Name: 微妙な子宮内膜症の術中検出：腹膜整合性の喪失に伴う骨盤痛の検出および治療のための新たなパラダイム (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-21T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: 学ぶメチレンブルー染色法による腹腔鏡下での微小子宮内膜症の検出と切除技術。慢性骨盤痛の原因となる腹膜整合性の喪失を可視化し、治療効果を向上させる革新的な診断・治療アプローチを解説する。

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我々は、アンジェラHouwingの優れた技術的な助けを承諾し、グレタブッシュネルからのデータ収集を支援したいと思います。

1。患者の選択<ol><li>慢性骨盤痛を持つ女性は、歴史と身体検査を受ける。 </li><li>痛み、月経周期につきましては、タイミング、過敏性腸苦情や膀胱からの苦情を含む関連した症状の局在が認められ、記録される。 </li><li>腹腔鏡検査を受けている女性は、子宮内膜症や研究のための彼らの組織の使用の可能性の切除を承諾しています。 </li></ol> 2。腹腔鏡技術<ol><li>腹腔鏡検査は、5mmの臍ポートおよび下腹部ではさらに5 mmのポートを介して標準的な技術を使用して実行されます。 </li><li>患者によって示されるように、骨盤の慎重な検査は、痛みの術前局在と子宮内膜症のいずれかの所見を相関させるために行われます。 </li><li>メチレンブルー色素は、滅菌生理食塩水で1:200に混合し、吸引針を使用して骨盤の表面に注入される。 </li><li>吸引灌漑は過剰量を除去するために行われる腹膜の表面を染めるとすすいでください。 </li><li>骨盤が検査され、青色の色素の取り込みの領域が記録されている。 </li><li>可能な場合は、腹膜の患部の切除が行われます。 </li></ol> 3。走査電子顕微鏡法<ol><li>腹膜のセクションは、試料を平らにし、オリエンテーション（最大腹腔側）を維持するために無菌telfaボードに縫合し、SEM用（シグマ、セントルイス、ミズーリ州）グルタルアルデヒド固定液に入れられます。 </li><li> 1パーセントに配向し、後固定した試料は、1時間とシーケンシャルエタノール濃度で脱水のために四酸化オスミウムをバッファ。 </li><li>サンプルは液体二酸化炭素を用いて乾燥し、アルミに取り付けコロイド銀ペーストで電子顕微鏡のスタブをスキャンして、金でコーティングされたスパッタされた：20nmの厚さに白金合金。 </li><li>走査電子顕微鏡は、12ランダム領域から得られた、JEOLモデルJSM-6400走査顕微鏡と顕微鏡写真を用いて実施した。 </lI&gt; </ol>

特別な利害関係は宣言されません。

女性では慢性骨盤痛は、費用がかかり、あまり理解問題1です。月経困難症は、女性2の60％、青年3の72％に影響を与える骨盤の痛みの最も一般的な形式です。子宮内膜症は、通常の女性の5％に影響を与えますが、骨盤痛のある女性の70％に存在する炎症性疾患である。子宮内膜症は、慢性骨盤痛（CPP）は、病変の原因の痛みは4不透明されるメカニズムに寄与している。逆説的に、痛みの重症度は、子宮内膜5,6の重症度と相関していません。関連する過敏性腸症候群（IBS）とICを含む慢性疼痛の症状は7,8年のために診断されないままになる可能性があります。子宮内膜症は、片頭痛、慢性疲労症候群、IBSとIC 10,1含む他の慢性疾患に関連付けられているので、本当の会計が評価するのは難しいですが、子宮内膜症の推定コストは、米国だけで9オーバー220億ドルです1。子宮内膜症の診断の確立は、腹腔鏡検査を必要としますが、この病気は、多くの場合、12年代後半に診断されます。子宮内膜症...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名称 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント（オプション） </td></tr><tr><td>メチレンブルー</td><td>アメリカン試薬</td><td> NDC0517-0310-110 </td><td>生理食塩水で混合1:200 </td></tr></tbody></table>

微妙な子宮内膜症の術中検出：腹膜整合性の喪失に伴う骨盤痛の検出および治療のための新たなパラダイム

Intraoperative Detection of Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection and Treatment of Pelvic Pain Associated with the Loss of Peritoneal Integrity

