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DOI: 10.3791/50151-v
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ここでは、アポトーシス細胞のクリアランスのダイナミクスを研究するための効果的な方法を説明
この手順の全体的な目標は、ショウジョウバエの胚におけるアポトーシス細胞クリアランスのダイナミクスを追跡することです。これは、食作用細胞集団をSimio GFPマーカーで胚に標識する細胞質GFPマーカーを含むトランスジェニックフライで達成され、収集、洗浄、およびコーティングされます。次に、胚を注射用に配置し、続いてCNSをモニタリングします。
第3のステップは、X/5などの特定のアポトーシス食作用マーカーを胚に注入することにより、アポトーシス細胞を標識することであり、最後のステップは、共焦点顕微鏡を用いて胚性中枢神経系のタイムラプス記録を行うことである。最終的に、結果は、蛍光共焦点顕微鏡法を通じて、アポトーシス細胞クリアランスのさまざまな段階におけるアポトーシス細胞と食細胞の局在と挙動を示すことができます。固定胚上の免疫組織化学のような既存の方法に対するこの技術の主な利点は、アポトーシス細胞クリアランスのダイナミクスを追跡できることです。
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