Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Kun-Yong Kim; Eriona Hysolli; In-Hyun Park

doi:10.3791/3804

GFPをレトロウイルスベクターを用いた誘導多能性幹細胞（性IPSC）にヒト体細胞を再プログラミングする

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Biology

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Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

GFPをレトロウイルスベクターを用いた誘導多能性幹細胞（性IPSC）にヒト体細胞を再プログラミングする

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08:25 min

April 3, 2012

DOI: 10.3791/3804-v

Kun-Yong Kim¹, Eriona Hysolli¹, In-Hyun Park¹

¹Yale Stem Cell Center, Department of Genetics,Yale School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

OCT4、SOX2、KLF4とMYCのレトロウイルス媒介性異所性発現を介してヒトの人工多能性幹細胞（性IPSC）を生成する方法が記載されている。 GFP発現に基づいて人間のIPSCコロニーを識別するための実用的な方法についても説明されています。

この手順の全体的な目標は、GFPレポーターシステムを使用して、レトロウイルスを介したOCT 4、SOX 2K LF 4、およびMの過剰発現を介してヒトIPS細胞を作製することです。これは、まずレトロウイルスを発現する個々のGFPを適切な量で添加することによって達成されます。次に、GFPを発現するウイルス感染細胞を、マウス胚性線維芽細胞を用いて0.1%ゼラチン被覆プレートに移します。

手順の3番目のステップは、培地をヒト胚性幹細胞培養培地に置き換えることです。最後に、ヒト胚性幹細胞と同様の形態を示すGFPサイレンシングIPSコロニーを単離します。最終的に、結果は免疫蛍光染色とR-T-Q-P-C-Rによる内因性多能性マーカーの発現を示しています。

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