マウス尾部リンパ浮腫モデル:マウス尾部に持続性リンパ浮腫を作製するためのIn vivo技術

リンパ管は皮膚真皮に存在し、その機能は組織から余分な間質液を除去することです。リンパ管の損傷は、間質腔に過剰な体液の蓄積を引き起こし、線維組織および脂肪組織の皮下沈着を増加させます。これらの変化はリンパ浮腫を引き起こします。

マウスの尾にリンパ浮腫を引き起こすには、麻酔をかけたマウスを取り、腹臥位に置きます。尾の付け根の遠位にある、適切に離れた部位で全層の円周皮膚切除を行います。最初の切り口より下の尾の別の部位を切開します。

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らかじめ作られた2つの切開部をつなぐ垂直の皮膚切開を行います。このカットを使用して、重ね合わせた皮膚パッチを切除し、外側静脈とリンパ管を露出させます。

色付きの追跡色素が入った注射器を取り、尾の端付近に皮下注射すると、リンパ管が青く見えます。リンパ管を横断し、創傷部位を包み、マウスを所望の時間監視します。

顕微解剖は血管内のリンパ液の流れを止め、体液は組織空間に集まります。その結果、持続的なリンパ浮腫は、手術部位の背側のマウス尾部の腫れとして観察されます。

まず、8週間齢の鎮静マウスを胸骨に配置し、尾を70%イソプロピルアルコールで準備します。ノギスを使用して、尾の付け根から 20 mm から始まる 5 mm 刻みで尾の直径を測定します。基部から20ミリメートルの尾に3ミリ

メートルの円周切開をマークします。

外科的顕微鏡拡大法で、細心の注意を払った 3 ミリメートルの全層皮膚切除を行い、下にあるすべての血管系を無傷のままにします。最初に真皮を通って上周のマークを切開し、次に最初の切開の遠位 3 ミリメートルの円周全層切開を行います。垂直な全層の垂直切開を行って2つの切開を接続し、歯付きの細いピックアップを使用して前縁をつかみ、無血管面の奥深くから真皮まで、および静脈外膜の表面をマイクロハサミで解剖します。

0.1 ミリリットルの 1% イソスルファン ブルーを尾の先端の近位に皮下注射します。外側尾静脈に隣接する、注射により青く見える2つのリンパ管を特定します。リンパ管を慎重に切断し、まっすぐな顕微手術用ハサミで外側静脈とリンパ管の間の平面を解剖します。リンパ管と外側静脈の間に1本のハサミ刃の先端を通し、刃を閉じてリンパ管を横断します。終了したら、尾の傷を滅菌の付着性透明な包帯で包帯します。