<em>In ovo</em> Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

Ben Yang; Lauren B. Geary; Yong-Chao Ma

doi:10.3791/4017

ドーパミン作動性ニューロンの開発における遺伝子機能を研究するためのニワトリ中脳でのOVOエ...

JoVE Journal
Neuroscience

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Neuroscience

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

ドーパミン作動性ニューロンの開発における遺伝子機能を研究するためのニワトリ中脳でのOVOエレクトロポレーションに

Full Text

12,011 Views

08:57 min

August 3, 2012

DOI: 10.3791/4017-v

Ben Yang*¹, Lauren B. Geary*¹, Yong-Chao Ma^1,2

¹Northwestern University Feinberg School of Medicine,Children's Hospital of Chicago Research Center, ²Departments of Pediatrics, Neurology and Physiology,Northwestern University Feinberg School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

機能や中脳ドーパミン作動性ニューロンの開発中の遺伝子の調節を評価するために、我々は、関与の方法について説明します。

この実験は、ニワトリの中脳の卵形エレクトロポレーションで、外因性遺伝子発現が中脳の発達とドーパミン作動性ニューロンの分化に及ぼす影響を研究することを示しています。まず、ハンバーガーハミルトン、ステージ11のニワトリの胚の中脳に、所望のプラスミドであるDNAを注入して、発生中の中脳小胞に外因性DNAを特異的に標的化します。次に、カスタムメイドの小さな電極を使用して、中脳小胞をエレクトロポレーションし、外因性DNAを中脳神経前駆細胞に特異的に送達しました。

次に、Mチェリーの発現が良好なステージ23の胚を中脳で採取し、最適な中脳横断面を生成します。最終的に、チロシンヒドロキシラーゼなどのドーパミン作動性ニューロンマーカーの免疫染色分析により、神経前駆細胞が目的遺伝子の発現によって誘導される成熟ドーパミン作動性ニューロンに分化していることを示すことができます。この技術の主な利点は、このプロトコルがミリンドーパミン作動性ニューロンの分化を研究するための膜特異的エレクトロポレーションを達成できることです。

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos