Name: の寄生蜂の紹介ショウジョウバエと抗寄生虫免疫応答 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 4 s
Description: 学ぶ寄生蜂の培養とショウジョウバエ幼虫のリンパ腺・脂肪体の解剖法。免疫組織の遺伝子発現と細胞変化を蛍光顕微鏡で可視化し、感染と免疫のメカニズムを解明する。

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我々はTrichopria drosophilae、トランスジェニックハエの系統の教授トニーIP、および抗Spätzle抗体の教授カール·橋本教授はトッドSchlenkeに感謝しています。我々は、このプレゼンテーションへの貢献のためにラボの現在と過去のメンバーに感謝します。 NIH（S06 GM08168、RISE 41399から009、及びG12-RR03060）、USDA（NRI / USDA CSREES 2006から03817と2009-35302-05277）およびPSC-CUNYから：この作品は、以下の補助金によって支えられている。

<ol><li>Schlenke, T. A., Morales, J., Govind, S., Clark, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+infection+strategies+in+generalist+and+specialist+wasp+parasitoids+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Contrasting infection strategies in generalist and specialist wasp parasitoids of Drosophila melanogaster.</a> PLoS Pathog. 3, 1486-1501 (2007).</li>
<li>Chiu, H., Morales, J., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+immuno-electron+microscopy+localization+of+p40%2C+a+protein+component+of+immunosuppressive+virus-like+particles+from+Leptopilina+heterotoma%2C+a+virulent+parasitoid+wasp+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gen.+Virol%22%5BJournal%5D)">Identification and immuno-electron microscopy localization of p40, a protein component of immunosuppressive virus-like particles from Leptopilina heterotoma, a virulent parasitoid wasp of Drosophila.</a> J. Gen. Virol. 87, 461-470 (2006).</li>
<li>Gueguen, G., Rajwani, R., Paddibhatla, I., Morales, J., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VLPs+of+Leptopilina+boulardi+share+biogenesis+and+overall+stellate+morphology+with+VLPs+of+the+heterotoma+clade%5BTitle%5D)+AND+%22Virus+Res%22%5BJournal%5D)">VLPs of Leptopilina boulardi share biogenesis and overall stellate morphology with VLPs of the heterotoma clade.</a> Virus Res. 160, 159-165 (2011).</li>
<li>Paddibhatla, I., Lee, M. J., Kalamarz, M. E., Ferrarese, R., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+sumoylation+in+systemic+inflammation+and+immune+homeostasis+in+Drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Role for sumoylation in systemic inflammation and immune homeostasis in Drosophila larvae.</a> PLoS Pathog. 6, e1001234(2010).</li>
<li>Sorrentino, R. P., Carton, Y., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+immune+response+to+parasite+infection+in+the+Drosophila+lymph+gland+is+developmentally+regulated%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cellular immune response to parasite infection in the Drosophila lymph gland is developmentally regulated.</a> Dev. Biol. , 243-265 (2002).</li>
<li>Sorrentino, R. P., Melk, J. P., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+contributions+of+dorsal+group+and+JAK-Stat92E+pathway+genes+to+larval+hemocyte+concentration+and+the+egg+encapsulation+response+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of contributions of dorsal group and JAK-Stat92E pathway genes to larval hemocyte concentration and the egg encapsulation response in Drosophila.</a> Genetics. 166, 1343-1356 (2004).</li>
<li>Jung, S. H., Evans, C. J., Uemura, C., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+lymph+gland+as+a+developmental+model+of+hematopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The Drosophila lymph gland as a developmental model of hematopoiesis.</a> Development. 132, 2521-2533 (2005).</li>
<li>Krzemien, J., Crozatier, M., Vincent, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+the+Drosophila+larval+hematopoietic+organ%2C+hemocyte+homeostasis+and+the+dedicated+cellular+immune+response+to+parasitism%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of the Drosophila larval hematopoietic organ, hemocyte homeostasis and the dedicated cellular immune response to parasitism.</a> Int. J. Dev. Biol. 54, 1117-1125 (2010).</li>