子宮内膜症は、慢性骨盤痛（CPP）および/または不妊は生殖年齢の女性の40〜70％に影響を与える一般的な病気です。本研究の目的は、骨盤痛や子宮内膜症が疑われる患者で腹膜完全性の損失を検出するために腹腔鏡検査（L / S）の間に腹膜の表面を染色するために青色色素（メチレンブルー）の使用を実証することであった。痛みを感じることなく、CPPと5人の女性患者40人の女性がこのパイロット研究で評価した。 L / Sの中に、濃縮された色素を吸引し、乳酸加リンゲル液ですすぎ、腹膜の表面に噴霧した。ローカライズされた色素の取り込みの領域が見える子宮内膜症の病変の有無を評価した。激しい腹膜染色の領域が切除され、いくつかは固定2.5パーセントでバッファリングされたグルタルアルデヒドとスキャン（SEM）を電子顕微鏡で調べた。青色色素の取り込みはコントロールよりも子宮内膜症や慢性骨盤痛（40％対85％）と女性の方が一般的だった。青STAIの切除NEDエリアはSEMと通常の非染色腹膜に比べて腹膜細胞間接触の喪失によって子宮内膜症を明らかにした。影響を受けた腹膜子宮内膜症は、目に見えるほとんどのインプラントではなく、すべての患者に関連していた。主観的な痛みの緩和は、被験者の80％で報告された。走査型電子顕微鏡法に基づいて、我々は子宮内膜細胞が子宮内膜症の可視インプラントをはるかに超えて拡張し、基礎となる皮を混乱させるように見えると結論付けている。子宮内膜症の微妙な病変は、したがって、月経や排卵血液基礎となる知覚神経に関連する痛みの要因なアクセスを可能とし、腹膜整合性の破壊によって骨盤の痛みを引き起こす可能性があります。影響を受けた腹膜の完全切除は、子宮内膜症およびCPPのためのよりよい長期的な治療を提供することがあります。この単純な手法は、L / SでのCPPと最小限の視覚的知見と女性で微妙または近くに見えない子宮内膜症の検出を改善するために表示され、子宮内膜症の診断精度を高めるのに役立つことができる腹腔鏡で。

ほとんど見えなかった微妙な子宮内膜症の一例を図1Aに示す。前青色色素の適用点描腹膜の不規則な領域は腹腔鏡の光の反射によって助け高く評価された。 図1Bにおいて、染色した後に、この同じ領域の外観は、膀胱（ 図1B）も同じ不規則なパターンを示しています。腹膜のこの部分を切除した後は（ 図1C）、それは、基本的な中皮の細胞間接触で覆う子宮内膜細胞と分裂を示したSEMに供した。非青染色領域から通常の腹膜は、無傷の細胞間接触と本なし子宮内膜細胞（ 図1D）を示しています。 CPPと間質性膀胱炎（IC）の診断を受けたもう一人の女性では、明らかな子宮内膜症は、青色色素（ 図1E）を適用する前には見られなかった。色素のアプリケーションを使用すると、膀胱が認められ明らかブルー染色（ 図1F）。 CPPとICの症状は子宮内膜症は、視覚的に見られなかったとい...

腹膜の整合性の損失は、子宮内膜症の軽度のフォームを持つ女性の慢性骨盤痛を理解し、治療するための新たなパラダイムを提供し、容易に腹腔鏡検査の時に染料の術中点滴を用いて検出することができる。

