Name: 癌細胞とヒアルロン酸の相互作用を研究するマイクロパターン表面 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-22T17:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 13 s
Description: 学ぶマイクロパターン表面を用いたヒアルロン酸と癌細胞の相互作用の可視化手法。カルボジイミド化学と微細接触印刷により、腫瘍微小環境における細胞接着・遊走・増殖を詳細に解析し、がん治療戦略の開発に貢献する。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

著者らは、国立科学財団を通じて、材料研究科学工学センターの一部として資金を供給ジョンズホプキンス、少なくとも表面分析実験室の使用を認めます。 LEDはIGERT研修生と国立科学財団大学院のフェローです。この研究は、部分的にNIHの助成金U54CA143868によってサポートされていました。

1。マイクロパターンスタンプ作製のための標準的なフォトリソグラフィー<ol><li>エタノールで新しいシリコンウエハをリンスし、空気の流れで水分を拭き取ります。ウェハを処理し、全体のプロセスの間に表面欠陥を防止するために鉗子を使用してください。 </li><li> SU - 2025ネガ型フォトレジストを塗布し、カバーウエハの表面を回転させるウエハを転送する。フォトレジストとウェーハの少なくとも80％をカバーしています。 3000rpmの時に30秒間続いて600rpmで10秒間スピンコート、。フォトレジストの感光性のために、前方にこの点から、部屋の照明をオフにしてください。 </li><li> 3分間95℃で"ソフトベーク"のためにホットプレートにコーティングされたシリコンウェハをフォトレジスト転送する。ホットプレートから外し、1分を冷却することができます。 </li><li>フォトレジストで覆われたシリコンウェハの上に所望のパターンを持つプレハブマスクを置き、20秒間紫外線（UV）照射（350〜450 nm）にさらす。 </li><li> 110"ハードベーク"のためのホットプレートに転送シリコンウエハ℃で6分間。 </li><li>ライトの電源を入れ、ホットプレートからウェハを取り外す。明確なパターンは、この時点で表示されるはずです。 </li><li>慎重にSU - 8フォトレジストの現像液でシリコンウエハをリンス。現像液の3洗浄した後、エタノールですすいでください。いずれかの白い残留物が存在する場合は、フォトレジスト現像液でリンス繰り返す、または単に水没ウエハを現像液で2分間とすすぎエタノールを進めます。水と空気乾燥で洗浄する。 </li><li>午前10時01分重量比で混合ポリジメチルシロキサン（PDMS）エラストマー溶液と硬化剤。気泡を除去するために5分間900rpmで遠心する。 </li><li>場所は、ペトリ皿の中でウェーハをパターニングしてシリコンウエハ上にPDMSを注ぐ。泡が消えるまで泡がカップル分間desicatorと真空の場所は、現在がある場合。 </li><li>補完的なエラストマーのスタンプを形成するために室温（RT）で一晩硬化する。 PDMSは、完全に30分間60℃のオーブンで行われる12時間、後硬化されていない場合。 </li><li>慎重にシリコンウエハからPDMSを削除します。希望のサイズにスタンプをカットするためにかみそりのエッジを使用してください。 15分間エタノールで超音波洗浄します。ウェーハは、新しいエラストマーのスタンプを作成するために複数回利用することができます。 </li></ol> 2。 HAのマイクロパターニング<ol><li> 5分間のプラズマ清浄なガラススライド。 5分間チャンバーと真空中にすべてのスライドを置きます。その後、酸素の低流量でチャンバーを入力することができます。 5分間のプラズマクリーナーを入れます。鉗子を用いてシャーレにプラズマクリーナーと場所から削除します。 </li><li>プラズマ洗浄の間に、15分間エタノールでPDMSスタンプを超音波で分解する。 </li><li> 15 mLの遠心管の95％v / vエタノールで3 - アミノプロピルトリメトキシシラン（APTMS）の新鮮な3パーセントv / v溶液を準備します。シラノールを形成するために室温で5分間反応することができます。 </li><li>パターンアップスピンコーターチャックとカバーの上に置いてPDMSスタンプは、APTMS液で表面をパターン化。 30秒間3500rpmでSpincoat。 PDMSスタンプの唯一の側面は、切手の表面に触れないでください。 </li><li>パターン化された側の一方の端に下向きにセットのスタンプを、それが1分間、ガラス表面に接触して完全になるように静かにPDMSを押すと、GLIDE：プラズマへ転送APTMSソリューションは、ガラス面を掃除した。 </li><li> PDMSは優しくスタンプと削除、およびパターン化されたスライドガラスは、30分間室温でインキュベートすることができます。エタノールと空気乾燥でパターン化表面を洗浄します。過剰APTMSを削除するには、15分間PDMSスタンプを超音波処理してください。 </li><li> 115℃で1時間オーブンでまたはホットプレート上に熱表面℃のエタノールでリンスし、空気で乾燥させます。 </li><li>トルエンの[メトキシ（ポリエチレンオキシ）プロピル]トリメトキシシラン - 新鮮なポリエチレングリコール（PEG） - シラン20パーセントV / V 2の溶液を調製します。これは、パターンを囲む非接着領域として機能します。 </li><li> 75℃で45分間、PEG -シラン溶液中でガラスシャーレのインキュベートに転送パターン化されたスライドガラスをホットプレート上に° C。トルエン、水、および空気と乾燥ですすいでください。 </li><li>生物学的安全キャビネット内の紫外線殺菌照射を使用して1時間滅菌する。無菌性を維持するために前方にこの時点から、生物学的安全キャビネットに進みます。 </li><li>水性滅菌HAソリューションを準備。 1 - エチル-3 - （3 - ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（EDC）の10mMの N -ヒドロキシスクシンイミドの5mMの 50μg/ mLのフルオレセイン標識HA </li><li>無菌状態でパターニングされたガラス基板にHAソリューションを適用し、光から保護。パターニングされた基板は、16〜24時間静にする必要があります。 </li><li> HAソリューションをオフ吸引、で洗浄し、リン酸緩衝生理食塩水を（PBS）、及び1時間PBSで（BSA）の1％ウシ血清アルブミンとの表面を覆う。表面は細胞培養の準備ができています。 </li></ol> 3。 HAマイクロパターン表面上における細胞培養<ol><li>製造業者の指示に従って、MDA - MB - 231ヒト乳癌細胞とLS174T大腸癌細胞を展開。 </li><li> 0.4 × 10の間に密度のがん細胞のシード単細胞懸濁液<sup18.75>2ガラスの表面積当たりとHA固定化表面へ&gt; 6癌細胞。 5％CO 2で維持雰囲気で加湿インキュベーター（37℃）でインキュベートする。細胞接着は、24時間以内に発生する必要がありますし、倒立光学顕微鏡を用いて観察することができます。 </sup18.75></li><li>細胞培養表面は、標準的なインキュベータの条件で5日間まで維持することができます。一日おきにメディアを変更します。細胞の形態と成長は、倒立光学顕微鏡を用いて観察することができます。追加の細胞アッセイは、HAの表面への応答を分析するために適用することができます。 </li></ol> 4。代表的な結果： 共有結合APTMSパターニングされたガラススライドにHAを固定するために使用されるカルボジイミド化学を図1Aに示されています。 EDCは、アミン反応性中間体を形成するために、HAのカルボキシル基と反応して長さゼロの架橋剤です。この中間体が加水分解を受けやすいとして、NHSは、カルボジイミド反応効率を高めるために追加されます。 HAソリューションはAPTMS微細パターン、HAの中間とATPMSの第一級アミンとの間の安定したアミド結合の形態と相互作用として。 HAパターン表面の例は、HAのパターン化された固定化を示す蛍光顕微鏡とImageJの蛍光強度の解析を用いて可視化（ 図1B - C）が表示されます。 HAマイクロパターン表面はexpgenous HAと癌細胞の相互作用の研究を可能にします。 MDA - MB - 231ヒト乳癌とLS174Tヒト大腸癌細胞株の両方が優先的にHAマイクロパターン領域（ 図2）に従っている。走査型電子顕微鏡を用いた高分解能イメージングは、HA固定化表面（ 図3）による培養細胞の相互作用を分析するために使用することができます。 <img src="/files/ftp_upload/2413/2413fig1.jpg" alt="図1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図1"> 図1 HAマイクロパターン表面のHA機能面の開発を記述する（）回路図、フルオレセインの（B）蛍光画像（緑）で標識されたHAマイクロパターン化表面。離散的なHAのパターンを示すImageJのソフトウェアを使用して（C）3Dピクセルの分布図。スケールバー=100μmの。エルゼビアから許可を得て9日から変更。 <img src="/files/ftp_upload/2413/2413fig2.jpg" alt="図2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> HAマイクロパターン表面上に図2。癌細胞接着。コロン（）と乳房（B）癌が優先的に文化の24時間とHAのパッチに付着両方。エルゼビアから許可を得て9日から変更。 <img src="/files/ftp_upload/2413/2413fig3.jpg" alt="図3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図3"> HAと図3。癌細胞の相互作用。 （A）大腸癌細胞の低倍率（左）と高倍率（右、左の上の正方形の）に示すように、HAの表面上に（）培養の電子顕微鏡像を走査し、乳癌細胞の（B）に示すように、HA表面上で培養低倍率（左）と高倍率（右、左の上の正方形の）。

