2013年5月5日
我々は簡単に同所ラット肝移植のための "クイックリンカ"デバイスの設計について説明します。
Joの最近のビデオ論文において、我々はラット肝移植をより容易にするためのクイックリンカーデバイスの使用について報告しました。このデバイスは市販されていませんが、専門的な技術がなくても作製することが可能です。本ビデオでは、一般的な実験器具を用いて、完全なキットを設計し、形にする方法について説明します。
ビデオをご視聴ください。ラット正位肝移植用クイックリンカーキットは、アプロキシメーター1個、下大静脈(VNA cava)用リング1個、および門脈(vena portal)用の小型リング1個で構成されています。10番のメス刃をテープで木製ボードに固定し、リングの中心を顕微鏡下に配置します。リングは、メスの溝から直線距離で1.2 centimeterの位置にある必要があります。
高速回転ドリルにダイヤモンドビットを取り付け、2 mmの穴をあけます。その後、さらに大きなダイヤモンドビットを用いて穴を広げます。体重180~240 gのラットの門脈ハンドル用として、穴の直径を2.6 mmにします。
ステンシルに示されているように、ハンドルの外形を設計します。図1に示す通り、ドリルを小型ベンチグラインダーに改造し、形状の外側にあるブレード部分を取り除きます。最後に、低速回転ブラシで部品の角を丸めて仕上げます。
アプロキシメーターは、顕微鏡下でストレートの外科用クランプまたはコーカス鉗子の一方の枝の半分を改造することで作製します。高速ミニベンチグラインダーを使用し、ハンドルが完全にスライドして挿入できるよう、両側に左右対称の溝を作ります。長い方の腕に縦方向のスリットを入れ、長い方の腕の中心と適切に配置されたハンドルが同一軸上にあることを確認します。
端の中心を向くように、長腕にノッチを設計します。分岐部分は可能な限り細くしてください。最後に、低速回転ブラシで断片を丸く整えます。ラットの体重や系統に応じて、カーフカリパーを調整してください。
ただし、ランド(厚み)は常に約4 mmに保つ必要があります。口径の範囲については、表1を参照してください。極細のPolylineチューブを用意し、10番のメスで一方の端を丸く切り落とします。
端から0.5 millimetersの位置に溝を設計します。次に、溝に達するまで慎重に切り込みを入れます。チューブに全層の切り込みを1、2箇所入れます。
これらは、グラフトの準備および移植中のカフの操作に役立ちます。最後に、端から4 mmのところでカフを切断します。ここでは、門脈用リングとそのカフ、肝下大静脈用リングとそのカフ、および1つの近似器で構成されるキットの作製方法を示しました。
これらのツールは、カフの挿入を補助することで肝臓の再移植を容易にします。すべての金属部品は融合直後に取り除かれるため、リングのサイズや形状のバリエーションに関わらず、このキットを無制限に再利用することが可能です。アプロキシメーターへのアライメントが最も重要な要因となります。
もう一つの重要な要因は溝の厚さであり、0.5 millimetersより薄くなってはいけません。例えば、下の写真では正しく成形されていますが、上の写真では2つのセグメント間の金属ブリッジが薄すぎ、このケースのように規定の寸法に従ったとしても、最終的なブラッシング段階で破断を招く可能性があります。
問題が発生せず、器具が潜在的に永続的に使用できると仮定します。
本記事では、ラットの同所性肝移植を容易にする「クイックリンカー(quick-linker)」デバイスの設計と使用方法について説明します。このデバイスは一般的な実験室用品を用いて作製できるため、多くの研究者が利用可能です。
ラット正位肝移植は、肝疾患治療薬および手術手技を評価するための重要な前臨床モデルであり続けています。クイックリンカーデバイスは、一般的な実験室用材料を用いて移植用ツールを低コストで院内製作することを可能にし、モデルへのアクセス性を向上させます。これにより、手術の再現性が向上し、疾患モデル作製における技術的なばらつきが低減されるため、初期創薬段階におけるメカニズム的なリスク低減がサポートされます。
クイックリンカーデバイスは、ターゲットバリデーションおよびリード同定段階における堅牢なモデル生成をサポートすることで、ディスカバリーワークフローに統合されます。