Name: マウス胚性外胚葉顔と間葉の分離 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-04-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: 学ぶマウス胚性顔面外胚葉と間葉の分離法。Dispase II処理によりCD-1 E10.5胚から組織を分離し、顔面隆起を摘出して外胚葉と間葉を精密に分離する技術です。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

著者らは、胚の図1におけるヘッドやヘルプや議論のための研究室の他のメンバーを説明するためのアイリーン·チョイに感謝したいと思います。この作品は、NIHの助成金DE012728（TW）でサポートされています

1。ディスパーゼIIを調製<ol><li>新鮮なHepes緩衝生理食塩水（HBS）（50mMのHEPES / KOH pH7.4の150mMのNaCl）を準備します。 16.8ミリリットル純H 2 Oに2ミリリットル、0.5M HEPES / KOH pH7.4及び1.2ミリリットル2.5 M NaClを追加</li><li> 10 mg / mlのディスパーゼIIを作る。 0.2グラムディスパーゼII（Roche社、カタログ番号4942078001）を計量し、20ミリリットルHBSに溶解する。長期保存のために-20℃で、個々のエッペンドルフチュー​​ブとストアに1.0mlのアリコートを準備します。 </li><li>使用前にPBS中の10 mg / mlのディスパーゼII 1:10に希釈します。氷の上に希釈ディスパーゼIIを入れてください。 </li></ol> 2。妊娠中の女性からのCD-1 E10.5胚を解剖全ての動物実験は、コロラド州デンバー大学（UCD）の動物のケアと使用委員会によって承認されたプロトコールに従って行った。 CD-1（ICR）マウスをハーランラボラトリーズ（インディアナポリス、インディアナ州）から入手した。 <ol><li> 70％エタノールを用いて解剖エリアやツールを清掃してください。 </li><li> approvを使用して妊娠CD-1雌を安楽死させるedのプロトコル。 </li><li>腹部を開いた後、70％エタノールで腹部をスプレーしてください。子宮から子宮間膜を引き離すために、子宮と別のを引っ張るために鉗子の1セットを使用します。体内から子宮を取り出します。腹部の反対側の子宮角にこの手順を繰り返します。 </li><li>簡単に言えば血液を洗い流す10cmのペトリ皿に氷冷PBSで子宮をすすいでください。 </li><li>氷冷PBSで新しいシャーレに子宮を転送します。注入部位の間に切断することにより1-胚断片に分離します。 </li><li>実体顕微鏡下で氷冷PBS中に1つの胚を転送します。卵黄嚢と胚を露出するように切断部位の1つで始まって子宮の筋肉壁をはがすように細かい鉗子を使用しています。卵黄嚢と羊膜を剥がします。氷上のPBSで6 cmのシャーレに解剖した胚を転送します。すべての胚がこのように収集されるまで進んでください。 </li></ol> 3。ディスパーゼIIの治療<ol><li> 6 cmのシャーレにPBSですべての胚を洗浄します。置き換えるPBS中で10ミリリットル希釈ディスパーゼIIを含むPBS。 25分間37℃でペトリ皿とインキュベートをカバー-細菌インキュベーターまたは暖かい部屋で十分です-私たちは、このステップのために、CO 2組織培養インキュベーターを使用していない。 </li><li>ペトリ皿を取り出し、実体顕微鏡下で胚を観察します。外胚葉が緩んでいるはずですが、この組織層と下層の間充織との間に明確なギャップに代表される。されていない場合は、37℃でさらに5分間℃のインキュベート次いで氷上でペトリ皿を置く。 </li></ol> 4。無傷の顔の際立ちを解剖する<ol><li>使い捨てガラスピペット（VWR、カタログ番号14672から380）を使用して、 実体顕微鏡下で1ディスパーゼIIが6 cmのペトリ皿に氷冷PBS中に胚を扱わ転送します。 </li><li>胚を保持するために鉗子のペアを1つ使用します。ヘッド（ 図1に取り付けられて顔面プロミネンスの境界線をカットするために慎重細かい鉗子の別のペアを使用しての境界を示していますフェイシャルプロミネンス）。 MXPその後、MNPの一方の側から起動して、FNPを持続。そのまま外に顔のプロミネンス（ 図2A）を解剖し、反対側にも同じことを行います。 </li></ol> 5。