<li>Martinez-Agosto, J. A., Mikkola, H. K., Hartenstein, V., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hematopoietic+stem+cell+and+its+niche%3A+a+comparative+view%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">The hematopoietic stem cell and its niche: a comparative view.</a> Genes Dev. 21, 3044-3060 (2007).</li>
<li>Lemaitre, B., Hoffmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+defense+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Immunol%22%5BJournal%5D)">The host defense of Drosophila melanogaster.</a> Annu. Rev. Immunol. 25, 697-743 (2007).</li>
<li>Schlegel, A., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+%22lower%22+organisms%3A+what+worms%2C+flies%2C+and+zebrafish+can+teach+us+about+human+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Lessons from "lower" organisms: what worms, flies, and zebrafish can teach us about human energy metabolism.</a> PLoS Genet. 3, e199(2007).</li>
<li>Ferrandon, D., Jung, A. C., Criqui, M., Lemaitre, B., Uttenweiler-Joseph, S., Michaut, L., Reichhart, J., Hoffmann, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+drosomycin-GFP+reporter+transgene+reveals+a+local+immune+response+in+Drosophila+that+is+not+dependent+on+the+Toll+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">A drosomycin-GFP reporter transgene reveals a local immune response in Drosophila that is not dependent on the Toll pathway.</a> EMBO J. 17, 1217-1227 (1998).</li>
<li>Bruckner, K., Kockel, L., Duchek, P., Luque, C. M., Rorth, P., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+PDGF%2FVEGF+receptor+controls+blood+cell+survival+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">The PDGF/VEGF receptor controls blood cell survival in Drosophila.</a> Dev. Cell. 7, 73-84 (2004).</li>
<li>Tokusumi, T., Shoue, D. A., Tokusumi, Y., Stoller, J. R., Schulz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+hemocyte-specific+enhancer-reporter+transgenes+for+the+analysis+of+hematopoiesis+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">New hemocyte-specific enhancer-reporter transgenes for the analysis of hematopoiesis in Drosophila.</a> Genesis. 47, 771-774 (2009).</li>
<li>Tokusumi, T., Sorrentino, R. P., Russell, M., Ferrarese, R., Govind, S., Schulz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+lamellocyte+transcriptional+enhancer+located+within+the+misshapen+gene+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Characterization of a lamellocyte transcriptional enhancer located within the misshapen gene of Drosophila melanogaster.</a> PLoS One. 4, e6429(2009).</li>
<li>Morales, J., Chiu, H., Oo, T., Plaza, R., Hoskins, S., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biogenesis%2C+structure%2C+and+immune-suppressive+effects+of+virus-like+particles+of+a+Drosophila+parasitoid%2C+Leptopilina+victoriae%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Biogenesis, structure, and immune-suppressive effects of virus-like particles of a Drosophila parasitoid, Leptopilina victoriae.</a> J. Insect Physiol. 51, 181-195 (2005).</li>
<li>Bettencourt, R., Asha, H., Dearolf, C., Ip, Y. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemolymph-dependent+and+-independent+responses+in+Drosophila+immune+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Hemolymph-dependent and -independent responses in Drosophila immune tissue.</a> J. Cell Biochem. 92, 849-863 (2004).</li>
<li>Melk, J. P., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+analysis+of+Ganaspis+xanthopoda%2C+a+larval+parasitoid+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental analysis of Ganaspis xanthopoda, a larval parasitoid of Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 202, 1885-1896 (1999).</li>
</ol>

