Name: マウスAortocaval瘻の技術的な側面 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 12 s
Description: 学ぶマウス大動脈・下大静脈瘻作成法。縫合を用いない簡便な穿刺技術で、ドップラー超音波による血流評価も可能。再現性が高く、短時間で実施できる動脈静脈短絡の新規手技です。

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この作品は、国民健康助成R01-HL095498研究所と同様、資源やVAコネチカットヘルスケアシステム、ウェストヘーヴン、コネチカット州の施設の使用とによって部分的にサポートされていました。

1。麻酔および術前の手順<ol><li>全身麻酔の導入 適切な制度アニマルケアと使用委員会の承認が得られる。 10週齢の雄のC57/blackマウスは、麻酔する。イソフルラン気化器を介して、プレキシグラスボックスに0.8 L /分の酸素とイソフルラン4％を提供し、マウスの内部に配置します。外科医が好ましい場合、あるいは、腹腔内麻酔を使用することができる。 </li><li>麻酔を維持 つま先のピンチへの反応の欠如によって麻酔を確認した後、マウスは、シリコーンマスクで仰臥位で操作テーブルに置かれます。イソフルラン麻酔を適切なレベルに維持するために、2％まで減少する。 </li><li>脱毛 腹毛は、毛の除去を使って下腹部に首から削除されます。シェーバーを使用して残っている毛はドップラー超音波と干渉する可能性があるため、髪のリムーバーが好ましい。 </li></ol> 2。術前UltrasounD <ol><li>超音波検査の目的 ドップラー超音波検査は、解剖学的および生理学的変化を表示することが術後の結果と比較することができるベース·レベルの所見を記録するようにAVFの手術に先立って行われる。 </li><li>観察のポイント 頸静脈、前掲とインフラ腎下大静脈（IVC）、腹部大動脈は、パルスドップラーとBモードの両方を使用して検査されます。 </li><li>測定結果 B-モードを使用して、それぞれの脈管の直径を測定する。また、最大速度（動脈の収縮期ピーク速度）との波形は、上述した測定点の各々に記録されている。 </li></ol> 3。術<ol><li>マウス準備 局所消毒で切開部位を準備し、手術用ドレープ、滅菌手袋や楽器の使用など手術中に適切な無菌操作を続けるなど</li><li>開腹 正中腹部切開をfとされるにただ恥骨上肝臓のROM下端縁。 </li><li>大動脈とIVCの露出。 開創器が挿入され、腸のすべてが右側に腹腔内から引き出され、生理食塩水で浸したガーゼに包まれ保持される。大動脈とIVCの完全なビューを取得するために後腹膜および下部結腸をつなぐ膜を解剖。それが拡張し、邪魔にされている場合は膀胱に圧力を適用します。 </li><li>穿刺部位の露光 穿刺部位は大動脈分岐部に左腎静脈から半分の間の距離の四分の三になります。 （ 図1）、それがパンクチャリングすることができるように、大動脈の左余白を解剖。大動脈がIVCの後ろに約45度に配置され、それが左に加えて、後方に解剖しなければならないことに留意してください。 （ 図2）、この手術の最も重要な点は、大動脈との間の解剖IVCはない。遠く、そこから続ける。 </li><li> AORのクランプ部位の露光TA 周囲の組織から大動脈大動脈を解剖。右側にその支流と左と左腎静脈にIVCを傷つけないように注意してください。 </li><li>大動脈のクランプ マイクロサークリップを適用することにより、近位大動脈をクランプ。 </li><li>大動脈の回転 穿刺大動脈のわずかに背側（ 図2）から製造することができるように、大動脈の周囲の結合組織を把持することにより、大動脈を回転させる。 </li><li> IVCに至る大動脈穿刺 25 G針を用いてIVCに至る回転位置、穿刺大動脈に大動脈を維持する。成功した場合（ 図2）、針が薄いIVC壁を通して見ることができる。 </li><li>止血 筋肉を含む後腹膜組織を、引いて、大動脈の穿刺部位をラップ。それが血栓AVF（ 図3）可能性があるので、IVCに対して大動脈を圧縮しないでください。 </li><li>大動脈を解除クランプ 確認後一次止血の、大動脈を解除クランプ。追加の出血が発生する場合があり、それは、上述のさらなる圧縮を停止することができる。クランプ解除時に、動脈血の代わりに暗い静脈血流のIVCに流入することが分かる。 </li><li>腹部の閉鎖 その自然な位置に腸を返して、​​腹部を閉じます。 </li></ol> 4。術後の手順<ol><li>術後のケア 腹部の閉鎖後、イソフルランは停止しています。鎮痛と創傷ケア含む術後ケアが制度アニマルケアと使用委員会が推奨する指示に従い、適用されます。鎮痛のために私たちは、外科手術後24時間intrasmuscularly 0.1 mg / kgを12時間毎にブプレノルフィンを使用しています。 </li><li>術後の超音波 操作後の最初の日に、ドップラー超音波は、AVFを確認するために行われる。加えて、他の変数は、手術前からの変更を確認するために測定される値。 </li></ol>

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<li>Dixon, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+don%27t+fistulas+mature%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Why don't fistulas mature?</a> Kidney International. 70 (8), 1413-1422 (2006).</li>
<li>Roy-Chaudhury, P., Spergel, L. M., Besarab, A., Asif, A., Ravani, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+of+arteriovenous+fistula+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Biology of arteriovenous fistula failure.</a> Journal of Nephrology. 20 (2), 150-163 (2007).</li>
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<li>Misra, S., Fu, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rat+femoral+arteriovenous+fistula+model%3A+increased+expression+of+matrix+metalloproteinase-2+and+-9+at+the+venous+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Radiology%22%5BJournal%5D)">The rat femoral arteriovenous fistula model: increased expression of matrix metalloproteinase-2 and -9 at the venous stenosis.</a> Journal of Vascular and Interventional Radiology. 19 (4), 587-594 (2008).</li>
<li>Kojima, T., Miyachi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+venous+hypertension+and+expression+of+vascular+endothelial+growth+factor%3A+hemodynamic+and+immunohistochemical+examinations+in+a+rat+venous+hypertension+model%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Neurology%22%5BJournal%5D)">The relationship between venous hypertension and expression of vascular endothelial growth factor: hemodynamic and immunohistochemical examinations in a rat venous hypertension model.</a> Surgical Neurology. 68 (3), 277-284 (2007).</li>
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<li>Nath, K. A., Kanakiriya, S. K., Grande, J. P., Croatt, A. J., Katusic, Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+venous+proinflammatory+gene+expression+and+intimal+hyperplasia+in+an+aorto-caval+fistula+model+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Increased venous proinflammatory gene expression and intimal hyperplasia in an aorto-caval fistula model in the rat.</a> The American Journal of Pathology. 162 (6), 2079-2090 (2003).</li>
<li>Karram, T., Hoffman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+cardiac+hypertrophy+by+a+controlled+reproducible+sutureless+aortocaval+shunt+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Surgery%22%5BJournal%5D)">Induction of cardiac hypertrophy by a controlled reproducible sutureless aortocaval shunt in the mouse.</a> Journal of Investigative Surgery. 18 (6), 325-334 (2005).</li>
<li>Perry, G. J., Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+variation+in+angiotensin-converting+enzyme+does+not+prevent+development+of+cardiac+hypertrophy+or+upregulation+of+angiotensin+II+in+response+to+aortocaval+fistula%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Genetic variation in angiotensin-converting enzyme does not prevent development of cardiac hypertrophy or upregulation of angiotensin II in response to aortocaval fistula.</a> Circulation. 103 (7), 1012-1016 (2001).</li>
<li>Guzman, R. J., Krystkowiak, A., Zarins, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+and+sustained+medial+cell+activation+after+aortocaval+fistula+creation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Early and sustained medial cell activation after aortocaval fistula creation in mice.</a> The Journal of Surgical Research. 108 (1), 112-121 (2002).</li>
<li>Castier, Y., Lehoux, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+neointima+lesions+associated+with+arteriovenous+fistulas+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Characterization of neointima lesions associated with arteriovenous fistulas in a mouse model.</a> Kidney International. 70 (2), 315-320 (2006).</li>
</ol>

