Name: リバーシブル胆汁うっ滞ラットモデルの作成 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: 学ぶリバーシブル胆汁うっ滞ラットモデルの作成法。イソフルラン麻酔下でポリエステルチューブを用いた顕微鏡下マイクロサージカル手技により、可逆的な胆汁うっ滞を誘導します。肝機能研究と胆道系の病態生理学的変化の解明に有用です。

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1。ラット胆管の解剖学平均胆管径および長さはそれぞれ、1ミリメートルと29 mmであった。幽門と十二指腸乳頭間の平均距離は28 mmであった。胆管に開いて二つ膵管があります - 前部ダクトが左側に開き、後部ダクトは右側に開きます。これらの主要なダクトに加えて、膵臓のすべての3つの部分を排出マイナーダクトの数は、胆管に直接開きます。6 2。法全ての動物実験は倫理的な研究のための健康ガイドラインの国立研究所との合意で実施され、機関の研究委員会および動物ケア委員会によって承認された。 8週齢雄性Sprague - Dawleyラットをこのデモのために使用されていました。ラットは、ウィルミントン、マサチューセッツ州のチャールズリバー研究所から入手し、すべては300グラムを超えるであった。ラットは、標準的な実験室の食事へのアクセスを持っていたし、標準的な実験室条件下​​で一緒に収容された。 ラットは最初はイソフルランで麻酔し、マス​​クを介してイソフルランと手術中に麻酔下に保った。 2cmの正中切開は剣状突起から開始された。筋膜が開かれた後は、肝臓の葉は、センのリトラクターで頭側で撤回された、と十二指腸は綿棒を用いて尾側に撤回した。胆管が十二指腸に入る管状構造として同定された。胆管は、緊張下に置かれ、部分的に切開し。 0.6ミリメートルと0.9mmの外径の内径を持つ無菌5センチメートル長いポリエチレンチューブを使用した。この管の一端は、熱シールし、もう一方の端を穏やかに面取りされた。面取り端は、胆管に渡されました。これは、近位および胆管の開口部から遠位の両方の8から0ナイロン縫合糸を使用して所定位置に固定されました。密封端とともに、残りのチューブが腹腔内に配置された。手術部位は、通常の生理食塩水で洗浄した。腹部は、4から0ポリグラクチンの縫合で、2層で閉鎖された。白線は連続縫合で閉鎖され、中断された皮膚縫合を仕込んだ。皮膚の接着剤は、皮膚に塗布した。ラットは適切な水分補給を確実にするには、毎日の体重のモニタリングと標準的な実験条件の下で回復させた。 胆汁うっ滞の反転動作の場合、ラットでは、前述のようにイソフルランを用いて麻酔した。腹部は、以前の切開部位を介してオープンしました。管を同定し、腹腔から取り出した。管の周囲の大網癒着は鈍と鋭的剥離を使用して解放されます。十二指腸のサイトは、十二指腸造瘻術管の快適なポジショニングのために同定された。財布の文字列の縫合、直径2-3 mmの、その後8から0ナイロンを使用して配置した。十二指腸は、この財布の文字列の縫合糸の内部にオープンしました。チューブの密閉端を適当な長さに切断されました。胆汁の自由な流れが確保されました。チューブのこの端末は、その後、十二指腸に入れ、財布の文字列の縫合糸が締まっていた。腹部は層状に灌漑し、閉鎖された。 以前の研究では、総胆管十二指腸吻合術は異なる手法を用いて行ったここで、ラットは12週間生存したとラットは、その期間中に健康であった。またこの研究では、2週間の期間、胆管の閉塞を受けたラットの総胆管十二指腸吻合術後の生化学的および組織学的変化の反転を確認した。7

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kupffer+cell-derived+interleukin+10+is+responsible+for+impaired+bacterial+clearance+in+bile+duct-ligated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice.</a> Hepatology. 40, 414-423 (2004).</li>
<li>Saiki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+internal+biliary+drainage+is+superior+to+external+biliary+drainage+in+liver+regeneration+and+function+after+hepatectomy+in+obstructive+jaundiced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats.</a> Ann Surg. 230, 655-662 (1999).</li>
<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