利害の衝突が宣言されません。

ショウジョウバエの寄生蜂への関心が全ゲノムを解読するための分子技術は効率的かつ低コストになると急増している。しかし、彼らの非常によく研究されたホストへの相対的な、スズメバチの生物学の多くの魅惑的な側面が不明瞭なままである。これらは、宿主範囲、免疫抑制、過寄生、および動作に関連する問題が含まれています。このプレゼンテーションの焦点は、ハエの免疫組織に感染の効果を実証することであった。ここで示した解剖技術は、RNAレベル（in situハイブリダイゼーション ）で、またはマイクロアレイまたはPCR用核酸の抽出、またはタンパク質のウエスタン分析のために遺伝子発現の解析に使用することができます。フライ株の広大な様々な免疫細胞を操作し、ラベルを付けるために株式センターや個々の研究室から提供されています。フライ株の選択は、実験的な質問によって決定されます。これらの解剖技術はまた、免疫の分析のために使用することができます他のショウジョウバエ種の組織。

<table border="1"><tbody><tr><td> 材料 </td><td> タイプ </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td> 昆虫培養維持のための材料 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>酵母</td><td>アクティブドライ</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> S802453 </td></tr><tr><td>食べ物を飛ぶ</td><td>コー​​ンミール、砂糖</td><td></td><td>標準的なレシピ</td></tr><tr><td>ハニー</td><td>クローバー</td><td>オランダのゴールド</td><td></td></tr><tr><td>バイアル</td><td>ポリプロピレンシェルバイアル（ナロー） </td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> AS514 </td></tr><tr><td>バイアルの閉鎖</td><td>綿栓</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> AS212 </td></tr><tr><td>バイアルの閉鎖</td><td>バズプラグ</td><tD&gt;ジェネシー科学</td><td> AS273 </td></tr><tr><td>冷蔵インキュベーター</td><td>精度815 </td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td> 3721 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> サンプル調製のための材料 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> CO 2タンク</td><td>骨乾燥したグレード</td><td> TWスミス</td><td> UN1013 </td></tr><tr><td>へら</td><td>マイクロスパチュラ（14センチ） </td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 21-401-15 </td></tr><tr><td>パイレックススポット試験板</td><td> 9よく解剖板85 mm x 100 mm幅</td><td>トーマス科学</td><td> 7812G17 </td></tr><tr><td>パスツールピペット</td><td>ソーダ石灰</td><td> J＆Hベルジェ</td><td> 71-5200-05 </td></tr><tr><td>鉗子</td><td>様式第5位</td><td>シグマ</td><td> T-4662 </td></tr><tr><td>エタノール</td><td> 190プルーフのUSP </td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 04-355-221 </td></tr><tr><td>ホルムアルデヒド</td><td> 37パーセント（w / w）の</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> F79-1 </td></tr><tr><td> Cy3標識二次抗体AffiniPureロバ抗ウサギIgG（H + L） </td><td>午前1時50分励起546 nmで、発光565 nmの</td><td>ジャクソンイムノリサーチ·ラボラトリーズ株式会社</td><td> 711-165-152 </td></tr><tr><td>退色（N-没食子酸プロピル） </td><td> 1X PBS、50％グリセロール溶液で4μg/ mlの</td><td> MPのバイオメディカル</td><td> 10274790 </td></tr><tr><td>グリセロール</td><td></td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> G33-1 </td></tr><tr><td>ヘキスト33258 </td><td> 0.2μg/ mlの励起352 nmで、発光461 nmの</td><td>分子プローブ</td><td> H-1398 </td></tr><tr><td>ローダミンファロイジン</td><td> 200単位/ ml（6.6μM）励起波長540nm、発光565nmで</td><td>分子プローブ</td><td> R415 </td></tr><tr><td>のAlexa Fluor®488ファロイジン</td><td> 300単位/ mlの励起495nmの、発光518 nmの</td><td>分子プローブ</td><td> A12379 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 使い捨て </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>洗浄瓶</td><td> Fisherbrand </td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 03から409-22A </td></tr><tr><td>キムワイプ</td><td>キンバリークラーク</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 06-666A </td></tr><tr><td>ペーパータオル</td><td> 1プライC-フォールド</td><td>クイル</td><td> 901-7CFTB2400 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 顕微鏡検査 </td><td> ＆回り、湧き出る！ </td><td></td><td></td></tr><tr><td>ライカ実体顕微鏡</td><td> MZFLIII </td><td>帝国イメージングシステムズ株式会社</td><td> 10446208 </td></tr><tr><td>ツァイス実体顕微鏡</td><td> STEMIの1000または2000-C </td><td>カールツァイス</td><td> 000000-1006-126 </td></tr><tr><td>光源 - LED </td><td>グースネック照明</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 12563501 </td></tr><tr><td>ステージ</td><td>プレートと透過光ボックス</td><td>カールツァイス</td><td> 455137000 </td></tr><tr><td>ツァイスレーザー共焦点顕微鏡をスキャンする</td><td> LSM 510 </td><td>カールツァイス</td><td></td></tr><tr><td>ツァイスの複合顕微鏡</td><td>直立Axioplan 2 </td><td>カールツァイス</td><td></td></tr></tbody></table><table border="1"><tbody><tr><td> スズメバチの系統 </td><td> ひずみを飛ばすの</td></tr><tr><td> Leptopilina victoriae 16 </td><td> YW </td></tr><tr><td> Leptopilina boulardi 17 1 </td><td> UAS-GFP-背 17 </td></tr><tr><td> Leptopilina heterotoma 2 </td><td> SerpentHemoGal4 13 </td></tr><tr><td> Leptopilina heterotoma 14 1 </td><td> MSNF9-moCherry 14 </td></tr><tr><td> Trichopria drosophilae </td><td> MSNF-GFP 15 </td></tr><tr><td> Ganaspis xanthopoda 18 </td><td> YW蛇-GAL4 UAS GFP-Dorsal/Basc 4 </td></tr><tr><td></td><td> YW。Drosomycin-GFP/CyO Y + 12 </td></tr></tbody></table>