<ol><li>Toole, B. P., Wight, T. N., Tammi, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyaluronan-cell+interactions+in+cancer+and+vascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Hyaluronan-cell interactions in cancer and vascular disease.</a> Journal of Biological Chemistry. 277, 4593-4596 (2002).</li>
<li>Hamilton, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Hyaluronan+Receptors+CD44+and+Rhamm+%28CD168%29+Form+Complexes+with+ERK1%2C2+That+Sustain+High+Basal+Motility+in+Breast+Cancer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">The Hyaluronan Receptors CD44 and Rhamm (CD168) Form Complexes with ERK1,2 That Sustain High Basal Motility in Breast Cancer Cells.</a> Journal of Biological Chemistry. 282, 16667-16680 (2007).</li>
<li>Götte, M., Yip, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heparanase%2C+Hyaluronan%2C+and+CD44+in+Cancers%3A+A+Breast+Carcinoma+Perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Heparanase, Hyaluronan, and CD44 in Cancers: A Breast Carcinoma Perspective.</a> Cancer Research. 66, 10233-10237 (2006).</li>
<li>Lord, M. S., Pasqui, D., Barbucci, R., Milthorpe, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+adsorption+on+derivatives+of+hyaluronic+acid+and+subsequent+cellular+response%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research%22%5BJournal%5D)">Protein adsorption on derivatives of hyaluronic acid and subsequent cellular response.</a> Journal of Biomedical Materials Research. Part A 91, 635-646 (2009).</li>
<li>Barbucci, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+hyaluronic+acid+by+sulphate+groups+insertion+to+obtain+a+heparin-like+molecule%5BTitle%5D)+AND+%22Gazz.+Chim.+Ital%22%5BJournal%5D)">Modification of hyaluronic acid by sulphate groups insertion to obtain a heparin-like molecule.</a> Gazz. Chim. Ital. 125, 169-180 (1995).</li>
<li>Morra, M., Cassinelli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-fouling+properties+of+polysaccharide-coated+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomaterials+Science%2C+Polymer+Edition%22%5BJournal%5D)">Non-fouling properties of polysaccharide-coated surfaces.</a> Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition. 10, 1107-1124 (1999).</li>
<li>Khademhosseini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Layer-by-layer+deposition+of+hyaluronic+acid+and+poly-L-lysine+for+patterned+cell+co-cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Layer-by-layer deposition of hyaluronic acid and poly-L-lysine for patterned cell co-cultures.</a> Biomaterials. 25, 3583-3592 (2004).</li>
<li>Ibrahim, S., Joddar, B., Craps, M., Ramamurthi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+surface-tethered+model+to+assess+size-specific+effects+of+hyaluronan+%28HA%29+on+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A surface-tethered model to assess size-specific effects of hyaluronan (HA) on endothelial cells.</a> Biomaterials. 28, 825-835 (2007).</li>
<li>Dickinson, L. E., Ho, C. C., Wang, G. M., Stebe, K. J., Gerecht, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+surfaces+for+high-resolution+analysis+of+cancer+cell+interactions+on+exogenous+hyaluronic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Functional surfaces for high-resolution analysis of cancer cell interactions on exogenous hyaluronic acid.</a> Biomaterials. 31, 5472-5478 (2010).</li>
<li>Gao, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyaluronan+oligosaccharides+promote+excisional+wound+healing+through+enhanced+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Matrix+Biology%22%5BJournal%5D)">Hyaluronan oligosaccharides promote excisional wound healing through enhanced angiogenesis.</a> Matrix Biology. 29, 107-116 (2010).</li>
<li>Slevin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyaluronan-mediated+angiogenesis+in+vascular+disease%3A+Uncovering+RHAMM+and+CD44+receptor+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Matrix+Biology%22%5BJournal%5D)">Hyaluronan-mediated angiogenesis in vascular disease: Uncovering RHAMM and CD44 receptor signaling pathways.</a> Matrix Biology. 26, 58-68 (2007).</li>
</ol>