頸静AVF 8と大動脈大静脈AVFに頸動脈大腿AVF、6、7を含むラットでAVFを記載しているいくつかの報告があります。9、10はラットがに比べラットで簡単に手術ができるように、マウスよりも数倍大きいマウス。それにもかかわらず、マウス遺伝子系統および変異体を活用するために、手順は、マウスモデルを含むように拡張されなければならない。いくつかの以前に公表された報告は、マウスのAVFモデルを導入したが、これらの報告書は、一般的により大きなサイズの針を使用し、右心不全のためのモデルを開発の文脈でされている11-13グスマンは我々と同様の手法が報告されていているがでそのレポート作成者は、動脈切開を閉じるために縫合糸を使用していました。13我々は分子解析のためのタンパク質とRNAのその後の抽出との潜在的な干渉を避けるために、縫合糸を使用していません。また縫合糸で動脈切開を閉じて過度の適用のリスクを運ぶ急性または遅出血につながる可能性があります瘻の張力。他のレポートでは、AVF、カフ法を用いて頸動脈と頸静脈の間に作成された図14は<...

末期腎疾患の患者の腎置換療法のために選択された最も一般的なオプションは、血液透析である。血液透析のためのアクセスが動静脈瘻（AVF）、動静脈グラフト、または一時的なカテーテル配置することによって行われる。 AVFがアクセスの好ましい態様であるが、AVFは完璧には程遠いです。一年間の主要AVFの開存率は、新生内膜過形成のために多くの障害で、唯一の60から65パーセントである。通常のAVFの形成と不適応形成の分子生物学と生理学の悪い特徴のままです。このように、多くの瘻孔形成の調節の理解に伴うゲインAVF結果の改善に得られることである。1-3 静脈グラフトとAVFも同様動脈環境に静脈を露出させていますが、動脈の流れに静脈の露出は、一般外科バイパスの直接のモデルである静脈グラフト。4、5の文脈で検討され、いくつかの重要なディがありますそれらの間fferences。静脈グラフトは、AVFにおける血流増加とせん断応力、その結果、しばしば病気の遠位小動脈にドレーンに対し、AVFは、右心房に排水として最初に、遠位流出床の抵抗は、AVFではるかに低い。第二に、AVFの静脈肢の血は、静脈と静脈グラフトで純粋に動脈の内容に比べて低酸素化につながる動脈血の混合物であることができる。第三に、AVFにおける静脈、動脈床に静脈グラフトの完全転位に比べて、その血管venorumや神経神経支配の保全につながる、そのベッドから削除されません。 AVFは通常1つしかないのに対し、最後に、吻合の数は、通常、静脈グラフト内の2つです。本研究では、AVFの研究のために使用できるaortocaval瘻のマウスモデルをご紹介します。

<table><tbody><tr><td>Vevo 770超音波装置</td><td>Visualsonics</td><td>20-60 Mhzスキャンヘッド;RMV-704</td><td></td></tr><tr><td>血管クランプ</td><td>Roboz Surgical Instrument Co.</td><td>RS-5424</td><td></td></tr><tr><td>クランプ適用鉗子</td><td>Roboz Surgical Instrument Co.</td><td>RS-5410</td><td></td></tr><tr><td>25ゲージニードル</td><td>ベクトン・ディッキンソン</td><td>BD プレシジョングライドニードル 25G x 7/8 #305124</td><td></td></tr></tbody></table>

マウスaortocaval瘻の技術的な側面

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

マウスで動静脈瘻を作成の技術的な側面について議論する。全身麻酔下、腹部切開が作成され、大動脈および下大静脈（IVC）が露出している。近位および遠位大動脈大動脈大動脈はそれぞれ、クランプ位置と針穿刺のために解剖されている。特別な注意が大動脈とIVC間の解剖を回避するために支払われます。大動脈をクランプした後、25 G針を穿刺IVCに大動脈の両方の壁に使用される。周囲の結合組織は、止血圧縮するために使用される。 AVFの成功の作成はIVCにおける拍動動脈血流が表示されます。成功したAVFの更なる確認が術後ドップラー超音波によって達成することができる。