間葉とは別の顔の外胚葉<ol><li> 3倍の作動距離を持つ実体顕微鏡下で顔面プロミネンスを観察します。優しく上下に5回フェイシャルプロミネンスをピペットに長いガラスパスツールピペットを使用しています。この後、外胚葉は剥がれやすいです。 </li><li>顔のプロミネンスを保持するために鉗子のペアを1つ使用します。非常にゆっくりと外胚葉剥がし鉗子の他のペアを使用します。 図2Bは、顔の外胚葉の分離シートを示しています。 </li><li>氷上のPBSで1.5mlのエッペンドルフチュー​​ブに顔面外胚葉を転送するために新しい長さのガラスパスツールピペットを使用しています。氷上のPBSで別の1.5mlエッペンドルフチュー​​ブに間充織を転送します。 </li><li>各解剖のために新しい氷冷PBSを使用しています。サンプルを収集します。 </li><li>トンを洗うPBSで彼がサンプル。 4℃、3分間、500×gで遠心分離します。 </li><li>長いガラスパスツールピペットを用いてPBSを吸引除去。サンプルはChIPアッセイに使用する場合は、6.1に進みます。 RNA抽出のために、6.2に進みます。タンパク質の抽出には、6.3に進みます。 </li></ol> 6。さらなる実験のためのプロセスのサンプル<ol><li> ChIPアッセイ用サンプル<ol><li>架橋〜1％ホルムアルデヒドで1mlのPBSを追加します。サンプルをホモジナイズする。 </li><li>回転に室温で10分間インキュベートする。 </li><li>未反応のホルムアルデヒドをクエンチするために各チューブに1.25 Mグリシンの110μlを添加する。 </li><li>混ぜ、室温で5分間静置します。 </li><li> 3分間、4℃で500×gで遠心する。上清を除去します。 </li><li>組織を洗浄するために1ミリリットルの冷PBSを追加します。 </li><li> 3分間、4℃で500×gで遠心する。 </li><li> PBSを除去し、PBSで一度洗浄を繰り返す。 </li><li>上清を除去し、液体窒素で組織を凍結スナップ。 SAを保存-80℃で、その後のプーリングおよび処理するためのmples。 </li></ol></li><li> RNA抽出用サンプル<ol><li> RNAlaterで（Ambion）を含むチューブの顔面外胚葉と間充織を置きます。 </li><li>一晩4 RNAlaterでソリューションでサンプルをインキュベート℃で組織の徹底的な浸透を可能にする。 </li><li>後続のプーリングおよび処理するため-20℃で保存。 </li></ol></li><li>タンパク質抽出用のサンプル</li></ol>その後の処理のために試料に溶解バッファーを追加します。または液体窒素で組織を凍結スナップ。 -80℃で、その後のプーリングして処理するためのサンプルを保管してください。 注釈<ol><li>時間の制約。第6節の初めに至るまで解剖の開始4から6時間を計画します。 </li><li>ときに堪能、それはセクション4および5（プロミネンス解離および外胚葉分離）を実行するために胚当たり約10〜15分かかります。 </li><li>サンプルは、RNA単離、毎solutioのためにしている場合nは、第ジエチルで治療すべきである。また鉗子＆アウェイRNaseの作業領域をきれいにしてください。 </li><li>ディスパーゼIIの治療および解剖を除いてすべての回でサンプルを氷上で保管してください。解剖に使用PBSは寒いであることを確認するために各郭の新しい氷冷PBSに変更します。 </li><li>シャープ鉗子は、正確な切開を得ることが重要です。任意の汚染を防ぐために完全に鉗子を清掃してください。 </li><li>異なるプロミネンスからサンプルを収集するために、ディスパーゼIIの治療後に、個別に各プロミネンスを解剖。その後、外胚葉と間充織を分離します。 </li><li>ディスパーゼIIで処理した後、顔の外胚葉が剥がれやすいです。他の外胚葉からの汚染に特別な注意を払う。すべての汚染された可能性のある組織を捨ててください。 </li><li>一度サンプルがセクション6で適切なポイントに到達するまで停止しないと、起動します。早くすることができますようにすべての胚の顔面外胚葉と間葉の分離を完了します。 </li><li>電子ディスパーゼIIのnzyme活動は、バッチとブランドの間で異なる可能性があります。それは、さまざまなブランドとディスパーゼIIのバッチの処理時間を調整することが必要である。 </li></ol>

