織の種類、組織の厚さ、および使用するLCMキャップの種類によって異なる場合があります。最終的に、最適な回収結果を得るには、レーザー設定を経験的に検証する必要があります。次に、組織をLCMに供します。LCM（レーザーキャプチャーマイクロダイセクション）では、関心領域の上にキャップを配置し、低出力の赤外線レーザーを照射します。パルスはキャップを通り、目的の細胞の上にある薄いサーモラボポリマーフィルムに向けられます。レーザーをパルス照射すると、フィルムが軟化して標的細胞に付着し、再び凝固することで、目的の細胞がフィルムに付着した状態で回収されます。組織切片からキャップを持ち上げた後、周囲の組織から細胞（または複数の細胞）をマイクロダイセクトし、新しい視野でさらに多くの細胞を回収してこのプロセスを繰り返します。目的の細胞を回収し終えたら、LCMキャップを持ち上げ、清潔なスライドガラスの上に置いて、回収した細胞の存在と、不要な細胞やデブリが混入していないことを確認します。蛍光照明および透過光照明を用いて、HS LCMキャップを撮像します。マイクロダイセクションした細胞が入ったキャップを、抽出デバイスに取り付けます。次に、キャップの表面に12 µLのRNA抽出バッファーを加え、ここに示すように、逆さまにした薄壁反応チューブを接続します。このアセンブリをアライメントトレイに配置し、あらかじめ加熱したインキュベーションブロックで覆います。次に、遠心分離によるインキュベーション後、トレイを42 °Cのインキュベーターに30分間置きます。抽出液の入ったチューブを800 ×gで2分間遠心分離します。遠心分離機からチューブを取り出した後、蓋を閉め、RNA抽出物の精製およびカラム精製を行うまで、細胞抽出液を-80 °Cで保存します。pico pure RNA抽出キットの説明書に従い、DNA処理は任意であり、必要に応じてRNA精製中にカラム上で行うことができます。RNAの精製後、-80 °Cで保存してください。3齢幼虫から単一のクラス特異的な、あるいは複数のショウジョウバエDAニューロンを単離するために、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションを用いました。LCMを用いることで、ショウジョウバエのDニューロン細胞体を極めて高い精度と特異性で単離することが可能です。ここでは、脱水処理およびトリプシン処理を施した8 µmの組織切片の代表的な画像を示します。LCMの実施前に、2つのクラス4 DAニューロンをGFPで標識しています。矢印は、回収のためにハイライトされたニューロンを示しています。ハイライトされたニューロンの細胞体は、組織切片から高い特異性をもって精密にマイクロダイセクションされています。挿入図は、LCMキャップ上に回収された単一のクラス4 DAニューロンの拡大図です。分離したDAニューロンから精製された全RNAをAgilent 2100バイオアナライザーで分析したところ、5.8Sおよび28SリボソームRNAの鋭いピークが確認され、極めて高品質であることが示されました。分離細胞のニューロン特異的な濃縮度を評価するため、ニューロン特異的マーカー遺伝子であるLevのリアルタイム定量逆転写PCRをΔΔCt法を用いて行いました。その結果、LCMで回収したDAニューロンにおけるLevの発現レベルは、個体全体と比較して2.5倍以上の濃縮が認められました。レーザーキャプチャーマイクロダイセクションを用いて、Jossまたは末梢ニューロンからRNAを単離および精製する方法について説明しました。この手順を行う際は、切片の厚さに応じて、マイクロダイセクションを行う組織に合わせ、トリプシンの濃度と消化時間を最適化することが重要です。インキュベーション時間が長すぎると、組織切片から目的の細胞が失われる可能性があり、一方でインキュベーション時間が短すぎると、幼虫のクチクラの除去が不十分となり、LCMの効率が低下する可能性があります。重要な点として、すべての組織脱水溶液は調製後すぐに使用してください。また、LCMキャップのポリマーへの損傷を防ぐため、LCMを行う前にキシレンを完全に蒸発させる必要があります。最後に、精製した細胞からRNAの完全性を維持するため、全工程を通じてRNAの保存条件を維持することが不可欠です。以上です。ご視聴ありがとうございました。皆さんの実験の成功をお祈りいたします。

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神経科学

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学ぶレーザーキャプチャーマイクロダイセクション法でショウジョウバエ末梢ニューロンを単離し、高品質なRNAを抽出する技術です。神経科学研究における遺伝子発現解析に応用可能です。

のレーザーキャプチャーマイクロダイセクションショウジョウバエ末梢ニューロン

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