練習後、最初の手術後当日に生存率は95％以上、一般的であり、術後7日目に、生存率は91.3パーセントであった図1と図2は、コロナと断面図における理想的な穿刺部位を示し;穿刺の配置サイトは、過度の出血なく良好な生存率を得るために重要である。術中死亡と早期術後死亡は通常出血によるものである。これは、大動脈とIVC、間、または不十分な止血圧力から過度の解剖で発生する傾向があります。 図3は、圧縮せずに良好な止血を可能にし、前に止血のための圧力を適用する結合組織に穿刺部位をラップすることの重要性の概略を示していますAVF。我々の経験では、すべての技術的には成功したAVFは三日目で超音波で確認することができます。AVFが存在すると二重に確認されれば、AVFは、通常、少なくとも28日までは安定しています図4。成功したAVF形成の典型的なドップラー超音波の所見を示しています。波形の変化はIVCにおけるAVFのレベルで、心臓に向かって観察した。術後3日目に全体のAVFの確認率は71.4％であった。 <p class="jove_content"...

目標は単純で再現性のある動静脈瘻を作り出すことである。この方法は、縫合糸や接着剤の接着剤を使用しません。したがって、サンプルが分析のために異物のうちの量で用いることができる。

マウスAortocaval瘻の技術的な側面

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

本手順の全体的な目的は、大動脈下大静脈瘻（aorta-cava fistula）を適切に作成することであり、まず穿刺部位付近の大動脈を慎重に剥離することでこれを達成します。次に、大動脈下大静脈瘻を作成したい位置の近位側で大動脈をクランプします。その後、25ゲージの針を用いて、左大動脈から下大静脈に向かって穿刺を行います。最後に、大動脈大静脈瘻を閉塞させることなく止血を行います。最終的に、ドップラー超音波を用いて大静脈血流の増加を確認します。大動脈大静脈吻合術のような既存の手法に対するこの技術の主な利点は、短時間で完了できる簡便な方法であること、および術前に時間とトレーニングを要する縫合術を使用しないことです。パルスドップラーを用いて、Bモードで腎上および腎下の下大静脈（IVC）と腹部大動脈のベースライン記録を取得し、各測定点における各血管の直径、最大血流速度、および波形を測定します。まず、すべての手術器具と血管クランプをオートクレーブで滅菌し、処置を開始します。その後、10週齢のC57BL/6オスマウスを、0.8 L/minの流量で4%イソフルランを用いて麻酔します。酸素を投与し、足先をピンチして鎮静レベルを確認します。マウスを仰臥位にします。シリコンマスクを装着し、2% isof fluorineを投与します。除毛剤を用いて、頸部から下腹部までの除毛を行います。まず、手術部位を70% ethanolで消毒します。術中鏡下で、肝臓下端から恥骨直上まで正中切開を行います。リトラクターを挿入し、腹腔内から腸管全体を取り出します。次に、生理食塩水で湿らせたガーゼで腸管を包み、右側に配置します。後腹膜と下行結腸を繋いでいる膜を剥離し、大動脈と下大静脈（IVC）を完全に露出させます。膀胱が拡張して妨げになっている場合は、圧迫してずらします。次に、左腎静脈から大動脈分岐部までの距離の1/2から3/4の間に部位を設けます。大動脈の左縁を剥離し、穿刺できるようにします。大動脈は下大静脈（IVC）の約45度後方に位置しているため、後方および左方向へ剥離する必要があります。大動脈とIVCの間を剥離しないよう注意しながら、左側のIVCおよび右側の左腎静脈とその分枝を損傷させないように、腎下大動脈を周囲組織から慎重に剥離します。マイクロサージャリー用クリップを用いて近位大動脈をクランプし、大動脈とIVCを囲む結合組織を把持して回転させ、大動脈のわずかに背側から穿刺できるようにします。この回転させた位置のまま、25ゲージの針を用いて大動脈から下大静脈（IVC）に向けて穿刺します。針が薄いIVC壁を通して見えるはずです。止血クランプを外して成功したことを確認すると、暗赤色の静脈血ではなく、大動脈からの動脈血がIVCに流入しているのが観察できます。最後に、腸管を元の位置に戻し、6-0縫合

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医学

我々は、マウスからの腹部大動脈の部分がちょうど同種もしくは同系レシピエントにおける腎動脈下に同所移植する技術が記載されている。この手法は、均一な大きさの大きな動脈の移植が有利と認められる研究に役立つことがあります。...