<ol><li>Wilkie, A. O., Morriss-Kay, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+craniofacial+development+and+malformation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetics of craniofacial development and malformation.</a> Nat. Rev. Genet. 2, 458-468 (2001).</li>
<li>Gritli-Linde, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+2+-+The+Etiopathogenesis+of+cleft+lip+and+cleft+palate%3A+usefulness+and+caveats+of+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Topics+in+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Chapter 2 - The Etiopathogenesis of cleft lip and cleft palate: usefulness and caveats of mouse models.</a> Current Topics in Developmental Biology. 84, 37-138 (2008).</li>
<li>Schutte, B. C., Murray, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+many+faces+and+factors+of+orofacial+clefts%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Molecular+Genetics%22%5BJournal%5D)">The many faces and factors of orofacial clefts.</a> Human Molecular Genetics. 8, 1-7 (1999).</li>
<li>Chai, Y., Maxson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+craniofacial+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Recent advances in craniofacial morphogenesis.</a> Dev. Dyn. 235, 2353-2375 (2006).</li>
<li>Jiang, R., Bush, J. O., Lidral, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+upper+lip%3A+Morphogenetic+and+molecular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Development of the upper lip: Morphogenetic and molecular mechanisms.</a> Dev. Dyn. 235, 1152-1166 (2006).</li>
<li>Reid, B. S., Yang, H., Melvin, V. S., Taketo, M. M., Williams, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ectodermal+WNT%2F%CE%B2-catenin+signaling+shapes+the+mouse+face%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Ectodermal WNT/β-catenin signaling shapes the mouse face.</a> Developmental Biology. 349, 261-269 (2011).</li>
<li>Feng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+and+temporal+analysis+of+gene+expression+during+growth+and+fusion+of+the+mouse+facial+prominences%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Spatial and temporal analysis of gene expression during growth and fusion of the mouse facial prominences.</a> PLoS ONE. 4, e8066(2009).</li>
<li>Chia, R., Achilli, F., Festing, M. F., Fisher, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origins+and+uses+of+mouse+outbred+stocks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Genet%22%5BJournal%5D)">The origins and uses of mouse outbred stocks.</a> Nat. Genet. 37 (11), 1181-1186 (2005).</li>
<li>Nagai, T., Aruga, J., Takada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+expression+of+the+mouse+Zic1%2C+Zic2%2C+and+Zic3+gene+suggests+an+essential+role+for+Zic+genes+in+body+pattern+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">The expression of the mouse Zic1, Zic2, and Zic3 gene suggests an essential role for Zic genes in body pattern formation.</a> Developmental Biology. 182, 299-313 (1997).</li>
<li>Britsch, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+transcription+factor+Sox10+is+a+key+regulator+of+peripheral+glial+development%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">The transcription factor Sox10 is a key regulator of peripheral glial development.</a> Genes Dev. 15 (1), 66-78 (2001).</li>
</ol>

著者らは、競合する利益またはこの記事の内容に関連した他の競合はありません。

このプロトコルは、初期ディスパーゼIIの処理工程に基づいてマウス胎児顔面外胚葉と間充織を分離するための簡単​​な方法を提供します。以前の研究で、我々はディスパーゼIIの治療の前に顔のプロミネンスの解剖を行ったが、我々は一貫して間充織は &quot;スティッキー&quot;と操作することがより困難になることを発見した。私たちの新しいプロトコルは、この問題を回避できます。ピペッティングにより穏やかな物理的な力との組み合わせディスパーゼIIの治療は外胚葉の分離を行い、簡単に間葉。また、このプロトコルはまた、短いディスパーゼIIの治療と肢芽の外胚葉と間葉のように、他の胚外胚葉と間充織のサンプルの分離に適しています。同様に、開発の他の段階で使用することができます - 例えば、長いディスパーゼIIの処理工程でE11.5顔面外胚葉と間充織を分離する。 E10.5マウス顔面prominから得られたサンプルサイズリファレンスは非常に小さいため、我々は最終的に処理し、分析用のバッチを格納する傾向がある。この点では、組織の10mgを得るために100から150の胚からプール外胚葉サンプルに必要である。間...

<table><tbody><tr><td>ディスパーゼII(中性プロテアーゼ、グレードII)</td><td>ロシュ</td><td>4942078001</td><td>HBSで10 mg / mlのディスパーゼIIストック溶液を作ります。アリコートと-20°Cで保管します。C .</td></tr><tr><td>RNAlater</td><td>アンビオン</td><td>AM7021</td><td></td></tr></tbody></table>

マウス胚性外胚葉顔と間葉の分離

Separation of Mouse Embryonic Facial Ectoderm and Mesenchyme

口腔顔面裂は、世界中の千新生児1,2で1.5に影響を与える最も頻繁に顔面の欠陥である。口腔顔面分裂文形成が異常な顔の開発3によって引き起こされます。ヒトとマウスでは、顔の初期成長とパターン形成は、組織のいくつかの小さな芽、4,5顔面プロミネンスに依存しています。ペアの前頭鼻プロセス（FNP）、上顎プロミネンス（MXP）及び下顎プロミネンス（MDP）：顔が6メインプロミネンスから派生しています。これらのプロミネンスは、上面を覆う上皮に収められて間葉の腫れで構成されています。複数の種における研究では、顔の外胚葉と間充織間のシグナリングのクロストークが面6を形成するための重要であることが示されている。しかし、これらのシグナル伝達に関与する遺伝子のリレーに関する機序の詳細は不足している。一遺伝子発現の包括的な理解を得るための方法、結合転写因子、およびdeveloに関連付けられたクロマチンマーク顔面外胚葉と間充織にpingを実行すると、分離された組織区分を隔離し、特徴付けることである。 ここでは、胎生（E）は10.5、プロミネンスの融合の前にマウスの顔の形成に重要な発達段階で顔の外胚葉と間充織を分離するための方法を提示します。本手法は、我々が以前に顔のプロミネンス7を解剖に使用してきたアプローチから適応されている。この株は遺伝学、ゲノミクスおよび顔面形態8のための標準となっているように、この以前の研究では、近交系のC57BL / 6マウスを採用していた。ここでは、しかし、可能な組織のより数量限定のため、弊社では一切の近交系より腹あたり近交系のCD-1購入したほうが安い株を、畜産のためのより堅牢で、より多くの胚を生成する傾向がある（12-18）を利用してきたマウス系統8。胚の分離に続いて、中性プロテアーゼディスパーゼIIは、全胚を治療するために使用されていました。その後、顔のプロミネンスは解剖されたED出て、顔の外胚葉が間葉から分離した。この方法は、顔の外胚葉と間充織の両方をそのまま保持します。この方法論を用いて得られた試​​料は、タンパク質検出、クロマチン免疫沈降（ChIP）アッセイ、マイクロアレイ研究、およびRNA-seqを含む技術に使用することができます。

ディスパーゼIIの治療後、胚の外胚葉が緩んでいる傾向にある。顔のプロミネンスは解剖（ 図2A）した後、無傷でなければなりません。隔離された顔の外胚葉は、はっきりと間葉組織（ 図2B）は無料です。プロトコルの有効性を決定するために、我々は前脳についてアッセイし、交差汚染を検出するZic3 9、外胚葉特定CDH1 5と逆転写PCRを用いた間葉系特定SOX10 10が発現した。我々の研究は、顔の外胚葉と間充織の両方が期待される遺伝子を発現させ、交差汚染（ 図3）の自由であることを確認した。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/50248/50248fig1.jpg" /> 図1。マウスE10.5顔のプロミネンスを示す模式図。E10.5胚ヘッドのヘッドと吻側ビュー（右...