子宮内膜症は、慢性骨盤痛（CPP）および／または不妊症を伴う、生殖年齢の女性の40～70%に影響を及ぼす一般的な疾患です。本……の目的は、

本実験の全体的な目的は、骨盤痛を抱える女性を治療する臨床医に対し、潜在的な子宮内膜症の存在と範囲を明確にする簡便な手法を提供することである。まず、目視で確認できる子宮内膜症の調査を行い、明らかな病変を特定する。次に、メチレンブルー染料を塗布することで、通常の腹腔鏡検査では見落とされる可能性のある潜在的な子宮内膜症の領域を可視化する。次に、青色に染色された領域をすべて切除し、患者から病変を完全に除去します。走査電子顕微鏡による結果から、このアプローチによって、下層の腹膜細胞に影響を及ぼす不可視の子宮内膜症を除去できることが示されています。この不可視の病変が、骨盤を支配する感覚神経へ月経血や排卵血が到達する経路となり、痛みを引き起こしています。この手法は、腹膜表面を乱し、組織下層の神経に血液が接触することを可能にする微小な、あるいは不可視の子宮内膜症の特定を可能にするため、子宮内膜症の診断と治療の両方に寄与し、これらの患者が経験している痛みの原因を説明するものとなります。通常、排卵時や月経時には、少量の血液が骨盤腔内に流入します。骨盤および腹部の内壁は、完全な中皮の層で覆われており、これにより血液や血液中に含まれる疼痛誘発因子が感覚神経線維に接触するのを防いでいます。子宮内膜症の女性では、炎症性の子宮内膜様細胞によって腹膜細胞の細胞間接合が失われ、その結果、血液が下層の組織や神経線維に到達できるようになります。中皮細胞のこれらの隙間は走査電子顕微鏡で観察できますが、同時に、青色染料が特定の部位の下層組織を染色できる理由でもあります。I.慢性骨盤痛を抱える女性に対し、まず面談を行い、病歴や、月経周期に関連した痛みの発生時期の詳細を確認します。また、過敏性腸症候群や膀胱に関する不満などの関連症状を記録します。さらに、患者の選定が完了した後、身体診察を実施します。腹腔鏡手術を受ける女性に対し、子宮内膜症の切除および研究目的での組織利用の可能性について、必ず同意を得てください。5 mmの臍側ポートおよび下腹部の追加の5 mmポートを用い、標準的な手法で腹腔鏡下手術を行います。骨盤内を注意深く観察し、子宮内膜症の所見と、患者が示した術前の疼痛部位との関連性を確認してください。次に、メチレンブルー染料を滅菌生理食塩水で1:200に希釈し、吸引針を用いて溶液を骨盤表面に注入します。その後、吸引洗浄を行い、余分な染料を除去して腹膜表面をすすぎます。再度、骨盤を注意深く観察し、青色染料が取り込まれた領域を記録します。可能であれば、腹膜の罹患部位を切除します。切除が完了したら、骨盤内を確認し、出血がないことを確認してください。その後、CO2ガスを排出し、器具を取り出して、組織接着剤で切開部を閉鎖します。回復室で1時間安静にした後、患者の帰宅を許可します。走査電子顕微鏡（SEM）を用いて不可視の子宮内膜症を記録するため、まず、検体を平坦にし、腹膜側を上にした向きを維持するために、腹膜切片を滅菌テルフパッドに縫い付けます。次に、これらの切片をSEM用のグルタルアルデヒド固定液に入れます。適切に固定された後、膀胱から子宮内膜症の切除術を受け、当該部位に痛みがなくなった別の患者の検体とともに、走査電子顕微鏡用に処理することができます。染料は腹膜表面を染色しなかったため、青色染料の染色と骨盤痛の存在との相関関係が裏付けられました。この腹膜表面の画像は、月経時に悪化する慢性骨盤痛と膀胱の不快感を訴える女性から得られたものです。腹腔鏡画像は青色染料の塗布前に撮影されており、腹腔鏡の光の反射のみで、この画像で矢印で示された子宮内膜症の疑いがある明らかな病変部位が認められます。同一部位を撮影した画像では、膀胱に塗布した青色染料が腹膜の特定の部位を染色していることが確認できます。この画像は膀胱上の腹膜の切除を示しており、もう一方の画像はこの領域の細胞を走査型電子顕微鏡で観察したものです。サンプルは標準的な手順に従って調製され、厚さ20 nanometersの金白金合金でスパッタコーティングされました。腹膜が子宮内膜症と考えられる細胞で覆われており、腹膜の中皮細胞の細胞間接合部に隙間が生じ、その下の細胞外マトリックスが露出していることが分かります。一方、同様の手法で調製した正常な腹膜サンプルの走査電子顕微鏡像では、正常な腹膜の上皮細胞が密に結合していることがわかります。このように、これは腹膜表面の透過性を引き起こしている、わずかで目に見えない子宮内膜症の特定に役立つ、腹腔鏡手術で利用可能な非常にシンプルな手法です。病変全体をすべての内膜様細胞と共に切除することで、患者に痛みの緩和という最善の機会を提供することができます。

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定量的な可視化と動的な熱画像を用いた皮膚癌の発見

学ぶメチレンブルー染色法による腹腔鏡下での微小子宮内膜症の検出と切除技術。慢性骨盤痛の原因となる腹膜整合性の喪失を可視化し、治療効果を向上させる革新的な診断・治療アプローチを解説する。

微妙な子宮内膜症の術中検出：腹膜整合性の喪失に伴う骨盤痛の検出および治療のための新たなパラダイム

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