Photomotor Response Assay:照明条件の急激な変化に対するゼブラフィッシュ仔魚の行動反応を測定する方法

- まず、トランスファーピペットを使用して、10個のゼブラフィッシュの胚を20ミリリットルの水で満たされたビーカーに移します。次に、実験に必要な適切な明暗サイクルの下で、胚を摂氏28度で成長させます。次に、幼虫をウェルプレートに移します。各ウェルに幼虫が1匹含まれていることを確認して、泳ぐのに十分なスペースを確保してください。

次に、各ウェルを水で完全に満たします。ウェルプレートを行動記録チャンバーに置き、ビデオ追跡ソフトウェアを使用して幼虫の動きを追跡します。幼虫は、ストレスレベルの上昇により、異常な明暗サイクルにさらされると、暗闇での動きが増加し、光での動きが減少します。最初の期間の最後の1分間と次の期間の最初の1分間に平均移動した距離の差を計算すると、魚の光運動応答がわかります。

このプロトコルでは、カフェインに曝露されたゼブラフィッシュとファットヘッドミノーの幼生の光運動応答を調べます。まず、実験魚類の入ったウェルプレートを行動記録室に入れる。次に、以前に開発した追跡プロトコルを開きます。ビデオ トラッキング ビューアーで、すべての幼虫が表示されていること、各ウェルに 1 匹の幼虫のみが存在すること、およびウェルが定義された観察エリアに位置合わせされていることを確認します。

次に、[Experiment and Execute] をクリックします。データの名前と保存場所を指定し、[複数のライブイメージ]アイコンをクリックして、事前定義されたすべての表示領域を強調表示します。最後に、録音チャンバーのパネルを閉じ、[背景]、[コンピューターモニターの開始]の順にクリックします。