Generation and Recovery of &beta;-cell Spheroids From Step-growth PEG-peptide Hydrogels

Asad Raza; Chien-Chi Lin

doi:10.3791/50081

JoVE Journal
Bioengineering

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Generation and Recovery of β-cell Spheroids From Step-growth PEG-peptide Hydrogels

ステップ成長PEG-ペプチドハイドロゲルからβ細胞のスフェロイドの発生と復旧

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09:21 min

December 6, 2012

DOI: 10.3791/50081-v

Asad Raza¹, Chien-Chi Lin¹

¹Department of Biomedical Engineering, Purdue School of Engineering and Technology,Indiana University - Purdue University at Indianapolis

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

次のプロトコルは、チオール - エン写真クリック反応により形成された段階成長PEG-ペプチドハイドロゲルで、膵β細胞をカプセル化するための技術を提供する。この材料プラットフォームは、細胞のカプセル化のためのcytocompatible微小環境を提供していますが、また、ヒドロゲル内に形成されたセル構造のユーザ制御の迅速な復旧を可能にするだけでなく。

この手順の全体的な目標は、光重合ヒドロゲルに細胞をカプセル化する技術と、その後の酵素感受性ヒドロゲルからの自然に形成されたベータ細胞のpH回復を生物学的特性評価から実証することです。これは、まず、mins 6個のβ細胞を前腕ペグ、ノルベルチンメイサー、および酵素感受性ペプチド架橋剤と混合することによって達成されます。次に、細胞をフリーラジカルを介してカプセル化し、次に光重合してヒドロゲルを形成します。

2番目のステップは、カプセル化された細胞を二酸化炭素インキュベーター内のハイドロゲルで摂氏37度で培養することです。細胞が増殖して凝集体を形成した後、細胞を含んだハイドロゲルを緩衝液ですすぎ、次いでチアトリプシン溶液中でインキュベートします。ゲルの侵食のために穏やかに振とうした後、回収された凝集体を慎重に洗浄して、酵素溶液と侵食されたポリマーを除去します。

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