子育てに最適化されたプロトコル Fopius arisanus、Tephritid果実の寄生ハエ

FOIA Ausは、熱帯地方全域、特にここハワイにおいて深刻な経済的害虫である果実実蠅を攻撃するため、ハワイにおける重要な生物学的防除剤となっています。FOIA Ausの優れた点は、害虫の卵の段階を攻撃し、それによって早期に害虫を抑制できることです。以下のクリップでは、研究室環境でFOIA Ausをどのように飼育しているかの接写映像をご覧いただけます。

そして本プログラムの最後には、この特定の寄生蜂がフランス領ポリネシアの放出プログラムでどのように活用され、成功を収めたかについての議論を紹介します。まず、ホストとなるミバエの卵に寄生可能な成虫の寄生蜂を用いてプロトコルを開始します。最初のステップは、寄生蜂に供するためのミバエの卵を準備することです。

次に、ショウジョウバエの幼虫を孵化させ、成長させ、蛹化させます。ショウジョウバエが蛹の段階に達したら、寄生虫を濃縮するためにサイズによって選別します。最後に、寄生虫を羽化させ、成熟するまで維持します。

その後、彼らは出会い、再び新しい果実のバッチに産卵する準備が整います。ハエの卵です。これでサイクルが完了します。

1辺が約10 cmの寒天ブロックを作成し、ショウジョウバエの卵用の基質を調製します。寒天は、水1 Lに対して寒天粉末9 gの濃度で調製します。

水平な場所で、ディッシュの縁まで液体オーガーを満たし、少なくとも45分間凝固させます。オーガーブロックが固まったら、各オーガーブロックの上面を覆うようにティッシュペーパーを1層重ねます。表面の水分により、ティッシュはオーガーに容易に密着します。

2回目のローリングを行います。ショウジョウバエの卵を、オーガーブロックの組織で覆われた表面に塗布します。懸濁液状態のショウジョウバエ卵 0.5 mLあたり、1ブロックにつき約6,000個の卵が得られます。

水に浸した幅 2.5 centimeter の絵筆を用い、ショウジョウバエの卵を組織表面に均一に広げます。次に、寄生虫による産卵を可能にするため、ショウジョウバエの卵を寄生虫ケージの底面スクリーン下に配置します。スクリーンの下面を叩くことで、ショウジョウバエへのアクセスを妨げる可能性のある死滅した寄生虫を除去します。ショウジョウバエの卵に寄生虫を一夜かけて産卵させます。

ショウジョウバエの卵の大部分に寄生させるには、約21時間で十分です。曝露時間を長くしすぎると、過寄生（Super parasitizing）のリスクがあります。寄生虫への曝露後に卵を飼育するために必要な主な構成要素は、ショウジョウバエ幼虫用餌、幼虫用餌容器、および蛹化容器です。

寄生卵をセットした3〜3.5個のオーガーブロックを、1.25 Lのショウジョウバエ幼虫用培地に配置します。卵を入れた培地容器をライザーの上に置き、その上に、1.5 cmの深さの細粒バーミキュライトまたは洗浄砂を敷いた蛹化容器を被せます。

マスキングテープで蛹化容器の縁を固定します。幼虫が餌容器から這い出し、下のバーミキュライトに入り込めるよう、餌容器の上端と蛹化容器の蓋の間に十分な隙間があることを確認してください。蛹化容器を温度27°C、相対湿度80%の室内に移し、1週間保持します。

1週間後、最初の4日間は容器を厚手の布で覆います。蛹化容器を開け、幼虫用の餌を取り除きます。foia Airisを飼育するためのホストショウジョウバエとして、Bre Dorsalsを使用します。

Asfa属およびSitis属の他の種も潜在的な宿主となります。バーミキュライト中に未蛹化の幼虫がいる場合は、一晩置いて蛹化させます。バーミキュライトから蛹を回収するには、粗いふるいと大きな容器を使用してください。

次に、手 sieve を使用して、残っている vermiculite Eria containing opia の塊を取り除きます。寄生されていないショウジョウバエから Ais を部分的に分離させます。先行研究に基づき、直径 1.65 から 2.26 millimeters の aria のみを回収します。それより小さいものは、ほとんどがサイズ不足の寄生蜂を含んでいます。