胚顔面外胚葉と間充織を分離するためのプロトコルが記載されている。我々は、最初の全体の胚を扱う全体フェイシャルプロミネンスを解剖してから、顔の外胚葉と間充織を分離するためにディスパーゼIIを使用。

 Orofacial clefts are the most frequent  craniofacial defects, which affect 1.5 in 1,000 newborns worldwide1,2. Orofacial clefting is caused by abnormal ...

この手順の全体的な目標は、マウスの胚、顔面外胚葉、およびメカイを分離することです。これは、最初にCD 1つのE 10.5胚を単離することによって達成されます。手順の2番目のステップは、胚全体をdysで治療することです。フェーズ 2。酵素治療後、顔面隆起部を分離し、最終ステップは顔面皮膚を間葉から慎重に分離することです。分離された顔面皮膚と間葉は、その後、さらなる実験の準備が整います。解剖された顔面隆起のdis space治療のような既存の方法に対するこの技術の主な利点は、DYSスペースで全胚の治療が顔の事故と無傷の両方を保つことです。この方法は、異なる遺伝子発現、エピジェネティックな修飾、転写因子の結合が顔面皮膚と間葉の間の分子クロストークをどのように制御できるかなど、哺乳類の発生生物学分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。胚形成中 今から組織の分離までの間に4〜6時間で計画し、解剖領域とツールを70%エタノールで清掃します。また、サンプルがRNA単離用である場合は、RNAを離れて使用してください。鉗子が鋭利であることが重要です。さらに、RNA単離のためには、溶液を過炭酸エチルで処理する必要があります。今、E 10.5胚を収集するために承認されたプロトコルを使用して、妊娠中のCDの1人の女性を安楽死させます。腹部に70%エタノールをスプレーし、腹部を開きます。1セットの鉗子を使用して子宮を引っ張り、もう1セットを使用して子宮からメソニュートリウムを引き裂きます。子宮を体から取り出し、反対側の子宮角でこのプロセスを繰り返します。10センチのペトリ皿で氷冷したPBSで子宮を短時間すすぎ、血液を洗い流します。子宮を氷冷PBSで新しい皿に移します。着床部位間で切断することにより、1つの胚片に分離します。次に、片方の胚を実体顕微鏡で氷冷PBSに移します。カットされた場所の1つから開始します。細い鉗子を使用して子宮の筋肉壁を引き裂き、卵黄袋で胚を露出させます。次に、卵黄袋と羊膜をはがします。解剖した胚をPBSを氷上に載せた6センチメートルのシャーレに移し、すべての胚が収集されるまで手順を繰り返します。dysペースト2の胚を処理する前に、6センチメートルのペトリ皿で氷冷PBSでそれらを洗います。PBSを10ミリリットルの氷冷希釈ディスペースト2PBSに交換します。皿を覆い、摂氏37度で約25分間インキュベートします。消化を確認するために異なる可能性のあるdysフェーズ2の酵素活性に応じて時間を調整し、実体顕微鏡で見て、皮膚が緩んでいることを確認します。これは、この組織層とその下にあるメカニズムとの間に明確なギャップがあることに代表されます。緩んでいない場合は、組織をさらに5分間インキュベートします。分解が完了したら、サンプルを氷の上に置きます。今後は、dysによる

separation-of-mouse-embryonic-facial-ectoderm-and-mesenchyme

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

postimplantation段階の胚の分離は1つが遺伝子のパターンを研究し、胚発生時にプロセスを作る細胞系譜の決定を分析することができますが、初期胚の適切な解剖は挑戦することができます。このプロトコルは、初期の原始-ストリーク段階の胚を単離する方法を説明します（〜6.5日後に交尾[DPC]）。...