の寄生蜂の紹介<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;と抗寄生虫免疫応答

An Introduction to Parasitic Wasps of Drosophila and the Antiparasite Immune Response

既知の寄生蜂種の多くは、Drosophilaの幼虫期または蛹期を攻撃します。Trichopria drosophilaeは宿主の蛹期に感染しますが（図 1A-C）、Leptopilina属（図 1D, 1F, 1G）およびGanaspis属（図 1E）の雌は幼虫期を攻撃します。我々は、生物学的な軍拡競争の分子基盤を研究するために、これらの寄生蜂を利用しています。寄生蜂は生物防除剤として極めて高い価値を持っています。その多くは、宿主の生理機能や免疫を変化させる毒性因子やその他の因子を保有しています。Drosophila寄生蜂の解析により、種特異的な相互作用が自然コミュニティの遺伝的構造をどのように形成しているかについての知見が得られています。これらの研究は、宿主の免疫生理学、および調整された免疫反応がこの類の寄生者にどのように阻止されるかを理解するためのモデルとしても機能しています。
幼虫および蛹の角質層は、第一の防御線として機能します。ハチの産卵管は鋭い針状の構造をしており、宿主の血腔内へと効率的に卵を送り込みます。産卵に続き、角質層において創傷治癒反応が起こります（図 1C、矢印頭）。一部のハチは同一の宿主に2つ以上の卵を挿入することができますが、正常に発達するのは1つの卵のみです。過剰な卵や発達中の幼虫は、まだ解明されていないプロセスによって排除されます。そのため、これらのハチは単独性寄生者と呼ばれます。
ショウジョウバエの系統と寄生蜂の種類によって、蜂の卵には2つのいずれかの運命が待ち受けています。卵が被膜化されてその発育が阻止されるか（ホストが羽化；Fig. 2 左）、あるいは蜂の卵が孵化し、発育、脱皮を経て成虫に成長するか（蜂が羽化；Fig. 2 右）です。L. heterotomaは、Drosophilaに寄生する蜂の中で最もよく研究されている種の一つです。本種は「ジェネラリスト」であり、ほとんどのDrosophila種をホストとして利用できます1。L. heterotomaとL. victoriaeは姉妹種であり、被膜化反応を能動的に妨害するウイルス様粒子を産生します2。L. heterotomaとは異なり、L. boulardiはスペシャリストの寄生者であり、利用するDrosophila種の種類は比較的限られています1。L. boulardiの系統もウイルス様粒子を産生しますが3、D. melanogasterでの生存能力には大きな差があります1。一部のL. boulardi系統は、ハエのホストが卵の被膜化に成功することが多いため、D. melanogasterでの飼育が困難です1。したがって、特定の実験プロトコルにおいては、両方のパートナーに関する知識を持つことが重要です。
バリア組織（クチクラ、腸、気管）に加えて、Drosophilaの幼虫は、それぞれ血球および脂肪体による機能に由来する全身性の細胞性および液性免疫応答を有しています。L. boulardiによる産卵は、これら両方の免疫系を活性化します1,4。血球は、循環系内、分節クチクラ下の定着集団、およびリンパ腺に見られます。リンパ腺は、幼虫の背側に位置する小さな造血器官です。ローブと呼ばれる造血細胞のクラスターは、動物の前後の軸に沿って走る背側血管に沿って、分節的にペアで配置されています（図 3A）。脂肪体は、多機能な大型の器官です（図 3B）。これは、微生物や後生動物の感染に応じて抗菌ペプチドを分泌します。
ハチによる感染は免疫シグナルを活性化します（図4）4。細胞レベルでは、血球の分裂と分化が誘発されます。自己防御として、感染した動物の血腔内では凝集物およびカプセルが形成されます（図5）5,6。活性化された血球はハチの卵（またはハチの幼虫）に向かって移動し、その周囲にカプセルを形成し始めます（図5A-F）。一部の血球は凝集して結節を形成します（図5G-H）。詳細な分析により、ハチの感染によって最前方のリンパ節葉の周辺部が分散することが明らかになりました（図6C, D）。
ここでは、ハチの感染後にリンパ腺および血腔でどのような特異的な変化が起こるかを調べるため、Tollシグナル伝達経路の構成要素であるDorsalとSpätzle（図4, 5, 7）、およびその標的であるDrosomycin（図6）を用いた代表的なデータを提示します。ここで述べる解剖プロトコルにより、宿主の血リンパからハチの卵（またはハチの発達段階にある個体）を回収することも可能です（図8）。

寄生蜂（寄生）ハチを含む多くの昆虫の天敵の主要なクラスを構成する<em&gt;キイロショウジョウバエ</em&gt;。我々は、これらの寄生虫を伝播するためのテクニックを紹介します<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;属。との免疫組織に与える影響を分析する方法を示しています<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;幼虫。

既知の寄生蜂の種のほとんどは、ショウジョウバエの幼虫期または蛹期を攻撃します。Trichopria drosophilaeは、宿主の蛹期に感染します（図...

