Name: fMRIの持つ認識と非認識恐怖記憶の神経機構を調査する (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-10-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 51 s
Description: 学ぶfMRIと皮膚電気反応を用いた恐怖条件付けにおける認識と非認識記憶の神経基盤。海馬と扁桃体の活動差を明らかにし、恐怖学習の神経メカニズムを理解する。

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1。精神生理学モンテシステム、（株）生理学的モニタリングシステムは、（特定の機器の表を参照）ほとんどの画像処理施設における非標準装備です。生理学的モニタリングとこのプロトコールに記載されて他の機器（図1）を設定する前に参加者の到着まで15〜30分のスケジュールを設定します。 <ol><li>標準のイーサネットクロスオーバーケーブルを（CBLETH2）を使用してBIOPAC MP150（MP150WSW）に制御室のコンピュータのオペレーティングAcqKnowledge（モンテシステム、（株））生理的な監視ソフトウェアを接続してください。 </li><li> DB25 M / Fリボンケーブルを使用して、ソフトウェア、制御室のコンピュータのオペレーティングプレゼンテーション（アルバニー、カリフォルニア州神経行動システムズ株式会社）にBIOPAC絶縁型デジタルインターフェース（STP100C）を接続します。 </li><li>シールド延長ケーブル（MECMRI - 3）を使用して制御室内のRF干渉フィルター（MRIRFIF）にBIOPAC GSRアンプ（EDA - 100C - MRI）を接続します。 </li><li> MRIスキャンのチャンバー内にシールド延長ケーブルへのRF干渉フィルター（MRIRFIF）（MECMRI - 1）を接続します。 </li><li>ラジオ透明電極（EL508）に接続する炭素繊維のリード線（リード108）にシールド延長ケーブルを接続します。注：タイトなスパイラルにリード線をツイストは、スキャン中に作成することができる皮膚コンダクタンスデータのアーティファクトを減らします。 </li><li>参加者の左手の中指、薬指の末節骨にラジオ透明電極（EL508）を取り付けます。 </li><li>機器をスキャンの性質のため、MRI室の部屋の温度はしばしば21℃以下に設定されています手の温度を維持するために毛布を持つ参加者をカバーする。 </li></ol> 2。行動反応（ジョイスティック） <ol><li> USB -ミニケーブルを使用して、ジョイスティックのfORPインタフェースユニット（フィラデルフィア、ペンシルバニア州、現在の設計、株式会社）に、制御室のコンピュータのオペレーティングプレゼンテーションソフト（アルバニー、カリフォルニア州神経行動システムズ株式会社）を接続します。 </li><li>制御室内fORPインタフェースユニットへの光ファイバケーブルを接続し、MRI室に導波管にケーブルを通しやすくします。 </li><li> MR -互換のジョイスティックに光ファイバーケーブルを接続します。 </li><li>位置に到達するための快適かつ簡単にジョイスティックを配置するために直接参加。 </li></ol> 3。刺激提示<ol><li> IFIS - SA（Invivo社、オーランド、フロリダ州）制御室のコンソール（図1）の外部VGAポートとオーディオポートに制御室のコンピュータのオペレーティングプレゼンテーションソフトウェアを接続してください。 </li><li> IFISの制御室のコンソールとIFISペリフェラルインタフェースユニットMRI室内だけでなく、周辺機器インタフェースユニットおよびオーディオ/ビジュアルディスプレイユニット間の接続の間に光ファイバケーブルの接続を確認してください。 </li><li>参加者は、ヘッドコイルに接続されたミラーを介してモニターを見ることができるようなヘッドコイルの後ろにオーディオ/ビジュアルディスプレイユニットを置きます。 </li><li>ビニールチューブを使用してIFISシステムのMR -互換のステレオヘッドフォンにオーディオ/ビジュアルディスプレイユニットの音響インターフェースボックスを接続します。 </li><li>音圧レベル計を用いて聴覚刺激の音量を校正します。 </li></ol> 4。実験手順<ol><li> 2トーンが試験中に何度も提示されること、そして音の音量が上下にそ​​の知覚閾値（図2）変化することを参加者に通知する。 </li><li>直接参加者は0〜100スケール（図3）上の評価のバーの位置を制御するためにジョイスティックを動かして、UCSを受けての彼らの期待を更新するし、どちらかの音を聞いた直後にジョイスティックボックスのボタンをプッシュする。 </li><li> 0から100までの連続的な規模でそのUCS寿命を評価するために、参加者に指示します。 0のユーザ評価を基にして彼らはUCSが提示されることはありませんが確実なことを示すことを知らせる、50の格付けは、UCSが提示されるかどうか不明な示し、そして100の定格は、UCSが提示されるが確実な示している。直接参加者は、中間の期待を示すために、規模で他の値を使用する。その後、参加者が評価をするためにジョイスティックを使用して練習することができます。 </li><li>条件刺激（CS）とUCSのような大声でホワイトノイズ（100デシベル、500ミリ秒）として2トーン（20代ITI; 10秒持続時間700＆1300 Hz）を用いて差動の恐怖条件付けの手続きへの参加者を公開します。 </li><li> CS +（UCSでcoterminating）と同じCSの3回以上の試行が連続して記載されているような疑似ランダム順でCS -（UCSなしで提示さ）の60試験の現在の60試験。 </li><li>カウンターバランスCS +とCS -間の参加者としてのトーン。 </li><li> CS +とCS -独立のボリュームを調節している。同じCSを持つ後続の試行でCSの音量を調整します。ボタンの押下が（認知裁判に続くすなわち）とした場合、CSのボリューム5dBと減少する。 （人目に審理の後、すなわち）ボタンを押すが行われていない場合、ボリューム5dBと増加する。 </li></ol> ve_title"&gt; 5。スキャンの手順<ol><li>機能的なデータのための解剖学的な基準となる標準的な高分解能T1強調構造の画像を（例えばMPRAGE）収集。 </li><li>コンディショニングの手順の間に脳全体のBOLD fMRIを収集する。三十六、4mm厚のスライスは、比較的標準撮像パラメータ（例えば、TR = 2000ミリ秒、TE = 30ミリ秒、FOV = 24センチメートル、64x64のマトリクス）で脳をカバーする十分なはずです。 fMRIのトリガーボックスを使用して刺激提示によるfMRIの買収を同期させる。 </li></ol> 6。 SCRデータ収集＆分析<ol><li> AcqKnowledgeソフトウェアとセクション1で説明したMR -互換性のあるBIOPAC生理学的モニタリングシステムを用いて2000 Hzでサンプルの皮膚コンダクタンス。 </li><li> （図4を参照）撮像中に生成されたアーティファクトを減らすために皮膚コンダクタンスデータから1 Hzの無限インパルス応答（IIR）ローパスデジタルフィルタを適用します。 </li><li> 250ヘルツで皮膚コンダクタンスデータを再サンプリングします。 </li><li>応答の開始から応答のピークに皮膚コンダクタンスレベルの差としてSCRを計算する。 </li><li> SCRのデータは統計分析の前に、応答振幅の分布を正規化するために変換された平方根になります。 </li></ol> 7。 UCS寿命データ収集＆分析<ol><li>サンプル（40 Hz）とプレゼンテーションソフトを使用してレコードUCS寿命データ。 </li><li> CSのプレゼンテーションの最後の秒間の平均値（1秒サンプル）応答としてUCS余命を計算する。 </li></ol> 8。機能的MRIデータ収集＆分析<ol><li>機能的画像解析ソフトウェアのパッケージを（例：AFNI 18）を使用して脳画像データ（例えばスライスのタイミングの補正、画像の登録、空間スムージング）の完全な標準のプリプロセッサ。 </li><li>標準的な迷惑（例えば運動）と、CS +とCS -だけでなく、UCSの感知と人目に試験のための刺激ベースの説明変数を作成します。 </li><li>モーターの応答ベースのボタンを押したときの反応にかかわる運動を考慮するための迷惑リグレッサとして機能する基準波形を作成します。 <ol class="lalpha"><li>スティックの機能を作成して、そのボタンを押したときの応答のタイミングのためのコード。 </li><li>標準的な血行動態応答関数（HRF）でボタンを押したときのスティックの機能をコンボリューション。 </li></ol></li><li>モーターの応答ベースのジョイスティックの反応にかかわる運動を考慮するための迷惑リグレッサとして機能する基準波形を作成します。 <ol class="lalpha"><li> UCS寿命定格の傾きの変化（例えば、傾きの絶対値&gt; 10）のタイミングのためのコードがそのスティックの関数を作成します。 </li><li>正規のHRFとジョイスティックの傾きスティックの機能をコンボリューション。 </li></ol></li><li>すべての刺激ベースと迷惑リグレッサを使用して最初のレベルの分析を行います。 </li><li>アクティベーションはCSタイプ、知覚の主効果、またはCSタイプXの知覚の相互作用の主効果を示している領域を識別するための測定ANOVAを繰り返さ番目のレベルを実行します。 </li></ol> 9。代表的な結果： 方法論は、知覚されたCS -試験（図5）10,15,19の間に知覚されるCS +試験と低格付けの間に比較的高いUCS寿命の評価でここに典型的に結果を発表した。このような結果は、参加者は、CS - UCS不測の事態に気づいていることを示します。人目に臨床試験で、UCSの寿命定格は、通常、事前にCSの評価変わりません。 50を示す参加者がUCSが10,15,19（図5）を提示されるかどうかがわからないの近くにこのような人目にCS +とCS -試験に関するUCSの寿命は一般的に落ちる。人目にCS +とする差動UCS寿命の評価を生成するためには、このことができない参加者が人目にコンディショニング試験（図6）に、その不測の事態の認識を表現することができないことがCSを示します。対照的に、SCRの学習に関連する変更は、両方の知覚と人目にコンディショニング試験10,15,19の間に観察されている。具体的には、SCRのは、知覚よりも知覚CS +に大きくなったCS -。同様に、大規模なSCRは人目にCSの間に実証されている+ CS -試験10,15,19（図6）人目よりも。一緒に、これらの行動と自律神経のデータが人目に試験に関するコンティンジェンシー意識することなく知覚試験に関するコンティンジェンシーを意識した恐怖条件付け、および恐怖条件付けを示しています。この方法論を使用して機能イメージング研究は、知覚上の学習に関連する海馬活性化が、人目にないコンディショニング試験15（図7）実証されています。対照的に、差動扁桃体の活動は、両方認識し、人目にコンディショニング試験15日に観察された。これらの知見は、扁桃体は意識がある場合とない場合のCR式をサポートしている間に海馬は、不測の事態の認識に関連するプロセスをサポートしているという見解と一致している。 / 3083/3083fig1.jpg"ALT ="図1"/&gt; 図1。刺激提示と行動/心理生理学的反応のモニタリングのための基本的な設備の図。プレゼンテーションソフトウェアは、右手でジョイスティックを動かすことによって作られた視聴覚刺激とモニターUCS寿命の評価を表示するために使用されます。 AcqKnowledgeソフトウェアとBIOPAC機器は、左側から皮膚コンダクタンスを監視するために使用されています。固体（モンテ）は、単一の（IFISオーディオビジュアル）の破線、および二重破線は（光ファイバージョイスティック）別個の刺激提示と応答監視システム用のケーブルを表しています。黒い矢印は、情報の流れの方向を示している。 <img src="/files/ftp_upload/3083/3083fig2.jpg" alt="図2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> 図2。条件刺激。 CS +とCS -に同じCSの3回以上の試行が連続して提示されるように、擬似乱数の順番を提示する。 CS +とCS -独立のボリュームを変化させる。 CSが（ボタンを押すことによって示される）認識されている場合は、同じCSのその後の裁判にCSのボリューム5dBと減少。 CSが（ないボタンの押しで示される）人目にされている場合は、同じCSとその後の裁判でCSのボリューム5デシベルを上げる。 <img src="/files/ftp_upload/3083/3083fig3.jpg" alt="図3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図3"> 図3。