許可を得て複製したビデオの概略図;著作権ワイリー- VCH出版社＆Co KGaA社。ディッキンソンLE、マラヤS、生体材料を使用して、胚性幹細胞の分化のニッチを再構築Gerecht S.。 Macromol。バイオサイエンス。 2010; 10月21日。 [印刷の前にトップ|]。

提示HAの微細方法は、外因性HAと細胞の相互作用の研究が可能になります。 HAは、癌の進行1に重要な役割を果たすことが知られているしかし、二次元のHAパターニング表面上での癌細胞の相互作用を調査する限られた研究が行われている。外因性HAの微細パターンで制御可能研究は癌細胞の接着、成長、および移行の高解像度可視化を可能にし、癌のさらなる基礎を解明することができる。 カルボジイミドの化学とマイクロコンタクトプリンティングを組み合わせることにより、我々は癌細胞の相互作用を研究するために、異なるHAパターンで表面を開発しました。このメソッドは、一貫してを含む細胞培養および解析技術と互換性のある表面をパターン化が、免疫蛍光染色、走査型電子顕微鏡、阻害、移行、などに限定されないことができますさらに、フォトリソグラフィ技術は、特定のアプリケーション用のHAの固定化を制御するために、任意のパターンの簡単な微細加工を可能にする。例えば、線形ストライプでPDMSスタンプを製造する線形配列でHAを固定化だし、パターニングされた...

<table><tbody><tr><td>SU-2025フォトレジスト</td><td>MicroChem Corp.</td><td>Y111069</td><td></td></tr><tr><td>SU-8現像液</td><td>MicroChem Corp.</td><td>Y020100</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 184</td><td>Dow Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3-アミノプロピルトリメトキシシラン (APTMS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>281778</td><td></td></tr><tr><td>2-[メトキシ(ポリエチレンオキシ)プロピル]トリメトキシシラン (Peg-silane)</td><td>Gelest Inc.</td><td>SIM6492.7</td><td></td></tr><tr><td>1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>22980</td><td></td></tr><tr><td>N-ヒドロキシコハク酸イミド (NHS)</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>24500</td><td></td></tr><tr><td>フルオレセイン標識ヒアルロン酸 (FL-HA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F1177</td><td>10mlの脱イオン水で再構成</td></tr><tr><td>MDA-MB-231乳がん細胞</td><td>ATCC</td><td>HTB-26</td><td></td></tr><tr><td>LS174t結腸がん細胞</td><td>ATCC</td><td>Cl-188</td><td></td></tr></tbody></table>

癌細胞とヒアルロン酸の相互作用を研究するマイクロパターン表面

Micropatterned Surfaces to Study Hyaluronic Acid Interactions with Cancer Cells

癌の浸潤や進行は、腫瘍の微小環境内での増殖因子/サイトカインや細胞外マトリックス（ECM）成分による複雑な規制下にある運動性細胞の表現型を伴います。ヒアルロン酸（HA）は、強化の侵入、増殖、および血管新生1で腫瘍の進行を容易にするために確認されている間質ECMコンポーネントです。その細胞表面の受容体CD44とHAの相互作用は、それによって転移拡散2-3増加、腫瘍細胞の増殖、生存、および移行を促進するシグナル伝達事象を誘導する。 HAは、D -グルクロン酸とDN -アセチルグルコサミンの繰り返し単位から構成される陰イオン性、nonsulfatedグリコサミノグリカンである。 、二糖繰り返し単位のカルボキシル及びヒドロキシル基の存在のためにネイティブHAの大部分は親水性とphotoreative固定化4-5硫酸基を導入する化学修飾の影響を受けやすいです。表面にHAの固定化を含むこれまでの研究では6-7表面上に細胞接着を制御するために、HAのbioresistant挙動とその硫酸化誘導体を利用する。これらの研究では細胞接着には、優先的に非HA模様の領域で発生します。 外因性のHAと細胞間相互作用を分析するために、我々は、制御の研究とHAと癌細胞の相互作用の高解像度可視化を可能にするパターン化された官能化された表面を開発しました。我々は、ガラスの表面にHAの離散パターン領域を定義するためにマイクロコンタクトプリンティング（UCP）を利用。 HAを固定化するカルボジイミドリンク化学を適用する&quot;テザリング&quot;のアプローチは8を使用しました。ガラスの表面は、マイクロコンタクトをアミノシランで印刷し、パターン化された配列にHA固定化を有効にするEDCとNHSの最適比率のHA溶液と反応させた。 MCPを搭載したカルボジイミド化学を組み込むと、in vitroでのアプリケーションに適したサーフェスを作成、定義された領域にHAの固定化を可能にした。両方の結腸癌細胞および乳癌細胞は、暗黙的にHAマイクロパターン表面と相互作用した。癌細胞の接着は、48時間で増殖して24時間以内に起こった。 HAマイクロパターン表面を使用して、我々は癌細胞の接着は、HA受容体CD44を介して起こることを示した。さらに、HA柄の表面は電子顕微鏡（SEM）と癌細胞の接着剤の突起の許容される高解像度の画像をスキャンし、外因性のHA上で癌細胞の運動性を分析するためにHAパターンで拡散との互換性があった。

外因性ヒアルロン酸（HA）と癌細胞の相互作用の高分解能解析を可能にする斬新なアプローチが説明されています。パターニングされた表面は、カルボジイミド化学とマイクロコンタクトプリンティングを組み合わせることによって作製されています。

がんの浸潤および進行には運動能を持つ細胞表現型が関与しており、これは成長因子やサイトカイン、および細胞外マトリックスによる複雑な制御を受けています...

がんの浸潤と進行には、腫瘍微小環境内の成長因子、サイトカイン、および細胞外マトリックス成分による複雑な調節下にある、特定の細胞表現型が関与しています。ヒアルロン酸（HA）は、細胞表面受容体であるCD 44との相互作用を通じて、浸潤、増殖、および血管新生を促進し、腫瘍の進行を促進することが知られている間質細胞外マトリックス成分の一つです。CD 44は、腫瘍細胞の増殖、生存、および遊走を促進するシグナル伝達事象を誘導し、それによって転移の広がりを増加させます。本研究では、外来性HA上でのがん細胞の接着、遊走、および増殖について検討します。標準的なフォトリソグラフィーを用いてマイクロパターンエラストマースタンプを作製し、それを用いてガラス基板上にアミノシラン分子のパターン化アレイを作成します。次に、カルボジイミド化学を用いて、マイクロパターン化されたアミノシランにHAを共有結合させます。これによりHAのマイクロパターンが形成されます。培養したがん細胞をこのHAマイクロパターン上に播種することで、外来性ヒアルロン酸とがん細胞との相互作用を、光学顕微鏡や走査電子顕微鏡、免疫蛍光顕微鏡などの高解像度イメージング技術を用いて視覚化することができます。本ビデオ記事で紹介するマイクロパターンHA表面の作製方法は、がんの進行における外因性ヒアルロン酸の役割をさらに解明するなど、がん研究分野における重要な問いに答えるのに役立ちます。まず、ガラススライドにHAをインプリントするために使用する、マイクロパターンポリメチルシルセスキオキサン（PMSE）またはPDMSスタンプを作製します。まず、ピンセットで新しいシリコンウェハーを取り上げます。次に、ラボのシンクの上で作業します。洗浄ボトルを用いてウェハをエタノールで洗浄し、エアストリームで乾燥させます。室内の照明を消します。次に、ピンセットを使用してウェハーをスピンコーターに移します。転写ピペットを用いてウェハー表面の少なくとも80%をSU 2025ネガフォトレジストで覆い、600 RPMで10秒間スピンコートします。続いて3000 RPMで30秒間コートし、フォトレジストを塗布したウェハーをホットプレートに移して、95°Cで3分間ソフトベークします。その後、ホットプレートから取り出し、1分間冷却させます。所望のパターンが形成されたプリフェブリケートマスクをフォトレジスト塗布済みのウェハの上に配置し、20秒間UV照射します。次に、ウェハをホットプレートに移し、110°Cで6分間ハードベイクします。照明をつけ、ホットプレートからウェハーを取り出します。この時点で、転写ピペットを用いて明確なパターンが確認できるはずです。ウェハーを現像液で3回すすいだ後、SU-8フォトレジスト現像液で慎重に洗浄し、エタノールでリンスします。白い残留物が残って

micropatterned-surfaces-to-study-hyaluronic-acid-interactions-with

Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

このビデオでは、マイクロパターン化表面を使用することにより、タンパク質 -...

