発達研究のためのウィンドウ鶏卵

クレイマーラボへようこそ。カリフォルニア大学アーバイン校神経生物学・行動学部のマット・コーンです。今日は、ビーズの配置、染料の注入、卵子の探索など、さまざまな操作のために鶏の卵を準備する方法を紹介します。

それでは、これ以上面倒なことはせずに、始めましょう。さて、では、卵をきれいにしましょう。その理由は、インキュベーターに入れることができるものがたくさんあるからです。

これをテープで密封します。私たちは、ウィンドウが卵子を取得する場所を少しでも回避し、卵子を取り出そうとするまでに胚が死ぬ可能性を増やすことを望んでいません。したがって、インキュベーターから見た場合、卵は大きい面を上に向けて座っています。

ですから、私たちがやろうとしていることは、先に進んで卵を取り、ただ横に向けることです。そして、それは2つのことを行うでしょう。1つは、窓がここにあること、そして2つ目は、胚が上に浮かぶ必要があることで、どんな種類の操作も行える

そこで、インキュベーターにあったラックから段ボール製のエッグホルダーまで、いくつか並べてみます。これは実際には、卵が配達されるときに箱に入っている作品です。そこで今日は、卵を保持するためだけに先

さて、その手配はあなた次第です。私はいつでもすべての卵にアクセスでき、どの卵も互いに触れていないため、このようにするのが好きです。万が一、ひび割れのある緩いものを見つけて落とした場合、それらはすべて互いに少しスペースがあります。

だから、私は先に進んで、ここにガーゼを取り、このように素敵なスタックを取り出して2つに分割します。ここでは70%のアルコールを摂取し、底が湿っているのを感じるまでそれを満たします。そして、それは私がすべての卵を綿棒で拭くためにこの全体のスタックを使用するつもりだからです。

だから、私はただ上からいくつかのものを取り出し、先に進んで、本当に上をやるだけですが、実際にはここで卵全体をほぼ回避します。そして、これが終わった後、アルコールはかなり早く乾くので、テープを貼ることができます。テープはきれいにくっつき、セットが完成する頃には、通常、最初のテープが乾いていて、卵の準備の次のステップに進むことができます。

ですから、もう一度、それをゴミ箱に戻せば、次のステップに進む準備が整います。さて、すべての卵がアルコールで拭かれたので、先に進んで卵の大きな側、卵の根元に排水穴を作ることができます。これにより、アルブミンを抽出しないと、胚が適切に座らないため、アルブミンを取り出すことができます。

操作は一切できません。だから、これは私がブレードを取り、このプラスチックテープを取るだけです。少し伸縮性があり、それは素晴らしいことです。

私たちが望むよりも少し大きい穴を広げることを許可するだけでなく、実際に卵全体を覆うとき、私たちはこれを伸ばす必要があります。そのため、ウィンドウが表示される領域は完全に覆われています。だから、私はただ先に進んで、このようにピースを切り取り、それから約ミリメートルのストリップを作るつもりです。

そして、これから約1ミリメートル四方のテープを作ることができます。そして、これから先に進んで、日付のすぐ左上に配置します。そこに置くだけで、見ることができます。

とても綺麗にくっついています。その後、すでに作成したストリップに戻り、さらに1ミリのテープを切り取ります。そしてまた、そこにある数字の左側、つまり実際には卵の上部に置いてください。

横に回したので、右に傾いています。そして、ここにもう1つ。手袋を着用すると、このテープが手袋にくっついて手を洗ったので、今は手袋を着用していません。

現時点では、アクティブを汚染する他の何かについてはあまり心配していません。だから、先に進んで、先の尖ったハサミを取ってみます。テープを置いた場所の中央に移動し、反時計回りに時計回りに回して、少しだけ穴を埋めます。

そして、そこに小さな穴があることがわかります。このシリンジを入れると、穴が十分に大きくなるので、穴をそれほど大きくする必要はありません。しかし、これは私たちが針でまっすぐに卵を割ろうとしないためです、なぜならそれはしばしば卵の側面全体がバラバラになることにつながるからです。

そうなると、卵はもう使えません。さて、それでは先に進んで卵を排出します。側面に小さな穴が開いているので、この10ミリリットルの注射器とかなり大きなゲージの針を使ってアルブミンを抽出します。

今は3ミリリットルか4ミリリットルくらい、間違いなく3ミリリットル以上、4ミリリットル半か5ミリリットル以上は欲しくないです。これにより、上部に座っている胚が殻から少し離れて落下できるようになります。そして、私たちは操作を行うことができるようになります。

だから、45度の角度で入ることで、私は卵黄の下にいます。そして、少し右に回してその下に潜り込もうとすると、針先が卵の底に触れているのを感じることができます。そして、私は先に進んで、約3つまたは4つを抽出するつもりです、そしてそれはかなりきれいに出てきます。

私は先に進んで、そのアルブミンをここで腰のバケツに入れます、そして今、私は他の卵子を続けることができます。さて、では先に進んで続けます。そして、ここで、排水用に開けた穴が思ったよりも少し大きいことがわかりますが、それは問題ないことがわかります。