UCS寿命の評価スケール。参加者は0〜100のスケールでUCSのプレゼンテーションの彼らの期待を評価するように指示します。 0のユーザ評価を基にしてUCSを提示されない確実性を示すため、100の定格は、UCSが提示される確実性を示し、50の格付けは、UCSが提示されるかどうかの不確実性を反映している。中間評価は、UCSの寿命の階調を示すために使用する必要があります。 <img src="/files/ftp_upload/3083/3083fig4.jpg" alt="図4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図4"> 図4：生と濾過皮膚コンダクタンスデータの比較。 A）生の皮膚コンダクタンスのデータは、fMRIの間に収集。 B）1HzのIIRローパスフィルタの適用後の皮膚コンダクタンスのデータが。 <img src="/files/ftp_upload/3083/3083fig5.jpg" alt="図5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図5"> 図5。UCS寿命の評価。 - 参加者は、一般的に知覚されるCS -試験で認識されているCS +試験や低寿命の高いUCSの寿命を報告する。人目にCS +とCS -試験に関するUCSの寿命は違いはありません。 <img src="/files/ftp_upload/3083/3083fig6.jpg" alt="図6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図6"> 図6。UCSの寿命とSCR。 UCSの寿命の違いは、一般的に示す参加者が刺激の不測の事態を認識している知覚CS +とCS -臨床試験で観察される。人目に臨床試験で、UCSの寿命定格は、通常、参加者は、不測の意識を表現することができないことを示す違いはありません。対照的に、エアコンSCRの違いは、通常、両方の知覚と人目にコンディショニングの臨床試験で観察される。そのような調査結果はと（すなわち知覚試験に関する）と（すなわち、人目に試験に関する）緊急時の意識せずに学んだ恐怖の発現を反映している。 <img src="/files/ftp_upload/3083/3083fig7.jpg" alt="図7" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図7"> 図7。海馬と扁桃体の機能的MRI。海馬の応答は、一般的に知覚されるCS -に比べてCS +に大きいですが、コンディショニングの臨床試験を気付かれていないではない。差動扁桃体の応答は、一般的に認識し、人目に両方コンディショニング試験で観察される。これらの知見は、扁桃体は意識がある場合とない場合の恐怖の表現をサポートしている間に海馬は、不測の事態の認識に関連するプロセスをサポートしているという見解と一致している。

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</ol>

利害の衝突は宣言されません。

ここで説明する恐怖条件付けの方法論は知ってと気づかない恐怖の記憶過程の神経機構を調査する手段を提供します。このメソッドは、行動の自律、およびfMRIデータの同時モニタリングを活用しています。監視行動（すなわち、UCSの平均余命）と自律神経系の反応（すなわちSCR）は、この方法の重要なコンポーネントです。 SCRは、CR式のインデックスを提供する一方、UCSの寿命は、不測の事態の認識を評価するための手段を提供します。一緒に、これらの行動と自律神経系の反応は、緊急時の意識がある場合とない恐怖条件付けを調査するために上記とサブスレッショルドCS +とCS -試験のプレゼンテーション中に使用することができます。機能的MRIデータは、認識して知らない恐怖の記憶過程の神経相関を調査するために使用することができます。この方法論の特定の強みは、コンディショニングの裁判の各タイプ（つまり、知覚されるCS +＆CS -、人目にCS +＆CS -）への参加者を公開するということです。ここで説明しているような被験者内デザインは、SCRとfMRI信号応答の両方で観察された比較的大きな被験者間のばらつきの主題の設計との間のより強力です。この方法のもう一つの強力な点...

<table border="1"><tbody><tr><td>機器の</td><td>会社</td><td>アイテム数</td></tr><tr><td>統合された機能イメージングシステム（IFIS - SA） </td><td> Invivo（株）、オーランド、フロリダ州</td><td></td></tr><tr><td>マスターコントロールユニット（制御室にある） ペリフェラルインタフェースユニット（MRI室にある） オーディオ/ビジュアルディスプレイユニット（MRI室にある）、含まれています： <ul><li> 6.4&quot;（対角）液晶ディスプレイのビデオスクリーン<ul><li> 640 × 480の解像度と視野の15 °のフィールド</li></ul></li><li>音響インタフェースボックス<ul><li>空気音はステレオで提供</li></ul></li><li> MR -互換性のあるステレオヘッドフォン</li></ul></td><td></td><td></td></tr><tr><td>生体モニタリングシステム</td><td>モンテシステム、（株）、ゴレタ、カリフォルニア州</td><td></td></tr><tr><td> Windows用のデータ収集及び解析システム（MP150） 絶縁型デジタルインタフェース（ ディジタルインタフェース ） 電気皮膚反応（GSR）アンプ MRIケーブル/トランスデューサアンプのセットにフィルターシステムは、含まれています： <ul><li> MRI延長ケーブル（フィルタの商工会議所） </li><li> RF干渉フィルタ</li><li> MRI延長ケーブル（GSRアンプはフィルタする） </li></ul> 追加のコンポーネント： DB25 M / Fリボンケーブル 使い捨てradiotranslucent電極 炭素繊維は、リード</td><td></td><td valign="top"> MP150WSW STP100C EDA100C - MRI MECMRI - TRANS - MECMRI - 1 - MRIRFIF - MECMRI - 3 CBL110C EL508 LEAD108 </td></tr><tr><td> JOYSTICK </td><td>現在のデザイン、（株）、フィラデルフィア、ペンシルバニア州</td><td></td></tr><tr><td>レガシージョイスティック</td><td></td><td> HH - JOY - 4 </td></tr><tr><td>レガシーfORPインタフェース</td><td></td><td> FIU - 005 </td></tr></tbody></table>

fmriの持つ認識と非認識恐怖記憶の神経機構を調査する

Investigating the Neural Mechanisms of Aware and Unaware Fear Memory with fMRI

パブロフ恐怖条件付けは、多くの場合、連想学習1-5の神経基質を調査するために、ヒトにおける機能的磁気共鳴画像（fMRI）と組み合わせて使用されています。これらの研究では、それは脳活動の違いが学習関連、人間の行動と相関していることを確認するために空調の行動の証拠を提供することが重要です。 学習と記憶6-8の指標として、恐怖条件付けの研究は、多くの場合、自律神経系の反応を（SCRなどの皮膚コンダクタンス応答）の監視。さらに、他の行動措置は、学習過程および/または調節に影響を及ぼすその他の認知機能に関する貴重な情報を提供することができます。例えば、無条件刺激（UCS）寿命が条件反応（CR）と無条件反応の発現に与える影響は（UCR）9月14日いくつかの最近の研究に興味のあるトピックとなっている。 SCRとUCS寿命対策が最近知ってと気づかない恐怖の学習と記憶のプロセス15の神経基質を調査するfMRIと組み合わせて使用されている。これらの認知プロセスはコンディショニングのセッションの後、ある程度まで評価することができますが、ポストコンディショニングの評価は、試験から試験的に期待を測定し、干渉の影響を受けやすいと忘れているだけでなく、結果16,17を歪める可能性のある他の要因ができない。 