マイクロパターン化表面でのタンパク質間相互作用の in vivo検出

細胞構造を正常化する接着剤微細パターンは、薬剤の効果の検出感度を向上させる再現性を改善し、自動画像収集と分析を簡素化するために使用できます。そのような技術は、従来の細胞培養担体上で実行し、結果的に過剰な細胞間のばらつきを患っている薬剤/...

マイクロパターン細胞を用いた薬物の効果の改善可視化と定量分析

私たちは、流体脂質二重層によって取り囲まれるナノメートルタンパク質のパッチでガラスを官能化するプロトコルを提示します。これらの基板は、高度な光学顕微鏡と互換性があり、細胞接着および遊走の研究のためのプラットフォームとして機能することが期待されます。...

サポートされている脂質二重層中のリガンドナノクラスター配列

アルギニン-グリシン-アスパラギン酸 (RGD) 表面の局所密度のナノスケール制御を許可、デンドリマーを用いた不均一な nanopatterns...

ローカル制御表面密着性にデンドリマーを用いた不均一な Nanopatterns: 軟骨細胞分化を指示する方法

本研究は、ユーティリティおよび定量的細胞膜拡張測定と細胞の接着能の相関性を示します。代表的な例として、Dickkopf 関連蛋白質 3 を紹介して (DKK3) が増加 lobopodia 形成を促進し、副腎皮質癌における細胞接着細胞の in...

細胞膜の拡張機能と癌細胞の接着の役割を勉強のキャラクタリゼーション

ここでは、脳マトリックスを模倣するように設計された直交可変生体内神経膠芽腫患者由来細胞の三次元培養のためのプロトコルを提案する.このアプローチは、生体外で、通常文化で失われた神経膠芽腫細胞体内の多くの特徴を維持する実験のプラットフォームを提供します。...

ヒアルロン酸を用いた神経膠芽腫患者由来細胞の 3次元培養ヒドロゲル

HMCA ベースのイメージング プレートは、浸潤アッセイ パフォーマンスが提示されます。このプレートは、三次元 (3 D) 腫瘍スフェロイドの形成と細胞外マトリックス (ECM)...

がん細胞の浸潤と転移防止薬剤のスクリーニングのハイドロゲル マイクロチャンバー アレイを用いた (HMCA) の解析-ベース プレート

補体成分C1qは、細胞外マトリックスと相互作用しうる組織微小環境において高度に発現する炎症性分子である。ここでは、ヒアルロン酸に結合したC1qが細胞接着にどのように影響するかを試験する方法について述述する。...

細胞接着促進における補体タンパク質C1qとヒアルロン酸間の相互作用の評価

近紫外線リソグラフィーとトラクションフォース顕微鏡を組み合わせて、マイクロパターン化されたヒドロゲル上の細胞力を測定します。単一細胞のターゲット光誘導放出により、同じサンプル上で多数の測定が可能になります。...

牽引力顕微鏡における応用のためのハイドロゲルパターン法を用いた細胞接着制御

我々は、軟質ヒドロゲル上の細胞外マトリックスタンパク質のドットアレイの単一の減法パターニングステップによるマイクロコンタクト印刷に基づく、細胞牽引力を測定するための標準的な方法の改善を説明する。この方法は、細胞クラスター形状を制御するために不可欠な島パターンのより簡単でより一貫した作製を可能にする。...

マイクロパターントラクション顕微鏡のパターン生成

私たちは、間質液の流れを組み込んだ浸潤前部の神経膠腫腫瘍微小環境を再現する方法を提示します。このモデルは、ヒアルロン酸-コラーゲンI型ハイドロゲルを組織培養インサートに含ませたもので、液圧ヘッドを適用することができる。浸潤を定量化し、細胞を単離または溶解することができます。...

間質流を有する浸潤性神経膠腫微小環境の光重合性ヒアルロン酸コラーゲンモデル

学ぶマイクロパターン表面を用いたヒアルロン酸と癌細胞の相互作用の可視化手法。カルボジイミド化学と微細接触印刷により、腫瘍微小環境における細胞接着・遊走・増殖を詳細に解析し、がん治療戦略の開発に貢献する。

癌細胞とヒアルロン酸の相互作用を研究するマイクロパターン表面

さらに動画を探す