微妙な子宮内膜症の術中検出：腹膜整合性の喪失に伴う骨盤痛の検出および治療のための新たなパラダイム

本実験の全体的な目的は、骨盤痛を抱える女性を治療する臨床医に対し、潜在的な子宮内膜症の存在と範囲を明確にする簡便な手法を提供することである。まず、目視で確認できる子宮内膜症の調査を行い、明らかな病変を特定する。次に、メチレンブルー染料を塗布することで、通常の腹腔鏡検査では見落とされる可能性のある潜在的な子宮内膜症の領域を可視化する。

次に、青色に染色された領域をすべて切除し、患者から病変を完全に除去します。走査電子顕微鏡による結果から、このアプローチによって、下層の腹膜細胞に影響を及ぼす不可視の子宮内膜症を除去できることが示されています。この不可視の病変が、骨盤を支配する感覚神経へ月経血や排卵血が到達する経路となり、痛みを引き起こしています。この手法は、腹膜表面を乱し、組織下層の神経に血液が接触することを可能にする微小な、あるいは不可視の子宮内膜症の特定を可能にするため、子宮内膜症の診断と治療の両方に寄与し、これらの患者が経験している痛みの原因を説明するものとなります。

通常、排卵時や月経時には、少量の血液が骨盤腔内に流入します。骨盤および腹部の内壁は、完全な中皮の層で覆われており、これにより血液や血液中に含まれる疼痛誘発因子が感覚神経線維に接触するのを防いでいます。子宮内膜症の女性では、炎症性の子宮内膜様細胞によって腹膜細胞の細胞間接合が失われ、その結果、血液が下層の組織や神経線維に到達できるようになります。

中皮細胞のこれらの隙間は走査電子顕微鏡で観察できますが、同時に、青色染料が特定の部位の下層組織を染色できる理由でもあります。I.慢性骨盤痛を抱える女性に対し、まず面談を行い、病歴や、月経周期に関連した痛みの発生時期の詳細を確認します。また、過敏性腸症候群や膀胱に関する不満などの関連症状を記録します。さらに、患者の選定が完了した後、身体診察を実施します。

腹腔鏡手術を受ける女性に対し、子宮内膜症の切除および研究目的での組織利用の可能性について、必ず同意を得てください。5 mmの臍側ポートおよび下腹部の追加の5 mmポートを用い、標準的な手法で腹腔鏡下手術を行います。骨盤内を注意深く観察し、子宮内膜症の所見と、患者が示した術前の疼痛部位との関連性を確認してください。

次に、メチレンブルー染料を滅菌生理食塩水で1:200に希釈し、吸引針を用いて溶液を骨盤表面に注入します。その後、吸引洗浄を行い、余分な染料を除去して腹膜表面をすすぎます。再度、骨盤を注意深く観察し、青色染料が取り込まれた領域を記録します。

可能であれば、腹膜の罹患部位を切除します。切除が完了したら、骨盤内を確認し、出血がないことを確認してください。その後、CO2ガスを排出し、器具を取り出して、組織接着剤で切開部を閉鎖します。

回復室で1時間安静にした後、患者の帰宅を許可します。走査電子顕微鏡（SEM）を用いて不可視の子宮内膜症を記録するため、まず、検体を平坦にし、腹膜側を上にした向きを維持するために、腹膜切片を滅菌テルフパッドに縫い付けます。次に、これらの切片をSEM用のグルタルアルデヒド固定液に入れます。適切に固定された後、膀胱から子宮内膜症の切除術を受け、当該部位に痛みがなくなった別の患者の検体とともに、走査電子顕微鏡用に処理することができます。

染料は腹膜表面を染色しなかったため、青色染料の染色と骨盤痛の存在との相関関係が裏付けられました。この腹膜表面の画像は、月経時に悪化する慢性骨盤痛と膀胱の不快感を訴える女性から得られたものです。腹腔鏡画像は青色染料の塗布前に撮影されており、腹腔鏡の光の反射のみで、この画像で矢印で示された子宮内膜症の疑いがある明らかな病変部位が認められます。同一部位を撮影した画像では、膀胱に塗布した青色染料が腹膜の特定の部位を染色していることが確認できます。

この画像は膀胱上の腹膜の切除を示しており、もう一方の画像はこの領域の細胞を走査型電子顕微鏡で観察したものです。サンプルは標準的な手順に従って調製され、厚さ20 nanometersの金白金合金でスパッタコーティングされました。腹膜が子宮内膜症と考えられる細胞で覆われており、腹膜の中皮細胞の細胞間接合部に隙間が生じ、その下の細胞外マトリックスが露出していることが分かります。

一方、同様の手法で調製した正常な腹膜サンプルの走査電子顕微鏡像では、正常な腹膜の上皮細胞が密に結合していることがわかります。このように、これは腹膜表面の透過性を引き起こしている、わずかで目に見えない子宮内膜症の特定に役立つ、腹腔鏡手術で利用可能な非常にシンプルな手法です。病変全体をすべての内膜様細胞と共に切除することで、患者に痛みの緩和という最善の機会を提供することができます。