Peptide:MHC Tetramer-based Enrichment of Epitope-specific T cells

Francois P. Legoux; James J. Moon

doi:10.3791/4420

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Peptide:MHC Tetramer-based Enrichment of Epitope-specific T cells

ペプチドエピトープ特異的T細胞のMHCテトラマーベースの濃縮

Full Text

18,706 Views

13:58 min

October 22, 2012

DOI: 10.3791/4420-v

Francois P. Legoux¹, James J. Moon¹

¹Center for Immunology and Inflammatory Diseases, and Pulmonary and Critical Care Unit,Massachusetts General Hospital and Harvard Medical School

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

エピトープ特異的T細胞の低周波の集団を区別し、フローサイトメトリーによって、それらを分析するためのMHCテトラマーと磁性マイクロビーズ：このプロトコルは、ペプチドの使用について説明します。この方法は、から対象の内因性T細胞集団の直接調査を可能に

次の実験の全体的な目標は、マウスの内因性T細胞レパートリーから希少なエピトープ特異的T細胞を同定することです。これは、まず採取したリンパ系細胞をペプチドMHCテトラマー試薬で染色することで達成され、これにより関連するエピトープ特異的T細胞が蛍光標識されます。次に、これらの四量体標識細胞を、四量体の蛍光タグに特異的な抗体に結合した磁気マイクロビーズで染色します。

次に、磁気標識された細胞を磁化されたカラムに通し、四量体に結合したエピトープ特異的T細胞のサンプルを濃縮します。最後に、細胞を目的の実験用細胞マーカーで染色し、マルチパラメーターフローサイトメトリーを実施して、希少な四量体が豊富なエピトープ特異的T細胞集団を検出および定量します。TCRトランスジェニックT細胞養子導入システムなどの他の既存の方法よりもこの技術を使用する主な利点は、免疫系内で自然に発生するエピトープ特異的T細胞の実際のポリクローナル集団で研究が行われることです。

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos