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DOI: 10.3791/3760-v
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簡単な方法は、関連付けられている上皮細胞上の組織線維芽細胞に及ぼす影響を分析するために記述されています。このメソッドは、三次元組織培養の組み合わせにより、3Dから分離後の細胞の分析を容易にすることができます。技術は、腫瘍細胞上の腫瘍関連間質の効果の系統的な研究を可能にする、悪性度を変化させるセルに適用されます。
この手順の全体的な目標は、上皮細胞生物学に対する間質線維芽細胞の影響を分析するために、三次元混合細胞組織培養から上皮細胞を誘導することです。これは、最初に三次元混合細胞ステロイド共培養を確立することによって達成されます。次に、共培養後の上皮細胞を単離するために、細胞をマトリックス培養から分離します。
次のステップは、共培養後の上皮細胞を解析の準備が整うまで継代することです。最終的に、三次元培養における線維芽細胞への曝露が上皮細胞の挙動に及ぼす影響は、培養物の顕微鏡イメージングと共培養後の分析を通じて評価できます。上皮細胞は、ここに示すようにマトリックス浸潤やトランズウェル遊走の蛍光イメージングなど、その手順を実演するのは、前日に私の研究室から研究員のクインが、共培養を確立することになる。
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