fMRIを同時に自律神経と行動反応を監視することが認知過程と自律神経/行動応答の間の複雑な関係を媒介する神経回路基板を評価することができるメカニズムを提供します。しかし、MRI環境下で自律神経と行動反応を監視することは現実的な問題の数を引き起こします。具体的には、1）標準的な行動や生理モニタリング機器を安全にMRIスキャナ、2の近くに使用することができない鉄系材料で構成されている）この装置は、MRIスキャン室の外に配置されている場合、対象に投影するケーブルはRFノイズをこと運ぶことができます）脳の画像、3のアーティファクトを生成する成果物は、行動反応のモーターの要求によって生成されるfMRI信号は、関心の認知過程に関連した活動と区別する必要があるかもしれません）スキャン、4時の勾配を切り替えることにより、皮膚コンダクタンス信号内で製造することができる。これらの各問題は、生理学的モニタリング装置および追加データの分析手順のセットアップへの変更で解決することができます。ここでは、同時にfMRIの中に自律神経と行動反応を監視するための方法論を提示し、恐怖条件付けの間に認識し、気づいていないメモリのプロセスを調査するためにこれらのメソッドの使用方法を示しています。

恐怖条件付け中に認識し、気づいていないメモリのプロセスをサポートする神経機構を調査する方法が説明されています。このメソッドは、異なるメモリプロセスの神経相関を評価するために条件反射の恐怖条件付け中に血中酸素レベル依存（BOLD）機能的磁気共鳴イメージング、皮膚コンダクタンスの応答、および無条件刺激の寿命を監視します。

fMRIの持つ認識と非認識恐怖記憶の神経機構を調査する

パブロフ型恐怖条件付けは、ヒトにおける神経基盤を調査するために、機能的磁気共鳴画像法（fMRI）と組み合わせて頻繁に用いられています。

本実験の全体的な目的は、皮膚伝導度反応、意識的な無条件刺激期待、および機能的MRIを同時に測定することにより、自覚的および非自覚的な恐怖学習と記憶の神経基盤を調べることです。これは、恐怖学習と記憶の指標として皮膚伝導度反応（SCR）を測定することで達成されます。また、参加者が嫌悪的な無条件刺激を受けることへの期待を反映し、刺激の随伴性に対する参加者の自覚の指標として利用できる無条件刺激期待についてもモニタリングを行います。さらに、学習に関連する脳活動の差異を特定するために、fMRIデータを取得します。刺激間の関係を自覚している場合と自覚していない場合を比較すると、一般的に、自覚した試行では、負の条件付け刺激（CSマイナス）よりも正の条件付け刺激（CSプラス）に対して海馬の反応が大きくなりますが、自覚しなかった試行ではこの傾向は見られません。しかしながら、扁桃体の反応については、自覚した試行と自覚しなかった試行の両方において、CSマイナスよりもCSプラスに対して大きくなります。実験後のアンケートなど、意識を評価する他の手法と比較したこの手法の主な利点は、条件付けセッション中に試行ごとに意識を評価できる点にあります。この方法は、恐怖条件付けにおいて随伴性の意識がどのような役割を果たすかなど、学習、記憶、および感情に関連する重要な疑問に答えるのに役立ちます。生理学的モニタリングシステムは、ほとんどの画像診断施設において標準設備ではありません。したがって、生理学的モニタリングおよび本プロトコルに記載されているその他すべての装置をセットアップするため、参加者の到着の15分から30分前にスケジュールを組んでください。まず、制御室の操作用コンピュータに接続します。標準的なイーサネットクロスケーブルを使用して、生理学的モニタリングソフトウェアをBioPack MP one 50システムに認識させてください。次に、コントロールルーム内のRF干渉フィルターに、遮蔽延長ケーブルを用いてBioPack GSRアンプを接続します。また、MRIスキャン室内の遮蔽延長ケーブルにRF干渉フィルターを接続します。その遮蔽延長ケーブルを、放射透過性電極に取り付けるカーボンファイバーリード線に接続します。