私が心配したいのは、針を刺しているので、もう割れないことです。だから、私は先に進んでそれをするつもりです。さて、卵には少しひび割れがあるのがもうわかります。

今、小さな亀裂は大丈夫ですが、それが卵の別の平面に広がる場合は心配する必要があります。そして、この場合はそうです。それは穴から見ることができます。

それはかなり上部まで伸びています。そして実際、これが私たちの窓が置かれる場所です。だから残念ながら、この卵については、私たちは行かなければならない、そしてこれを捨てるつもりです。

そして、それを捨てることに特別なことは何もありません。特定のプロトコルなどを書く必要はありません。ただ先に進んで、それを廃棄物バケツに入れるつもりです。

この黒いゴミ箱は動物の排泄物として指定するために使っていますが、それ以外はすでに処理されています。次の卵に進むことができます。さて、すべての卵を排出したので、先に進んで排水穴を覆うことができます。

これは重要なことで、インキュベーターの内部に入らないと、アルブミンの残り物が大量に蒸発してしまうからです。そして、乾燥している卵は死んでいる卵です。そこで、同じサイズのテープを穴にかぶせるだけで、再びこの穴に入る心配はありません。

場合によっては、卵子からより多くのアルブミンを排出してみたいと思った場合、卵が開いたら、この穴が少し密閉された領域として機能し、針を刺すと、アルブミンが大量に失われることはありません。いいですか?さて、それでは先に進んで、卵をちょうどいいサイズのテープで覆います。

これは、風船に小さなピンを入れる前にテープをかぶせるようなものです。クールなのは、風船がはじけず、この場合は卵の上に小さなテープが貼られていることです。卵は複数の場所で割れず、窓を密閉し、窓が閉まると、テープを使用したため、小さな密閉性が生まれ、蒸発の心配はありません。

テープのサイズは、おそらく私がこれまでにカットした中で最大ですが、それでも少し伸ばして引っ張って、そこに少しテンションを入れて卵の上に置きます。そして、ここの後ろに回って、窓がどこにあるのかのすぐ上にしわが寄らないように、卵の上で非常に慎重に伸ばします。また、テープを少しリセットすることもできます。

それは、気にするほどくっついていないということです。一度動かなくなったら、動かなくなる。そして、この一般的なエリアは、私が先に進んで窓をカットするところです。

さて、すべての卵にテープが貼られたので、先に進んで上部の窓を切り取ります。これは最も難しい部分であり、多くの場合、これはあなたがあなたの卵の大部分を失う場所です。だから、アルコールが付着したガーゼでハサミをよく拭いてから、乾かしてみ

アルコールは自然に乾きますが、アルコールが卵に直接入るのは望ましくありません。だから、テープがある場所の真ん中に行って、もう一度、少し割れる音が聞こえるまで時計回りの反時計回りの動きを使用します。そして、私の刃が入っていることが分かります。

そして、ハサミを動かして、卵の表面に対してほぼ平らになるようにしたいのです。そして、ハサミを全部入れることができるまで、小さな切り取りをするだけです。そして、半円くらいにしたら、逆に戻ってきますが、窓が欲しいので円を完成させたくないのですが、そうすれば先に進んで卵を開けることができます。

そして今、私が予想していた年齢くらいの年齢のようですが、血管はそれほど多くありませんが、胚が座っている場所の周りには、主に血液が始まり、心拍がなくなった錯乱領域から少し血液が流れています。だから、私はそれを閉めるつもりです、ただそのように上に座らせて、再び回って、私は先に進んで窓を閉めます。そしてまた、ただ、表面に対して平らにして、逆方向に戻るだけです。

さて、ここにはいくつかの泡があり、胚が横にずれていることがわかりました。さて、今、私たちにできることは2つあります。卵がたくさんあり、すべての卵を使用することを心配していない場合は、先に進んでこれを捨てることができます。

あるいは、窓を閉めて、胚が再び必要な場所の上部まで浮かぶように設定することもできます。そして、私たちが操作してそれに到達する頃には、それは私たちが望む場所になっているかもしれません。そうでない場合は、その時点で破棄できます。

だから、ここで私がやったことは、それを斜めに設定することです。アルブミンの流出が少しありますが、それはその胚が必要な場所に戻るのを助けます。さて、これらすべてのウィンドウが揃ったので、操作を行う前に、ウィンドウが閉じていることを確認し

そして、先に進んで卵を再密封することができます。しかし、窓が開いていると、ヨークが滑り落ちることがあります。ある部屋から別の部屋に歩いているときに卵が少し傾くだけだとわかっているなら、全体が落ちるのは望ましくありません。

だから、私がやっているのは、プラスチックテープをもう1ミリの長さ、または申し訳ありませんが、幅1ミリメートル、おそらく約3、2、3ミリメートルの長さの部分をカットすることです。そして、私はそれをちょうど真ん中に置くのが好きです。そして、卵の前で引き下げることができれば、それはそれをきつく締めます。

そして、窓がどこに収まるか、他のテープがどこにあったか、窓を切った場所を見て、今回はかなり密閉されています。つまり、私たちは先に進み、わずか1分でいくつかの操作を行うつもりなので、完全に気密である必要はありません。これが、卵の準備とウィンドウングの方法です。

だから、あなたの実験に頑張ってください。