サイズの大きいariaには主にハエが含まれています。蛹をサイズ分けするために、さまざまな方法を用いることができます。ここでは、収集した寄生ariaに対してカスタムサイズのソーターを使用した機械的な分級方法について説明します。

雌の割合はサイズとともに増加します。機械式サイズ選別機の頂部にあるファンネルにプイを入れます。振動フィーダーによって、30度の角度でわずかに開いた一対のローリングバーの頂部へと移動させます。個々の個体がスロットの配列に落下し、ファンネルを通って10個の個別の容器に分かれて回収されます。

1.65 millimetersから2.26 millimetersのサイズ範囲の蛹を羽化ケージに入れ、ほとんどのハエが寄生された蛹から羽化するまで、さらに7日間保持します。次に、ファンを用いて、空になった蛹殻と、まだ生存している寄生蜂が含まれている蛹を分離します。Opia Ausのコロニーを維持するには、一辺が約25 centimetersで、前面が取り外し可能なガラス製となっている寄生蜂保持ケージを使用してください。

ケージの上面と側面の2面には、1 mm² のメッシュが張られています。ケージの背面はゴムシートで覆われており、アクセス用の 9 cm の穴が開いています。ケージの底面には切り欠きがあり、内側は 1〜2 mm² のメッシュで覆われています。

果実を入れた2つのオーガーブロックと、寄生虫を配置するためのハエの卵を設置できる十分な広さを確保してください。また、保持ケージの前面ガラスの下部4分の1には、ケージ前面への寄生虫の密集を最小限に抑えるため、着色部分を設ける必要があります。選定したaria約11 gを、直径約9 cmのプラスチック容器に入れます。

これにより、ケージあたり約600から700匹の寄生虫が得られるはずです。サイズ選別を行うことで、雌の割合を約60%にすることができます。容器にスクリーン付きの蓋を取り付けます。蓋には2平方ミリメートルの網目があるスクリーンを被せ、これにより羽化した個体が容器から脱出できるようにしつつ、残っているショウジョウバエを閉じ込めます。

寄生虫を24 °C、相対湿度約45%、12時間明期/12時間暗期の光周期、および良好な換気条件下で維持し、ケージの上部に遠心分離ハチミツを少なくとも週3回、線状に塗布します。または、塗布済みのハチミツが乾燥した際に、指先を用いて狭い線状に遠心分離ハチミツを塗布してください。塗布量が多すぎるとハチミツがケージ内に滴り落ちるため注意してください。逆に塗布量が少なすぎると、ハチミツがすぐに乾燥し、頻繁な塗布が必要になります。寄生虫に水分を供給するため、10 cm四方、深さ4 cmのアガーブロックをケージの上部に配置します。

これらのブロックは週に2回交換する必要があります。2001年、私たちは、当時ミカンキイロショウジョウバエがすべての熱帯果実に信じられないほどの被害をもたらしていたため、状況を改善するためにフレンチポリネシアに生物学的防除を導入できるかを確認するための少額の助成金を受け取りました。ここハワイの研究所から、私たちは10回の輸送を行いました。

通常、これらの出荷の1回あたり約10万匹のFopius arisanusが含まれていました。実際にはそれよりもかなり多かったのですが、寄生蜂を中に入れたミカンキイロショウジョウバエのパペット（蛹）の状態で輸送し、その後、羽化させました。そこでタヒチに小規模な研究室を設置し、これらを受け取ってからFopius arisanusを羽化させました。その結果、約1年ほどの期間で、100万匹近いFopius arisanusを放逐しました。

全体として、これはハワイ以外で最も成功した事例です。FOIA Ausがハワイで最初に導入された際、それは太平洋全域におけるミバエの生物学的防除の最良の例となりました。過去10年間で、Bactrocera dorsalis complexは世界中で激しく拡散しています。

このように、Bactrocera Carboは南米のスリナムに広がり、現在はブラジル北部にも浸透しています。また、Bacter Inanceと呼ばれる別の種がアフリカ全域に広がり、甚大な被害をもたらしています。さらに、bacter papayaの拡大も見られます。

したがって、今回の成功により、南米、アフリカ、およびアジアのその他の地域にこれらのFOIA Ausを展開する機会が開かれました。