6.5 DPCのマウス胚の解剖

この記事では、頭蓋顔面の開発中にシグナリングと表面頭部外胚葉のパターニング特性をテストするために設計された組織移植の手法を説明します。...

頭蓋顔面の開発時には外胚葉上皮のシグナリング特性を評価する

頭蓋間充織は、おそらく神経ヒダの上昇のための駆動力を提供する劇的な形態形成運動を起こす...

頭蓋間葉の細胞挙動を評価するための外植片アッセイ

個々の胚細胞の運命は継承分子および/または隣接するセルからの信号により影響を受ける可能性がある。卵割期アフリカツメガエル胚の運命マップを利用して、単一割球は、細胞間相互作用と継承された分子の寄与を評価するために分離して培養のために識別することができます。...

胚発生時に細胞運命のコミットメントをテストするために割球植

胚性ニューロンは、神経管の脳室帯に生まれたが、適切な目標を達成するために移行している。顔面branchiomotor（FBM）ニューロンは、ニューロンの移動を研究するための有用なモデルである。このプロトコルは、FBMの移行を制御するメカニズムを調べるためにマウス胚hindbrainsのホールマウントex vivoでの文化について説明します。...

マウス後脳<em&gt;生体外</em&gt;文化顔面Branchiomotorニューロンの移行を研究する

ここでは、共焦点顕微鏡法を用いたマウス二次口蓋融合のライブイメージングのためのプロトコールを提示する。このプロトコールは、様々な蛍光レポーターマウス系統と、および機械的洞察のための経路阻害剤と組み合わせて使用​​することができる。このプロトコールは、他の発生系におけるライブイメージングに適合させることができる。...

マウス二次口蓋融合のライブイメージング

このプロトコルは、主に細胞移動の研究のために、マウスモデルからの頭蓋神経堤細胞の解剖および培養について説明する。使用されるライブイメージング技術と速度と細胞形状の変化の解析について述べた。...

神経クレスト細胞の形成と移動の研究のためのマウスからの原発性頭蓋神経クレスト細胞の解剖、培養および分析

我々は、二次元(2D)成長および創傷修復アッセイのタイムラプスイメージングのための一次マウス胚口蓋間葉細胞の単離および培養のためのプロトコルを提示する。また、タイムラプスイメージングデータの解析方法を提供し、細胞流の形成と指向運動性を決定します。...

集団運動属性を解析するためのマウス胚性口蓋前葉細胞の単離とタイムラプスイメージング

我々は、胚および成体マウス舌の上皮および間線質/結合組織から大量の高品質単一細胞を解離するための一般化されたプロトコルを開発した。...

12.5日目および8週齢マウスの舌上皮・間分性/結合組織からの細胞解離

このプロトコルは、解剖されたマウス胚の顔面プロセスまたは培養マウス胚口蓋間葉系細胞から全細胞タンパク質溶解物を単離し、その後のウェスタンブロッティングを実行してリン酸化タンパク質レベルを評価する方法を提示する。...

リンタンパク質分析のためのマウスフェイシャルプロセスおよび培養口蓋間葉系細胞からの全細胞タンパク質溶解物の単離

ここでは、胚の固定、免疫染色、および切片化のために最適化された段階的なプロトコルが提供され、発達中のマウス組織におけるサイトネムと呼ばれる特殊なシグナル伝達糸状体を検出します。...

シトネム解析のための胚性マウス組織の固定

学ぶマウス胚性顔面外胚葉と間葉の分離法。Dispase II処理によりCD-1 E10.5胚から組織を分離し、顔面隆起を摘出して外胚葉と間葉を精密に分離する技術です。

マウス胚性外胚葉顔と間葉の分離

さらに動画を探す