リード線をきつく螺旋状にねじることで、スキャン中に生じうる皮膚コンダクタンスデータのアーティファクトを低減できることに注意してください。次に、fMRI実験の実施中に被験者の左手中指および薬指の末節骨に装着する、放射線透過性の電極を準備します。続いて、行動反応および提示用のソフトウェアとハードウェアを先にセットアップする必要があります。ミニUSBケーブルを使用して、プレゼンテーションソフトウェアを動作させている制御室のコンピューターを、ジョイスティックの光ファイバー応答パッドインターフェースユニットに接続します。次に、制御室内の光ファイバーインターフェースユニットに光ファイバーケーブルを接続し、そのケーブルを導波管を通してMRI室内へ通します。スキャナー室において、光ファイバーケーブルをMRI対応のジョイスティックに接続します。次に、プレゼンテーションソフトウェアが動作しているコントロールルームのコンピュータを、コントロールルームコンソールの外部VGAポートおよびオーディオポートに接続します。fMRIコントロールルームコンソールとMRI室内のfMRI周辺インターフェースユニット間の光ファイバーケーブルの接続、および周辺インターフェースユニットとオーディオ・ビジュアルディスプレイユニット間の接続を必ず確認してください。次に、参加者が付属のミラーを通してモニターを見ることができるように、オーディオ・ビジュアルディスプレイユニットをヘッドコイルの後方に設置します。次に、ビニールチューブを使用して、ディスプレイユニットの音響インターフェースボックスをMR対応ステレオヘッドホンに接続します。最後に、音圧レベル計を用いて聴覚刺激の音量を校正します。被験者が到着したら、fMRI実験の詳細とスキャン手順について説明してください。次に、被験者にMRI安全チェックシートへの記入と、研究同意書への署名をしてもらいます。また、研究中に2種類のトーンが数回提示され、その音量が知覚閾値の上下で変動することを被験者に伝えます。これらのトーンがCS（条件刺激）となります。どちらかのトーンが聞こえた直後にジョイスティックボックスのボタンを押させ、その後、無条件刺激（UCS）が提示されるという期待度を指示させます。次に、0から100までのスケールの評価バーの位置をジョイスティックで操作させ、評価値0は無条件刺激が提示されないことを確信していることを示し、評価値50はUCSが提示されるか不確実であること、評価値100はUCSが提示されることを確信していることを示すよう、参加者に伝えます。尺度の他の値は、中間的な期待値を示しています。次に、被験者をスキャナー内に配置します。被験者の左手中指および薬指の末節骨に電極を装着し、ジョイスティックを快適で手の届きやすい位置に配置するように指示してください。MRI装置の特性上、チャンバー室の温度は21°Cを下回ることが多いため、被験者にブランケットを掛け、体温を維持してください。被験者をスキャナー内に配置した後、条件付け手続き中の全脳BOLD-fMRIを収集するように撮像パラメータを設定します。標準的な撮像パラメータを用いれば、4 mm厚のスライスを36枚撮影することで脳全体を十分にカバーできるはずです。次に、700 Hzと1300 Hzの2種類のトーン（持続時間10秒、ITI 20秒）を条件刺激（CS）とし、ホワイトノイズ（100 dB、500 ms）を無条件刺激（US）とする差別的恐怖条件付け手続きを被験者に実施します。CS+（USと同時に提示）を60試行、CS-（USなしで提示）を60試行とし、同じCSが3回以上連続して提示されないように擬似ランダムな順序で提示します。2種類の刺激として使用するトーンは、被験者間でカウンターバランスをとってください。提示ソフトウェアは、CS+とCS-の音量を個別に調整できるようにプログラムする必要があります。これにより、ボタン押し（試行が知覚されたことを意味する）があった場合は、次回の同一刺激の音量を5 dB下げ、ボタン押しがなかった場合は音量を上げるように調整します。5デシベル。実験中に、既述の承認済みソフトウェアおよびMR対応BioPack生理学的モニタリングシステムを用いて2000 Hzで皮膚伝導度をサンプリングした際、知覚されなかった試行に対してボタン押しが行われなかった場合。