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DOI: 10.3791/3400-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
リフトバレー熱ウイルスMP - 12ワクチン株の逆遺伝学的システムは、追加のMP - 12の増加減衰および免疫原性と変異体を作成するための便利なツールです。我々はNSS変異株を生成し、特徴付けるためにプロトコルについて説明します。
この手順は、逆遺伝学によって変異したNSSをコードする組換えリフトバレー熱ウイルスMP12株を生成し、ワクチン開発のための表現型を特徴付けることを目的としています。まず、T7 RNAポリメラーゼを安定して発現するBhk T seven nine細胞のトランスフェクションシステムを使用して、回収された組換えMP12株変異体を回収し、次に回収された組換えMP12株変異体をVero E six細胞で増幅し、増幅したMP12変異体をプラークアッセイにより滴定します。手順の最後のステップは、変異型NSタンパク質によるインターフェロン、アルファ、またはベータ抑制の欠如をスクリーニングすることです。
最終的に、結果は、リバースジェネティクスシステムを通じて、リフトバレー熱の候補生弱毒生ワクチンの調製を容易にすることができます。この手法は、化学窒素や連続継代を使用してウイルスゲノムに突然変異をランダムに導入するなど、既存の方法に対する主な利点は、ジェニックシステムを使用してウイルスゲノムに指定変異を導入できることです。この方法は、ワクチン候補の免疫原性における主要な因子NSSの重要性など、バレーフィーバーワクチンの分野における重要な問題に対処するのに役立ちます。
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