マウスにおける運動協調性の測定

この手順の全体的な目標は、マウスの運動協調を測定することです。これは、最初に加速ローターロッドでテストすることによって達成されます。次に、オナルバーで運動協調性をテストします。

動物は静的ロッドでテストすることもできます。最後に、平行棒の性能を測定できます。最終的には、マウスに運動協調障害があるかどうかを示す結果を得ることができます。

一般に、この手法に不慣れな個人は、マウスを装置上に正しく配置するのが難しいため、次のすべてのテストで苦労します。マウスを試験の5〜20分前に実験室に連れて行き、マウスが完全に覚醒していることを確認します。ここのローターロッドシーンは、オックスフォード大学で作られました。

ロッドの直径は3センチで、その表面には一連の平行な隆起があり、マウスがロッドをより効果的につかむのに役立ちます。両側のフランジは、マウスがロッドから離れるのを防ぎます。直径は30センチ、間隔は6センチです。

ロッドは、装置の基部から30センチメートルのところに固定されています。試験を開始する前に、転倒を緩和するために、柔らかいパッド入りの表面がベースに配置されています。ローターロッドは、開始速度を毎分4回転、加速速度を毎分20回転に設定して準備します。

まず、マウスの尾を持ち、水平から45度の角度でロッドに向かって持ち上げます。動物がロッドに触れそうになったら、すぐに放します。あるいは、マウスをダボの上に降ろすことができ、ダボは動物をロッドに移すために使用されます。

マウスをロッドに置いてから10秒後に加速を開始し、マウスが脱落する速度に注意してください。マウスが 5 秒前に落下し、実験者による配置不良が原因である可能性が高い場合、マウスが 10 秒前に落下した場合は結果を記録しず、試験を再開する必要があります。時間を書き留めて、動物にさらに2回の試行を許可します。

10秒を超えて留まる動物の場合は、動物が落下する速度を記録します。時折、マウスが歩くのをやめ、その結果、ロッドの周りを攻撃して最終的に落下することがあります。この発生速度に注意すると便利です。

パフォーマンスは、試行間の平均速度として計算されます。たとえば、マウスが 10 秒前に一度落下し、その後 1 分あたり 12 回転するまでオンのままになるとします。2回目は、4に12を足した値を2で割った値で、1分あたり8回転に相当します。

水平バーは、下肢の強度と協調性を測定しますが、直径2ミリメートルのバーが最も一般的に使用されます。直径の大きいバーは、より洗練されたパフォーマンススコアを提供する可能性があります。長さ38センチの真鍮の棒は、木製の支柱によってベンチの表面から49センチメートル上に保持されています。

バーは、わずかに引き寄せられたサポートのノッチに取り付けたときに張力がかかった状態で保持されます。2 mm バーでテストを開始します。マウスの尾を持ち、装置の前のベンチに置きます。

素早くスライドさせます。約20センチ後方に回し、体をバーに対して垂直に素早く整列させます。動物を持ち上げて、中央の水平バーを4つの毛穴だけでつかむようにします。

テールを解除すると同時に、ストップクロックを開始します。マウスがバーをつかむことができず、実験者の配置が原因である可能性があります。転倒を記録したり、少し休んだ後に動物を再テストしたりしないでください。

マウスが5秒前に落下し、これが実験者による配置不良によるものではないと思われる場合は、5秒を超えるスコアを得るために最大3回繰り返します。マウスが落ちた時間または1つの4つの貧しい人が最大30秒のテスト時間で列に触れるまでの時間を記録し、最高のスコアをdatuとして取ります 右 水平バーをスコアリングします。質量が1秒から5秒の間に減少した場合は、6秒から10秒の間に1を獲得します。

11秒から20秒の間に2点を獲得します。21秒から30秒の間に3点を獲得します。スコア4は30秒後に落ちるか、30秒までバーに留まります。

5 点を獲得し、端に触れた場合、マウスも 5 点を獲得します。テスト中いつでも4つのポートでサポートします。2ミリメートルのバーで5のスコアが達成された場合、動物は短い休息の後に太いバーでテストすることができます。

4ミリメートルバーと6ミリメートルバーのスコアリングシステムは2ミリメートルバーと同じで、最終的なスコアは累積合計です。したがって、2 ミリメートル バーで 5 点を獲得したマウスが、13 秒後に 4 ミリメートル バーから落ちるマウスになります。スコア5プラスは8に相当します。

この運動協調の試験では、床から60センチメートルの実験棚に、直径35、28、22、15、および直径9ミリメートルの異なる木製のダウまたはロッドをGクランプで取り付けます。ベンチ付近の端から10センチのところに、フィニッシュラインを示すマークがつけられています。まず、最も幅の広いロッドの遠端にマウスを置き、棚から離れて、動物が棚に向きを変えるのにかかる時間とその合計移動時間を記録します。

向き付け中にマウスが逆さまになり、ロッドの下にしがみつく場合は、任意に最大スコアの120秒に割り当てます。動物は他のロッドではテストされず、最大トランジット値も受け取ります。マウスが落下したり、向きを変えてから最大テスト時間の120秒に達した場合は、幅の狭いロッドでマウスをテストしないでください。

マウスが向きを変えた後にロッドを横切っているときに逆さまになり、マウスをホームケージに戻し、テスト前に休ませた場合も、最大スコアが割り当てられます。次に小さいロッド。前に示したように、動物を小さい方のロッドに置きます。

マウスが 5 秒前に落ちた場合は、マウスを交換し、さらに 2 回まで試行します。ロッドを逆にする時間、またはマウスが落ちるまでの時間を記録します。平行棒は、長さ1メートル、直径4ミリメートルの2本のバーを木製の支持体に30ミリメートル離

床から60センチメートルの高さに柱があります。マウスを 2 本のバーの中央に置き、その長手方向の軸をバーに垂直にします。両方のフロントポアが1つのバーにあり、両方のヒヤポアがもう1つのバーにある必要があります。

スコアリングは、スタティックロッドのスコアリングと似ています。マウスが開始位置に90度向きを変えるまでの時間と、端部サポートの1つに到達するまでの時間の2つの対策が行われます。同様に、動物が逆さまにならないように方向付けと移動を達成する必要があり、そうでなければ最大時間が割り当てられます。

動物が5秒前に転倒した場合、それはおそらく配置が悪いためであり、動物は再テストされるべきです。スタティックロッドはもともと、自宅のケージに環境エンリッチメントがある場合とない場合の変異マウスの病気の進行を監視するために使用されていました。濃縮プログラムは、ロッドの運動機能障害の発症を劇的に遅らせ、これは後部の貧弱な留め具の発症の遅延と並行していました。

神経学的に損傷したマウスの一般的な兆候は、注射後16週目から、18週目からのローターロッドテストと少なくとも19週目からの静的ロッドで水平バーのパフォーマンスの低下を示しました。海馬の病変は、運動能力のいかなる測定にも影響を及ぼさなかったが、1 2 9 sの2つのSVマウスは、ローターロッドおよび静止ロッドに対するC57ブラックシックスのひずみと比較して、その発生後に障害された。この技術は、ハンチントン病の研究者がハンチントン病の変異マウスにおける環境濃縮の影響を研究する道を開きました。