本手順の目的は、ショウジョウバエのホストを用いて寄生蜂の培養を維持する方法、およびリンパ腺と脂肪体を作製・解剖する方法を示すことです。まず、ショウジョウバエの幼虫を用いて蜂を培養します。その後、個体を解剖して幼虫のリンパ腺を単離します。この工程では、角皮を剥離し、脂肪体やその他の微細構造を除去することで、リンパ腺を単離します。同様に、免疫細胞化学および蛍光顕微鏡を用いた同様の手順により、脂肪体自体を単離することができます。免疫組織における遺伝子発現および細胞特異的な変化を可視化します。ハチによる寄生後、ショウジョウバエの宿主とその寄生蜂を利用した、感染と免疫のユニークなシステムについて研究します。当研究室は、ショウジョウバエの寄生蜂の生きた個体群を維持している数少ない研究室の一つです。そのため、私たちはしばしば技術提供を求められます。寄生蜂は多くの昆虫にとっての天敵です。我々が研究している種は、多くのショウジョウバエ種の幼虫期に攻撃を仕掛けます。研究室では、寄生蜂の攻撃によって昆虫の免疫系がどのような影響を受けるかを理解するために、drosophila melanogaster を使用しています。さらに、宿主の防御を克服するために蜂が用いる戦略を明らかにしたいと考えています。一般的に、脂肪体やリンパ腺の解剖に不慣れな方は苦労することが多いです。なぜなら、oph幼虫は飼育こそ容易ですが、サイズがかなり小さく、これらの幼虫器官を日常的にスムーズに解剖するにはかなりの習熟が必要だからです。NF kappa Bシグナリングの構成的活性化が細胞組織の自己免疫様カプセル化を引き起こすことを発見した後、私たちはoph fla変異体においてこの反応がどのように起こるかに興味を持ちました。そこで、誘発されたカプセル化がその自然な対照となるものであると仮定し、本日に実演するこれらの標準プロトコルを開発しました。それでは、ハチの培養方法と維持方法について説明します。まず、新鮮な酵母ペーストを少量塗布した、新しいショウジョウバエ用餌 vial を準備します。50から60匹の若い野生型ハエを vial に移し、24 °C で48時間産卵させます。2日間の産卵後、ハエを vial から取り除き、バズプラグに蜂蜜を1滴加えます。最後に、バイアルの蓋を閉めます。ハチはショウジョウバエよりもガスに敏感であるため、麻酔をかける前に二酸化炭素の流量を下げてください。ハチに麻酔をかける準備が整ったら、雌6〜8匹と雄6〜8匹を選別し、バイアルに入れます。ショウジョウバエの卵および幼虫と共に。寄生蜂が目覚めるまで、バイアルをそっと横向きに置きます。その後、バイアルを24 degrees Celsiusのインキュベーターに入れます。影響を受けていないgiloホストおよび自力で防御に成功したホストは、通常

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Research

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Immunology and Infection

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免疫応答やスリープ中の定量的測定<em&gt;ショウジョウバエ</em

Drosophila melanogasterは、自然免疫系と感染や病気の生理学的影響を研究するための優れたモデル生物です。このプロトコルでは、堅牢で定量的に再現性のある細菌感染をD.

全身細菌感染や免疫防御表現型<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

このメソッドは、三次元 (3 D) モデルを昆虫細胞に病原体の侵入を視覚化する方法を示します。ショウジョウバエ幼虫から血液細胞は、細菌やウイルスの病原体、体外か体内に感染していた。感染した血球、固定され共焦点顕微鏡とそれに続く細胞三次元イメージングのステンド...

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学ぶ寄生蜂の培養とショウジョウバエ幼虫のリンパ腺・脂肪体の解剖法。免疫組織の遺伝子発現と細胞変化を蛍光顕微鏡で可視化し、感染と免疫のメカニズムを解明する。

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