血管疾患の研究のためのマウスにおける同所性大動脈移植

このビデオでは、alloimmuneによる血管拒絶反応を研究するためのマウス大動脈介在モデルを生成する方法を示します。麻酔をかけたドナーマウスを仰臥位に置いた後、腎下腹部大動脈(IAA)を周囲の構造から慎重に分離します。分岐血管は結紮され、IAAの両端は切除前の血流を防ぐためにクランプされます。その後、ドナーIAAを同種レシピエントマウスに移植し、吻合により血流を回復させ、同種免疫による血管拒絶反応を調査します。...

Alloimmune誘発血管拒絶反応を研究するためのマウス大動脈介在モデル

私たちは、マウスのグラフトarteriosclerois（GA）は、同じ近交系のレシピエントにマウスの血管セグメントの介在を含むモデルのプロトコルを記述します。血管ドナーへの追加の遺伝的変化を交配することにより、モデルがGA上の特定の遺伝子の効果を評価することができる。...

グラフト動脈硬化のマウスモデル

我々は、成体マウスにおける脳静脈性高血圧の信頼性モデルを作成するための方法を記載している。このモデルは、広くラットに記述され、テストされている。マウスにおけるこの新たな対応物の遺伝子改変動物を使用する可能性を開き、それによってモデルの適用を広げる。...

成体マウス静脈性高血圧モデル：外頸静脈吻合部の総頸動脈。

マウスにおける大動脈介在グラフトのプロトコルを記述します。このプロトコルの目標は、動脈の同種免疫反応とその結果として臓器移植の失敗に寄与する動脈変化に関連する病理学的プロセスと治療戦略を研究するためのモデルを提供することです。...

同種免疫により誘導される血管拒絶反応および移植動脈硬化症のマウスモデル

ここでは、臨床的に関連性のある吻合構成が組み込まれた動静脈瘻(AVF)不全のマウスモデルを提示します。このモデルは、病態生理学の研究や可能な治療介入のテストに使用できます。...

動静脈瘻の障害の新規マウスモデル：詳細の外科的手順

マウスで大動脈を穿刺し、下大静脈（IVC）を通してマウスに大動脈瘻を作成した後、薬物を含む溶液を同じ針でIVCに注入し、その後インキュベーションします。この方法により、外部経路と比較して、静脈内皮へのより堅牢な薬物送達が可能になります。...

マウスの動静脈瘻内皮への管腔内薬物送達

マウスでスリーブを用いた同所性同種大動脈移植モデルを提案します。それは非常に急速な吻合法のことで、血管疾患の研究に用いることができます。...

大動脈弁移植 - 教則ビデオのマウスモデルでスリーブを用いた

大器内膜瘻は、両方の壁を通して下の静脈カバに尿の赤外線大腸を穿刺することによって作成され、その後、劣った静脈カバの部分的なライゲーションを介してその流出における狭窄の作成が行われた。この再現可能なモデルは、中央静脈狭窄症の研究に使用することができる。...

流出狭窄を伴う大軌道瘻を用した中枢静脈狭窄のマウスモデル

このプロトコルは、マウスの総腸骨動静脈瘻作成の外科的ステップを詳述しています。我々は、血液透析アクセス関連の四肢の病態生理を研究するためにこのモデルを開発しました。...

血液透析アクセス関連手機能障害のマウスモデル

このプロトコールは、アポリポタンパク質E(ApoE)欠損マウスにおけるアンジオテンシンII放出によって腹部大動脈瘤を誘導するための浸透圧ポンプの連続移植、および反復薬物治療のための頸静脈カテーテルを有する血管アクセスポートの移植を記載する。3D超音波による動脈瘤発達のモニタリングは、背側インプラントにもかかわらず効果的に行われる。...

アンジオテンシンII誘発腹部大動脈瘤のマウスモデルにおける中心静脈カテーテルによる薬物治療と3D超音波によるモニタリング

学ぶマウス大動脈・下大静脈瘻作成法。縫合を用いない簡便な穿刺技術で、ドップラー超音波による血流評価も可能。再現性が高く、短時間で実施できる動脈静脈短絡の新規手技です。

マウスAortocaval瘻の技術的な側面

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