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リフトバレー熱ウイルスワクチンの安全性および有効性を改善するためのMP - 12株のNSS遺伝子を操作する...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Using Reverse Genetics to Manipulate the NSs Gene of the Rift Valley Fever Virus MP-12 Strain to Improve Vaccine Safety and Efficacy

リフトバレー熱ウイルスワクチンの安全性および有効性を改善するためのMP - 12株のNSS遺伝子を操作する逆遺伝学を使用して

Full Text
18,138 Views
09:13 min
November 1, 2011

DOI: 10.3791/3400-v

Birte Kalveram1, Olga Lihoradova1, Sabarish V. Indran1, Tetsuro Ikegami1

1Department of Pathology,University of Texas Medical Branch

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

リフトバレー熱ウイルスMP - 12ワクチン株の逆遺伝学的システムは、追加のMP - 12の増加減衰および免疫原性と変異体を作成するための便利なツールです。我々はNSS変異株を生成し、特徴付けるためにプロトコルについて説明します。

この手順は、逆遺伝学によって変異したNSSをコードする組換えリフトバレー熱ウイルスMP12株を生成し、ワクチン開発のための表現型を特徴付けることを目的としています。まず、T7 RNAポリメラーゼを安定して発現するBhk T seven nine細胞のトランスフェクションシステムを使用して、回収された組換えMP12株変異体を回収し、次に回収された組換えMP12株変異体をVero E six細胞で増幅し、増幅したMP12変異体をプラークアッセイにより滴定します。手順の最後のステップは、変異型NSタンパク質によるインターフェロン、アルファ、またはベータ抑制の欠如をスクリーニングすることです。

最終的に、結果は、リバースジェネティクスシステムを通じて、リフトバレー熱の候補生弱毒生ワクチンの調製を容易にすることができます。この手法は、化学窒素や連続継代を使用してウイルスゲノムに突然変異をランダムに導入するなど、既存の方法に対する主な利点は、ジェニックシステムを使用してウイルスゲノムに指定変異を導入できることです。この方法は、ワクチン候補の免疫原性における主要な因子NSSの重要性など、バレーフィーバーワクチンの分野における重要な問題に対処するのに役立ちます。

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免疫学 問題57 リフトバレー熱ウイルス 逆遺伝学 NSS MP - 12 ワクチンの開発

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