また、プレゼンテーションソフトウェアを使用して、無条件反応の期待データをサンプリングおよび記録する。すべてのデータ収集が完了したら、機能データのオーバーレイのための解剖学的リファレンスとして、MP rageなどの標準的な高解像度T1強調構造画像を取得します。皮膚伝導度データの解析を開始するには、まず、撮像中に生じたアーチファクトを低減させるため、データに1 Hzの無限インパルス応答（IIR）ローパスデジタルフィルタを適用します。その後、皮膚伝導度データを250 Hzで再サンプリングします。次に、反応開始時から反応ピーク時までの皮膚コンダクタンスレベルの差として、皮膚コンダクタンス反応を算出します。統計解析の前に、反応振幅の分布を正規化するために、このデータを平方根変換することができます。無条件刺激の期待値を決定するには、条件刺激提示の最後の1秒間における1秒間のサンプル反応の平均値を算出します。fMRI解析を開始します。まず、機能的画像解析ソフトウェアパッケージを用いて、スライスタイミング補正、画像レジストレーション、空間平滑化を含む、脳画像データの標準的な前処理を完了させます。次に、CS+およびCS-の知覚あり・なしの試行、ならびに無条件刺激に対する標準的なニューサンス回帰変数および刺激ベースの回帰変数を作成します。ボタン押し反応に関連する運動活動を説明するための妨害回帰変数（nuisance regressor）として、運動反応に基づく参照波形を作成します。まず、ボタン押し反応のタイミングをコード化したスティック関数を作成します。次に、この関数を標準的な血流動態反応関数（canonical hemodynamic response function）で畳み込みます。また、ジョイスティック操作に関連する運動活動を制御するための妨害回帰変数として、運動反応に基づく参照波形を作成します。勾配の変化タイミングをコード化するスティック関数を作成し、ジョイスティック勾配のスティック関数を標準的な血液動態反応関数と畳み込みます。次に、すべての刺激ベースの回帰変数および妨害回帰変数を用いて、一次解析を行います。次に、第2レベルの反復測定分散分析（ANOVA）を行い、活性化にCSタイプの主効果、知覚の主効果、またはCSタイプと知覚の交互作用が認められる領域を特定します。本稿で提示した手法は以下の通りです。通常、知覚されたCSプラス試行中にはUCS期待値が高くなり、知覚されたCSマイナス試行中には期待値が低くなります。このような結果は、参加者が知覚されなかった試行においてもCSとUCSの随伴性を認識していることを示しています。UCS期待値は、通常、CS前の評価から変化しません。対照的に、SCRにおける学習に関連した変化は、通常、知覚された条件付け試行と知覚されなかった条件付け試行の両方で観察されます。具体的には、知覚されたCSプラスに対するSCRは、知覚されたCSマイナスに対するものよりも大きくなります。同様に、知覚されなかったCSプラス試行においても、知覚されなかったCSマイナス試行より大きなSCRが観察されます。この手法を用いた機能的イメージング研究により、知覚された条件付け試行では学習に関連する海馬の活性化が認められたが、知覚されなかった試行では認められないことが示されました。対照的に、扁桃体の活動の差は、知覚された条件付け試行と知覚されなかった条件付け試行の両方で観察されました。この手順に続き、UCS（無条件刺激）への期待が、嫌悪的な無条件刺激に対する脳の反応に及ぼす影響などの問いに答えるため、さらなる解析を行うことができます。このビデオを視聴することで、皮膚コンダクタンス反応、意識的なUCS期待値、および機能的MRI信号反応を同時に測定することにより、意識的な恐怖記憶と無意識的な恐怖記憶を調査する方法について深く理解することができます。

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

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