利害の衝突は宣言されません。

胆汁うっ滞は、胃腸系の変化の無数につながります。研究は免疫系と栄養状態の変化を見て行われている。1-3胆汁うっ滞は、肝手術の転帰に影響を与えることができる。研究は胆汁の存在下で肝手術の予後を改善するために実行されている。医学研究の向上と4-5、さらなる研究が胆汁うっ滞に行われます。したがって、それは良い胆汁うっ滞モデルを持つことが必要です。ラットは、それが容易に入手可能であるため、実験動物として好ましい操作が簡単で、安価でhepatopancreatobiliaryシステムを研究するための頑丈なモデルです。6は、我々は今後の研究で使用することができる可逆的胆汁うっ滞モデルの作成 ​​を示すこのビデオの記事を通じ。

リバーシブル胆汁うっ滞ラットモデルの作成

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

胆汁うっ滞は、一般に外科医と消化器内科の両方によって発生する病態です。胆汁うっ滞は、様々な生理的変化を引き起こし、栄養状態や手術成績に影響を与える可能性があります。肝臓や他の臓器に発生する病態生理学的変化の研究は重要である。様々な研究が胆汁うっ滞ラットモデルで行われている。 我々は、虚血再灌流障害におけるメチルプレドニゾロンの役割を見て我々の最近の研究では可逆的胆汁うっ滞モデルラットを使用。可逆胆汁うっ滞モデルを作成するための様々な手法が記載されている。可逆胆汁うっ滞モデルラットの作成は、ラットの小さいサイズとユニークなhepatopancreatobiliary解剖学の観点から挑戦することができます。このビデオの記事では、可逆的胆汁うっ滞モデルの作成を示しています。 このモデルは、このような消化管で、栄養生理学的、病理学、組織学的および免疫学的変化の変化を調べるなど、様々な研究で使用することができます。このモデルは、胆汁うっ滞および主要な肝手術に関する様々な治療的介入の効果を確認するために使用することができます。

胆汁うっ滞は、一般に外科医と消化器内科の両方によって発生する病態です。可逆胆汁うっ滞モデルラットの作成は、ラットの小さいサイズとユニークなhepatopancreatobiliary解剖学の観点から挑戦することができます。このビデオの記事では、可逆的胆汁うっ滞モデルの作成を示しています。

胆汁停滞は、外科医と消化器内科医の双方が頻繁に遭遇する臨床状態である。胆汁停滞は、さまざまな生理学的変化を引き起こし、……

可逆的なラット胆汁停滞モデルの作製。皆さん、こんにちは。私はミシガン州サウスフィールドにあるプロビデンス病院・医療センターの外科レジデント、Goulashです。本日は、可逆的なラット胆汁停滞モデルの作製方法を実演します。ラットはチャンバー内でイソフルランを用いて麻酔をかけ、その後マスクで維持します。処置には、外径0.9 mm、内径0.6 mmのポリエステルチューブを使用し、片端は開放し、もう片端を密封します。使用する器具は、標準的なラット用固定台、マイクロサージャリー用器具、眼科用ピンセット、綿棒、8-0ナイロン糸です。処置は手術用顕微鏡を用いて行います。あるいは、サージカルループを使用して行うことも可能です。ここでは、ドレープをしっかりと固定しています。この処置は、すべての無菌操作を遵守して行われます。手術手順として、胸骨のジッパー状の縫合線から開始し、正中線に2 cmの切開を加えます。皮下組織と筋膜を鋏で切開します。ここで腹膜を切開し、肝臓を露出させます。携帯型電気焼灼器を用いて止血を行います。これがラット胆道解剖学における肝臓の中葉および左葉です。こちらはラット胆道解剖学の概略図です。ラットの肝臓は、右葉、中葉、左葉、および尾状葉に分かれています。これが胃であり、こちらが胆管です。ここで、胆管のかなりの部分が門脈および肝動脈に随伴していないことがわかります。胆管のこの部分が、フックによる結紮および胆汁停滞の誘発に使用されます。リトラクターを用いて肝葉を牽引し、綿棒を用いて胆管を下に引き下げます。その後、マイクロサージェリー用器具を用いて、胆管の近位側をフックで固定します。これは胆管を吊り上げる工程であり、別のラットモデルを用いて実演しています。ここでも同様に、手術用顕微鏡の外側から記録した胆管を吊り上げる工程を示しています。胆汁停滞の作成において、次に4-0ポリグリン酸ナノマー縫合糸を胆管の下に通し、胆管を牽引します。これは牽引された胆管です。こちらは拡大図です。ここで胆管を切開しています。次に、ポリチューブの先端をこの胆管に通します。この工程では、チューブフィーダー微小外科器具を使用して補助します。チューブをゆっくりと挿入するように注意してください。次に、近位胆管に窓を作成します。この窓に8番のナイロン縫合糸を通します。その後、ATO縫合糸を3つの正方形結び（スクエアノット）で結び、チューブを固定します。最初の縫合部位の近位側で、Blacの下に2つ目の窓を作成します。チューブを近位側で固定するために、もう1本のATO縫合糸を使用します。次に、胆管の遠位部に窓を作成し、そこにATO縫合糸を通します。これはまず、胆管を結紮するために使用します。次に、この縫合糸をチューブに巻き付けて結び、チューブをしっかりと固定します。ここで縫合糸を切断し、牽引縫合糸を引

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Research

JoVE Journal

Medicine

医学

胆汁の流れの混乱は、特徴的な時間依存性の形態学的変化を伴う重度の炎症性胆汁うっ滞性肝障害を引き起こします。ここでは、マウスの総胆管の外科的結紮のためのプロトコルを提示します...

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ここで我々 はコリン欠乏とエチオニン (CDE) の食事療法の供給によって慢性肝障害モデルマウスを誘導する一般的な方法をについて説明します。正常性の監視、肝灌流、分離、および保存を示します。6...

マウス コリン欠乏エチオニン (CDE) ダイエット慢性肝障害モデル

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肝硬変ラットにおけるポータル高血圧症侵襲血行動態評価

現在の研究で開発された急性肝不全動物モデルは、潜在的な治療法の研究のための実行可能な代替手段を提示します。現在のモデルは物理的および薬物誘発性肝障害の結合効果を採用し、新しい療法の可能性を研究するために適切な時間枠を提供する。...

70%部分肝切除術とアセトアミノフェンを組み合わせた急性肝不全ラットモデルの生成

このプロトコルは、オロ胃管を介してCCl4曝露を介して急性肝傷害(ALI)を誘発する一般的かつ実現可能な方法を記述する。CCl4曝露は、肝臓におけるその生体変換中に活性酸素種の形成を通じてALIを誘導する。この方法は、ALIの病態生理を分析し、異なる肝保護戦略を調べるために使用されます。...

四塩化炭素(CCl4)を介したラットの急性肝損傷を誘発する(CCl4)オロ胃管による暴露

重度の急性膵炎の動物モデルは、初期段階での病態生理学的変化の研究を可能にし、炎症事象の進化の観察を促進する。ここでは、麻酔をしたC57BL/6マウスの膵管内へのタウロコレートナトリウムの逆行注入による重症急性胆道膵炎の誘導プロトコルを提供する。...

C57BL/6マウスでタウロコレートナトリウム誘発重篤急性膵炎

慢性膵炎(CP)は、しばしば難治性腹痛に関連する膵臓の炎症および線維症を特徴とする疾患である。本稿では、2,4,6-トリニトロベンゼンスルホン酸(TNBS)を用いた胆管注入を介してCPのマウスモデルを生成する技術を改良することに焦点を当てています。...

胆管TNBS輸液による慢性膵炎のマウスモデル

重篤な急性膵炎のマウスモデルが本明細書に記載されている。ここで提示された手順は非常に迅速で、単純で、アクセスしやすく、それによって潜在的に急性膵炎における分子メカニズムおよび異なる治療介入を便利な方法で研究することを可能にする。...

ビリオ膵管へのタウロコール酸ナトリウムの逆行性注入を用いたマウス重症急性膵炎モデルの確立

ウイルス誘発性胆道閉鎖症(BA)の肝線維化機構研究に適した動物モデルと、将来のBA治療のプラットフォームを提供する慢性肝線維症のマウスモデルを確立しました。...

胆道閉鎖症研究のための慢性肝線維症のマウスモデル

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リバーシブル胆汁うっ滞ラットモデルの作成

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